L'objectif de cette étude est d'explorer l'effet protecteur de l'acide betulinique (BA) sur la stéatose hépatique non alcoolique (NAFLD) et son mécanisme moléculaire potentiel. Les souris ont été induites par un régime riche en graisses et en cholestérol (HFD+HCD) pour établir la NAFLD ; 50 souris mâles C57BL/6J ont été réparties en groupe normal, groupe modèle, groupe de traitement avec la silymarine (100 mg·kg^-1), groupe à faible et à forte dose de BA (10, 30 mg·kg^-1), avec 10 souris par groupe ; les cellules cancéreuses du foie humain (HepG2) ont été stimulées par de l'acide oléique/acide palmitique (OA/PA 500/250 μmol·L^-1) pour construire un modèle cellulaire de NAFLD, l'expérience sur cellules a été divisée en groupe normal, groupe modèle (OA/PA), groupe à faible, moyen et fort dosage de BA (20, 40, 80 μmol·L^-1), groupe OA/PA+BA, groupe de transfert interférentiel d'ARN (RNAi) sous-réguler le gène p53 (sip53)+OA/PA, groupe de transfert sip53+OA/PA+BA. L'effet de la BA sur la NAFLD in vivo et in vitro a été étudié. Les biomarqueurs de lésion hépatique, y compris les transaminases alanine aminotransférase (ALT) et aspartate aminotransférase (AST) dans le sérum ont été évalués par des tests biochimiques ; la masse corporelle et l'indice hépatique de chaque groupe de souris ont été mesurés ; les changements histopathologiques et l'accumulation de graisses dans le foie ont été observés par coloration hépatique à l'hématoxyline et à l'éosine (HE), coloration à l'huile rouge et coloration fluorescente au rouge nilotique ; le niveau de stress oxydatif intracellulaire (ROS) a été mesuré par microscopie fluorescente ; l'interaction cible de la BA avec le gène p53 a été analysée par une technique de docking moléculaire; l'expression des gènes et des protéines GPX4, ACSL4, SLC7A11, p53 a été vérifiée par immunobuvardage et PCR en temps réel. Les résultats ont montré que l'intervention de BA pouvait atténuer de manière significative les lésions hépatiques induites par le régime HFD+HCD chez les souris, comparés au groupe modèle, les souris des groupes de faible et de forte dose de BA avaient des taux d'ALT et d'AST significativement plus bas (P<0.01), une amélioration de l'indice hépatique, une diminution significative de l'accumulation de gouttelettes de graisse dans les tissus hépatiques ; dans l'expérience sur cellules, le traitement par BA a réduit de manière significative le stress oxydatif induit par l'OA/PA dans les cellules HepG2, ainsi que l'accumulation intracellulaire des gouttelettes de graisse et la mort par fer, se manifestant concrètement par une réduction significative de la génération intracellulaire de ROS (P<0.01), une diminution des gouttelettes de graisse intracellulaires, une augmentation significative de l'expression des protéines et de l'ARN de GPX4 et SLC7A11 (P<0.01), en même temps qu'une diminution significative de l'expression des protéines et de l'ARN d'ACSL4 (P<0.01). L'étude des mécanismes a montré que la BA inhibe de manière significative le niveau de phosphorylation du gène p53 (P<0.01) ; il est à noter que, lors de l'utilisation du transfert sip53, l'effet de régulation de la BA sur la mort par fer des cellules HepG2 a été affaibli, se traduisant par l'absence de différences statistiquement significatives entre le groupe sip53 et le groupe de transfert BA+sip53 en termes d'accumulation de gouttelettes de graisse, d'expression des protéines GPX4/SLC7A11/ACSL4, etc. Ce résultat confirme que l'abaissement du gène p53 peut éliminer l'effet régulateur de la BA sur la mort par fer des cellules HepG2, et bloquer l'effet de la BA sur l'axe de signalisation p53/GPX4. En conclusion, la BA atténue la mort par fer en inhibant le signal p53, son mécanisme pourrait être d'inhiber le niveau de phosphorylation de p53 pour jouer un rôle protecteur dans la NAFLD, fournissant ainsi une base théorique importante et une cible thérapeutique potentielle pour le développement de nouveaux médicaments pour le traitement de la NAFLD.

acide betulinique; docking moléculaire; axe de signalisation p53; mort par fer; stéatose hépatique non alcoolique