L'objectif de cette étude était d'explorer le mécanisme d'inhibition de la métastase du cancer du côlon par la stimulation de la sécrétion de C-C-chimiokine ligand 5 (CCL5) par les macrophages associés aux tumeurs de type M2 (TAMs) et d'étudier le mécanisme d'inhibition de la métastase du cancer du côlon par un médicament appelé Sinlian Jiadu Fang. Méthodes : La différenciation des monocytes des globules blancs humains (THP-1) en TAMs de type M2 a été confirmée morphologiquement et par PCR en temps réel, et ils ont été co-cultivés avec des cellules cancéreuses du côlon HCT116. Les groupes suivants ont été établis : groupe témoin (cellules HCT116), groupes d'intervention CCL5 (20, 40, 60 μg·L^-1), co-culture (cellules HCT116 et TAMs), groupes Sinlian Jiadu Fang (faible, moyen, élevé 1, 2, 3 g·L^-1), groupe avec des anticorps CCL5 (2 mg·L^-1). La quantité de CCL5 dans le milieu de culture cellulaire a été mesurée par ELISA, un essai de prolifération cellulaire CCK-8 a été utilisé, et une étude de cicatrisation des plaies cellulaires et une migration Transwell ont été réalisées, accompagnées d'une mesure de l'expression de l'adhérence E (E-cadhérine), de la nouvelle adhérence (N-cadhérine), de la vimentine (vimentine), du bêta- caténine (β-catenin), du STAT3 (STAT3) phosphorylée. Résultats : La transformation de THP-1 en TAMs de type M2 a augmenté l'expression de l'arginase-1 (Arginase-1), du ligand de chimiokines 22 (CCL22) (P<0.01). Dans le groupe de cellules macrophages M0 en culture, la quantité de CCL5 a augmenté, mais sans différence significative. Les groupes avec les macrophages M2 et la co-culture ont montré une augmentation statistiquement significative de la quantité de CCL5 (P<0.01). Comparés à la co-culture, les groupes de Sinlian Jiadu Fang ont réduit la quantité de CCL5 (P<0.05, P<0.01). Les résultats du CCK-8 ont montré que dans les groupes avec intervention CCL5 (2.5~100 μg·L^-1), la viabilité cellulaire n'était pas significativement différente pendant 24, 48, 72 heures. L'essai de prolifération cellulaire n'a montré aucune différence statistiquement significative entre le groupe témoin et les groupes d'intervention CCL5 (20, 40, 60 μg·L^-1). Les résultats de l'expérience de cicatrisation des plaies cellulaires et de migration Transwell ont montré que les groupes avec intervention CCL5 (20, 40, 60 μg·L^-1) et la co-culture avaient une augmentation statistiquement significative de la migration cellulaire (P<0.01). Comparés à la co-culture, les groupes avec des anticorps CCL5 et Sinlian Jiadu Fang ont réduit significativement la capacité de migration des cellules cancéreuses du côlon (P<0.01). Les résultats de Western blot ont montré que les groupes avec intervention CCL5 et la co-culture ont réduit significativement l'expression de l'E-cadhérine (P<0.01), de la nouvelle cadhérine, la vimentine, la β- caténine, le STAT3, et augmenté la phospho-STAT3 (P<0.05, P<0.01). Comparé à la co-culture, les groupes avec Sinlian Jiadu Fang et les anticorps CCL5 ont montré une réduction significative de l'expression de la nouvelle cadhérine, de la vimentine, de la β-catenine, du STAT3, de la phospho-STAT3 et du ratio phospho-STAT3/STAT3 (P<0.05, P<0.01), et une augmentation significative de l'expression de l'E-cadhérine (P<0.01). Conclusion : La stimulation de la sécrétion de CCL5 par les TAMs-HCT116 augmente la migration des cellules cancéreuses du côlon et participe à l'activation du signal de transduction STAT3/β-catenin. Le médicament Sinlian Jiadu Fang est capable de réduire la capacité de migration des cellules HCT116 dans la culture avec des macrophages de type M2 en régulant le CCL5, en inhibant la phosphorylation de STAT3 et le déséquilibre de l'expression des marqueurs de l'EMT.

Sinlian Jiadu Fang; cancer du côlon; macrophages associés aux tumeurs; C-C-chimiokine ligand 5 (CCL5); transition épithéliale mésenchymateuse (EMT)