Establishment and Evaluation of Mouse Model of Cerebral Infarction with Qi and Yin Deficiency Syndrome Based on Metabolomics

YUAN Yue ,  

GAO Yunxiao ,  

ZHANG Qiuyan ,  

CHEN Xiaoxiao ,  

SHI Yali ,  

HU Longxiao ,  

LIU Jianxun ,  

REN Junguo ,  

摘要

Le but de cette étude est de développer une méthode de préparation du modèle de souris insuffisance vent thermique induite par le cycloheximide carboxylé (STZ) combiné à la méthode photochimique, et d'évaluer la base biologique du modèle établi. La méthode a divisé 40 souris C57B6 / J en groupes aléatoires: groupe normal et groupe modèle, 20 individus dans chaque groupe. Le groupe normal n'a pas été traité, le groupe modèle a été injecté avec le STZ (55 mg / kg-1), une fois par jour pendant 5 jours. Après 14 jours de l'induction par cycloheximide, 10 souris ont été sélectionnées au hasard dans le groupe normal pour le groupe photochimique, et 10 souris du groupe modèle pour le groupe STZ + photochimique. Utilisation de l'injection de solution de rose combinée avec une irradiation laser à 520 nm a provoqué la formation de thrombus chez les souris et a induit un AVC chez les souris. En observant l'état général, le poids corporel, la force de prise, la température anoréctale, les expériences comportementales, la cage à mâcher de métabolisme énergétique, les valeurs linguistiques R, B, G, le contenu d'adénosine triphosphate (ATP), le facteur de libération de la corticotropine (CRF), le niveau de triiodothironine (T3) et d'autres méthodes ont été utilisés pour évaluer les changements d'indicateurs de syndrome de souris avec insuffisance veineuse thermique; en mesurant la réaction des stress oxydatifs de la souris dans le sérum, la superoxyde dismutase (SOD), l'interleukine-1β (IL-1β), IL-6, le facteur de nécrose tumorale-α (TNF-α), ainsi que des notes de Bederson, des changements pathologiques de l'AVC des souris ont été découverts. Enfin, en utilisant la chromatographie liquide ultraperformante couplée à une spectrométrie de masse en tandem à quadrupôle à temps de vol (UPLC-Q-TOF-MS), les métabolites endogènes des souris ont été analysés, une analyse statistique multivariée a été réalisée en utilisant la méthode d'analyse de discrimination de moindres carrés (PLS-DA) et l'analyse discriminante des moindres carrés orthogonal (OPLS-DA), avec des critères de sélection de données définis comme l'importance de la projection variable (VIP) & gt; 1, le facteur de différence (FC) & lt; 0.8 ou FC & gt; 1.2, P & lt; 0.05, les métabolites différents ont été identifiés, et en fin de compte, le site MetaboAnalyst 3.0 a été utilisé pour l'enrichissement des métabolites, l'étude des profils métabolomiques des souris avec insuffisance de l'articulation et la base biologique de l'AVC. Les résultats des indicateurs de syndrome ont montré que, par rapport au groupe normal, les souris du groupe modèle avaient une baisse de poids corporel, une augmentation de la température anoréctale, une diminution de la capacité de mouvement des membres et de l'efficacité du métabolisme énergétique cellulaire, une baisse de la teneur en ATP, des valeurs R, G, B sur la langue ont diminué, la vitesse de récupération du glucose a diminué ( P & lt; 0.01, P & lt; 0.05). Pour les indicateurs de maladie, comparés au groupe normal, les notes de Bederson du groupe photochimique et STZ + photochimique ont augmenté, la prise a diminué, SOD a diminué, les niveaux d'inflammation ont augmenté ( P & lt; 0.05). Les résultats de l'analyse métabolomique ont montré un bon modèle de séparation des composants entre les souris, des différences notables entre les composants, l'identification de 44 métabolites différents chez les souris avec AVC, insuffisance thermique veineuse, dont 32 métabolites ont été augmentés, tels que les triglycérides, les monoacylglycérides, les phospholipides et les neurosinolides; 12 métabolites diminués, principalement des acides aminés et des métabolites de phosphate. Les échantillons d'insuffisance veineuse thermique ont été enrichis, révélant des voies métaboliques principalement enrichies, appartenant aux processus internes de biosynthèse d'acide folique, biosynthèse de terpènes, métabolisme des phospholipides, métabolisme de vitamine B6, voies métaboliques de graisses et voies métaboliques de sphingolipides. Ces voies impliquaient le transport de lipides, la résistance à l'insuline et le métabolisme de l'énergie. Conclusion: l'injection de STZ combiné à la méthode photochimique a permis de créer avec succès un modèle murin d'insuffisance thermique veineuse et d'intervenir dans la biosynthèse d'acide folique, la biosynthèse des terpènes, le métabolisme des phospholipides, le métabolisme de la vitamine B6 et des voies métaboliques des graisses.

关键词

photochemical method;cerebral infarction;Qi and Yin deficiency syndrome;disease-syndrome combination;metabolomics;streptozotocin(STZ)

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