Exploration du mécanisme de régulation de l'activation mitochondriale de l'autophagie par la silymarine après l'infection des cellules de leucémie monocytaires par HCoV-229E

SUN Qiyue ,  

BAO Lei ,  

GENG Zihan ,  

ZHAO Ronghua ,  

LI Shuran ,  

CUI Xihe ,  

ZHANG Jingsheng ,  

LIU Xian ,  

XIE Rui ,  

CUI Xiaolan ,  

GUO Shanshan ,  

SUN Jing ,  

摘要

L'objectif de l'étude est d'étudier l'effet protecteur du silymarin sur les lésions des cellules de leucémie monocytaires de moule (RAW264.7) infectées par le coronavirus humain (HCoV)-229E et le mécanisme, afin de fournir une base expérimentale pour le développement et l'application du silymarin. Méthodes: Des cellules RAW264.7 étaient infectées par différentes concentrations de HCoV-229E pour établir un modèle de lésion cellulaire par infection par le coronavirus, avec une analyse de la prolifération et de l'activité cellulaire (CCK-8). Les cellules ont été réparties au hasard en un groupe normal, un groupe de silymarine (125 μmol·L-1), un groupe modèle (HCoV-229E) et un groupe de HCoV-229E+silymarine (HCoV-229E+silymarine 125 μmol·L-1). La viabilité des cellules a été évaluée par CCK-8 pour calculer la concentration maximale non toxique (CC0) des cellules RAW264.7 à la silymarine, la concentration cytotoxique médiane (CC50), ainsi que la concentration effective médiane (EC50) et l'indice thérapeutique (SI) de la silymarine pour les cellules infectées par HCoV-229E. La vitalité et la toxicité des cellules ont été mesurées par une double coloration avec calceïne/PI, le potentiel de la membrane mitochondriale (MMP) a été mesuré par coloration avec JC-1, et le niveau d'autophagie mitochondriale de chaque groupe cellulaire a été évalué par le marquage avec le virus de la mitochondrie. Résultats: Un modèle d'infection des cellules RAW264.7 par HCoV-229E à une concentration initiale a été établi avec succès. La concentration CC0 de la silymarine était de 125 μmol·L-1, la valeur de CC50 était de 448,25 μmol·L-1; l'EC50 pour les cellules infectées par HCoV-229E était de 46,28 μmol·L-1, avec un SI de 9,68. Comparé au groupe normal, le taux de survie des cellules du groupe modèle a considérablement diminué (P<0,01), le taux de décès cellulaire a considérablement augmenté (P<0,01), le MMP a considérablement diminué (P<0,01), et le niveau d'autophagie mitochondriale a considérablement diminué (P<0,01). Comparé au groupe modèle, la survie des cellules après l'intervention de la silymarine a considérablement augmenté (P<0,01), le taux de décès cellulaire a considérablement diminué (P<0,01), l'amélioration du MMP était significative (P<0,01), le niveau d'autophagie mitochondriale a considérablement augmenté (P<0,01). Conclusion: La silymarine peut augmenter le taux de survie des cellules de leucémie monocytaires après l'infection par HCoV-229E, et son mécanisme peut être lié à l'activation de l'autophagie mitochondriale, au maintien de la stabilité du MMP et à la réduction des dommages mitochondriaux.

关键词

silymarine; le coronavirus humain (HCoV)-229E; cellules de leucémie monocytaires de moule (RAW264.7); autophagie mitochondriale; potentiel de membrane mitochondriale

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