Étude du mécanisme du réseau de communication médé par les miRNA dérivés des exosomes à l'interface mère-foetus favorisant l'implantation embryonnaire, basé sur la méthode de tonification des reins et d'activation sanguine

GUO Pei ,  

LIU Jiajun ,  

ZHOU Hang ,  

GUO Zeyi ,  

WANG Yili ,  

DENG Linwen ,  

ZENG Qian ,  

HUANG Jinzhu ,  

摘要

Objectif Basé sur la méthode de tonification des reins et d'activation de la circulation sanguine, explorer si la formule de tonification des reins et d'activation de la circulation peut influencer la communication cellulaire de l'interface mère-foetus en régulant les miARN dérivés des exosomes (Exo), améliorant ainsi les troubles d'implantation embryonnaire liés à l'insuffisance rénale et à la stase sanguine. Méthodes: En dehors du groupe blanc, les animaux ont reçu en gavage 450 mg·kg-1 d'hydroxyurée pendant 10 jours et 0,3 mg·kg-1 d'adrénaline pendant 7 jours consécutifs. Le modèle de trouble d'implantation embryonnaire dû à l'insuffisance rénale et à la stase sanguine a été établi par injection de 5,5 mg·kg-1 de mifépristone. Les groupes haute, moyenne et basse dose de la formule ont reçu respectivement 7,30, 3,65 et 1,83 g·kg-1 de préparation par gavage, le groupe dydrogesterone 2,63 mg·kg-1 pendant 10 jours. Après intervention, les changements pathologiques utérins ont été observés par coloration hématoxyline-éosine (HE), l'expression de la mucine 1 (MUC1), du facteur à boîte à fourche O1 (FoxO1) et de la protéine homéobox A10 (HoxA10) a été détectée par PCR en temps réel et Western blot; les expérimentations cellulaires ont utilisé des cellules épithéliales endométriales primaires (EEC) et des cellules trophoblastiques (TC), du sérum médicamenteux sans exosome a été préparé par ultracentrifugation, le milieu de culture complet a été reconstitué, les Exo extraits du surnageant cellulaire ont été cultivés en co-culture, après 48 h des tests de migration et invasion par grattage et Transwell ont été faits, et un séquençage miRNA des Exo d'origine EEC a été réalisé. Résultats Après modélisation, l'endomètre des rats était plus mince, les vaisseaux et glandes diminuaient, les villosités pinocytaires diminuaient; la formule de tonification des reins et d'activation sanguine pouvait améliorer la morphologie de l'endomètre et augmenter le nombre de villosités pinocytaires; après modélisation, l'expression de MUC1, FoxO1, HoxA10 était réduite dans tous les groupes (P<0,05), la formule de tonification des reins et d'activation sanguine à dose moyenne et élevée augmentait ces niveaux (P<0,05); après 24 h d'intervention par sérum sans Exo, les taux de migration et invasion des cellules du groupe de la formule étaient significativement augmentés (P<0,01); l'analyse GO et KEGG des Exo originaires des EEC montrait un enrichissement principal dans les processus biologiques tels que la gastrulation, la régulation de la différenciation neuronale, le développement cellulaire et la régénération, agissant via MAPK, FoxO1, Wnt, mTOR et TNF. Conclusion La formule de tonification des reins et d'activation sanguine améliore la réceptivité de l'endomètre et favorise l'implantation embryonnaire par la régulation des miRNA dérivés des exosomes, fournissant une cible potentielle pour développer des stratégies de traitement de la reproduction assistée basées sur les miRNA exosomaux, et un nouveau fondement théorique pour le traitement de l'infertilité en médecine traditionnelle chinoise.

关键词

Formule de tonification des reins et d'activation sanguine; Exosomes; Séquençage miRNA; Interface mère-foetus

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