Mécanisme d'action de Bu Zhong Yi Qi Tang pour améliorer les anomalies de développement cérébral de la progéniture chez les femmes enceintes atteintes d'hypothyroïdie subclinique

MA Yan ,  

LYU Xiaojiao ,  

HUANG Yangling ,  

MA Xiande ,  

GAO Tianshu ,  

CONG Peiwei ,  

CHEN Wei ,  

摘要

L'objectif de cette étude était d'évaluer les effets pharmacologiques du traitement de l'hypothyroïdie subclinique (SCH) pendant la grossesse avec la formule Bu Zhong Yi Qi Tang sur le développement cérébral de la progéniture et d'explorer ses mécanismes d'action potentiels. Des femelles rats SPF ont subi une thyroïdectomie totale gauche suivie d'une injection sous-cutanée de lévotyroxine (L-T4) pour créer un modèle de SCH. Au total, 48 rats ont été répartis en groupes : groupe témoin (8 rats), groupe modèle (40 rats), groupes à faible, moyenne et forte dose de Bu Zhong Yi Qi Tang (5,58, 11,16, 22,32 g∙kg-1) et groupe Eutirox (4,5×10-6 g∙kg-¹), 8 rats par groupe, qui ont été mis en contact avec des rats mâles normaux pour la reproduction. Les médicaments ont été administrés deux semaines avant la grossesse et pendant toute la gestation. Des colorations à l'hématoxyline-éosine (HE) et au Golgi-Cox ont été utilisées pour étudier les changements pathologiques dans l'hippocampe de la progéniture des rats des différents groupes. La méthode Western blot a été utilisée pour étudier l'effet de Bu Zhong Yi Qi Tang sur l'expression des protéines cytochrome c oxydase I (COXⅠ) et cytochrome c oxydase IV (COXⅣ) dans l'hippocampe de la progéniture des rats, et la méthode colorimétrique a été utilisée pour étudier l'effet de Bu Zhong Yi Qi Tang sur la teneur en adénosine triphosphate (ATP) dans l'hippocampe de la progéniture des rats. Dans les expériences in vitro pour établir un modèle de dommages oxydatifs aux cellules de phéochromocytome des glandes surrénales de rats induits par le H₂O₂, des rats, des interventions ont été réalisées avec SGI-1027, du sérum sanguin contenant Bu Zhong Yi Qi Tang et du sérum sanguin contenant Eutirox. La méthode de test de viabilité et d'activité cellulaire (CCK-8) a été utilisée pour étudier la prolifération cellulaire dans les différents groupes. La méthode immunofluorescence (IF) a été utilisée pour étudier l'expression de la tubuline bêta-3 (TUBB3) dans les cellules PC12. La méthode Western blot a également été utilisée pour étudier l'expression des protéines tétniques (TETs) et la méthyltransférase de l'ADN (DNMTs) dans les cellules PC12, ainsi que par des méthodes de coloration DCFH-HA, enzymatique, de coloration JC-1 pour étudier l'effet de Bu Zhong Yi Qi Tang sur le niveau d'oxydants actifs (ROS), la teneur en ATP et le potentiel membranaire mitochondrial dans les cellules PC12. En comparaison avec le groupe de fausse opération, le nombre de neurones dans l'hippocampe, la forme et le placement serré des corps cellulaires, la longueur moyenne des dendrites, la complexité et la densité des épines dendritiques de la progéniture ont diminué après la modélisation. De même, l'expression de COXⅠ, COXⅣ et la teneur en adénosine triphosphate (ATP) dans le cerveau ont diminué (P<0,05, P<0,01). Après traitement avec Bu Zhong Yi Qi Tang et Eutirox, le nombre de neurones dans l'hippocampe, le placement serré des corps cellulaires, la forme des dendrites, la complexité et la densité des épines dendritiques de la progéniture sont devenus plus ordonnées, la longueur des dendrites a augmenté, la complexité et la densité des épines dendritiques ont augmenté, l'expression de COXⅠ, COXⅣ et la teneur en ATP dans le cerveau ont augmenté (P<0,05, P<0,01). Ici, à faible dose, Bu Zhong Yi Qi Tang a eu le plus grand effet thérapeutique. Dans les expériences inorganiques, Bu Zhong Yi Qi Tang a considérablement augmenté la viabilité cellulaire (P<0,01), renforcé la capacité des neurones à se différencier, diminué l'expression de la méthyltransférase (DNMTs) (P<0,05), augmenté l'expression de la déméthylase (TETs) (P<0,05), diminué la teneur en ROS (P<0,01) et restauré la teneur en ATP et le potentiel membranaire mitochondrial (P<0,01). Conclusion Bu Zhong Yi Qi Tang exerce un effet protecteur sur le développement du cerveau de la progéniture chez les femmes enceintes atteintes de SCH. Les anomalies de la méthylation de l'ADNmt, entraînant un stress oxydatif et des dommages mitochondriaux, sont les principaux mécanismes de son action, et DNMTs, TETs pourraient être des protéines clés pour sa mise en œuvre.

关键词

hypothyroïdie subclinique;développement cérébral de la progéniture;Bu Zhong Yi Qi Tang;stress oxydatif mitochondrial;méthylation

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