L'objectif est d'étudier si la décoction modifiée de noyau de pêche et de rhubarbe (JTCT) traite la fibrose hépatique en inhibant la capillarisation des sinus hépatiques, et de vérifier si son mécanisme spécifique est lié aux voies de signalisation de la protéine homologue du nôte d'aile chez la mouche drosophile (Notch) et de la synthase d'oxyde nitrique endothéliale (eNOS). Méthodes : 50 souris C57BL/6 ont été réparties aléatoirement en groupe normal, groupe modèle (5 mL·kg^-1·3 j^-1), et groupes doses faible, moyenne et élevée de JTCT (JTCT-L, JTCT-M, JTCT-H) (16,6, 33,3, 66,6 g·kg^-1·j^-1). À l'exception du groupe normal, les autres souris ont reçu une injection intrapéritonéale de 20 % de solution de tétrachlorure de carbone (CCl4) dans de l'huile d'olive tous les 3 jours pendant 4 semaines pour induire le modèle de fibrose hépatique. Simultanément, les groupes JTCT-L, JTCT-M et JTCT-H ont reçu respectivement les doses par gavage quotidien pendant 4 semaines (les groupes normal et modèle recevant un volume équivalent de solution saline). Les cellules endothéliales sinusoidales hépatiques primaires (LSECs) ont été isolées à partir du foie de rats par perfusion extracorporelle avec collagénase, centrifugation en gradient de Percoll et élimination sélective des cellules de Kupffer, puis validées phénotypiquement avant expérimentation. Après culture jusqu'à la phase de croissance logarithmique, un kit d'interférence ARN court (siRNA) a été utilisé pour la transfection transitoire afin de réduire l'expression de la guanylate cyclase soluble (sGC). Ensuite, une transfection transitoire siRNA a été effectuée pour réduire sGC, suivie par l'utilisation de l'activateur Notch Jagged-1. La prolifération cellulaire de LSECs sous JTCT a été évaluée par le kit CCK-8, l'expression des gènes et protéines des voies Notch et eNOS par PCR quantitative en temps réel et Western blot, et les ions Ca^2+ intracellulaires marqués par la sonde fluorescente Fluo-4/AM. Résultats : comparée au groupe normal, la texture hépatique du groupe modèle présentait une stéatose, une infiltration de cellules inflammatoires, une dégénérescence nécrotique des hépatocytes, une désorganisation lobulaire et une hyperplasie fibreuse ; les taux sériques d'hydroxyproline (Hyp), alanine transaminase (ALT) et aspartate transaminase (AST) étaient significativement augmentés (P<0,01) ; l'expression de Notch1, Hes1, CD31 et facteur von Willebrand (vWF) était fortement élevée (P<0,01), tandis que l'expression de la forme phosphorylée (p)-eNOS/eNOS et sGC était considérablement réduite (P<0,01). Par rapport au groupe modèle, les groupes sous JTCT présentaient des baisses significatives de Hyp, ALT et AST sériques (P<0,01) ; une baisse d’expression hépatique de Notch1, Hes1, CD31, vWF (P<0,05, P<0,01) ; et une augmentation notable de p-eNOS/eNOS et sGC (P<0,05, P<0,01), avec l'effet le plus marqué dans le groupe JTCT-H (P<0,01). In vitro, comparé au groupe LSEC-1day, le groupe LSEC-5day affichait une expression élevée significative de Notch1, Hes1, CD31, vWF (P<0,01), mais une diminution de p-eNOS/eNOS et sGC (P<0,01), ainsi qu'une concentration intracellulaire de Ca^2+ significativement élevée (P<0,01). Par rapport au groupe LSEC-5day, le groupe JTCT montrait une baisse significative de Notch1, Hes1, CD31, vWF (P<0,01), une élévation de p-eNOS/eNOS (P<0,01) et une réduction de la concentration de Ca^2+ intracellulaire (P<0,01). Les différences d'expression et de concentration de Ca^2+ entre le groupe Jagged1 et Jagged1+JTCT n'étaient pas statistiquement significatives. Par rapport au groupe LSEC-5day, le groupe sGC-KO montrait une expression élevée de CD31 et vWF (P<0,01). Il n'y avait pas de différence significative entre les groupes sGC-KO et sGC-KO+JTCT. Conclusion : JTCT traite la fibrose hépatique en inhibant l'activation de la voie Notch et en restaurant l'activité de la voie eNOS, ce qui inhibe la capillarisation des LSECs.

Décoction modifiée de noyau de pêche et de rhubarbe; capillarisation des sinus hépatiques; voie de signalisation du gène homologue à Notch; voie de signalisation de la synthase d'oxyde nitrique endothéliale (eNOS); fibrose hépatique