Exploration du mécanisme de protection rénale de la décoction de tangkui shao san sur les souris db/db basée sur la voie de signalisation RhoA/ROCK/NF-κB
L'objectif de la recherche est d'étudier si la décoction de tangkui shao san réduit le stress oxydatif, réduit l'inflammation, ralentit ainsi la progression de la néphropathie diabétique (ND) et protège les reins en inhibant la voie de signalisation de la famille de gènes homologues de Ras A (RhoA)/Rho kinase 1 (ROCK)/facteur de transcription nucléaire -κB (NF-κB). Méthode : 8 souris db/m ont été utilisées comme groupe normal, 40 souris db/db de 8 semaines ont été divisées en groupe modèle, groupe de faible dose de décoction de tangkui shao san (8,39 g·kg-1), groupe de dose moyenne de décoction de tangkui shao san (16,77 g·kg-1), groupe de dose élevée de décoction de tangkui shao san (33,54 g·kg-1), groupe à l'épérissartan (0,025 g·kg-1), 8 souris dans chaque groupe, administration gastro-intestinale quotidienne, groupe normal et groupe modèle ont reçu une perfusion de solution saline physiologique, l'intervention a duré 12 semaines. Pendant la perfusion, les changements de poids corporel des souris, de la glycémie à jeun, et de la quantification des protéines urinaires 24 heures (PU24 h) ont été observés. Après 12 semaines d'administration continue, la coloration à l'hématoxyline-éosine (HE), la coloration de Masson ont été réalisées pour étudier les changements pathologiques dans les tissus rénaux des souris de chaque groupe; le niveau de stress oxydatif dans les tissus rénaux des souris a été détecté à l'aide du dihydroéthidine (DHE); l'activité de la superoxyde dismutase (SOD), le niveau de malondialdéhyde (MDA) dans les tissus rénaux ont été mesurés; le dosage immuno-enzymatique (ELISA) a été utilisé pour mesurer le niveau d'interleukine (IL)-1β, IL-6 dans le sérum des souris; la réaction en chaîne de polymérase quantitative en temps réel (Real-time PCR) a été utilisée pour mesurer le niveau de l'ARNm de RhoA, ROCK1, NF-κB p65 dans les tissus rénaux des souris; la méthode d'immunobuvardage a été utilisée pour mesurer le niveau des protéines FN, IV de collagène (Col Ⅳ), du facteur de croissance transformant (β1 (TGF-β1), RhoA, ROCK, NF-κB p65 dans les tissus rénaux des souris. Résultats : par rapport au groupe normal, les souris du groupe modèle ont considérablement augmenté leur poids corporel, la glycémie à jeun, les niveaux de PU24 h (P<0,01); les niveaux d'IL-1β, IL-6 ont augmenté, les tissus rénaux des souris présentaient une augmentation de volume des glomérules, un épaississement diffus du mésangium, une augmentation de la matrice mésangiale, une prolifération évidente de fibres de collagène; l'activité de la SOD a diminué, le MDA a augmenté, l'expression de l'ARNm de RhoA, ROCK1, NF-κB p65 a considérablement augmenté (P<0,01), l'expression des protéines FN, Col Ⅳ, TGF-β1, RhoA, ROCK, NF-κB p65 a augmenté (P<0,01). Par rapport au groupe modèle, les souris des groupes de faible, de moyenne et de forte dose de décoction de tangkui shao san et du groupe à l'épérissartan ont réduit leur poids corporel, la glycémie à jeun, les niveaux de PU24 h, les niveaux d'IL-1β, IL-6 dans le sérum ont diminué, une amélioration de divers degrés de la pathologie des tissus rénaux a été observée, l'activité de la SOD a augmenté, le niveau de MDA a diminué, l'expression de l'ARNm de RhoA, ROCK1, NF-κB p65 a considérablement diminué (P<0,05, P<0,01), l'expression des protéines FN, Col Ⅳ, TGF-β1, RhoA, ROCK, NF-κB p65 a augmenté (P<0,05, P<0,01). Conclusion : La décoction de tangkui shao san peut réduire le stress oxydatif et l'inflammation chez les souris db/db, réduire le dépôt de la matrice extracellulaire, ralentir la progression de la fibrose, et son mécanisme peut être d'inhiber la voie de signalisation RhoA/ROCK/NF-κB, et avoir un effet dans le traitement de la ND.
关键词
néphropathie diabétique; décoction de tangkui shao san; voie de signalisation de la famille de gènes homologues de Ras A (RhoA)/Rho kinase 1 (ROCK)/facteur de transcription nucléaire -κB (NF-κB); stress oxydatif; inflammation