Établissement et évaluation du modèle de souris ischémo-vasculaire d'épuisement de qi et de yin basé sur la métabolomique

YUAN Yue ,  

GAO Yunxiao ,  

ZHANG Qiuyan ,  

CHEN Xiaoxiao ,  

SHI Yali ,  

HU Longxiao ,  

LIU Jianxun ,  

REN Junguo ,  

摘要

Méthodes d'induction du modèle de souris ischémo-vasculaire d'épuisement de qi et de yin avec l'uricane et la méthode de photochimie combinée, et évaluation de base biologique du modèle établi. Les 40 souris C57BL6/J ont été réparties au hasard en un groupe normal et un groupe modèle, chacun comprenant 20 souris. Le groupe normal n'a pas été traité, le groupe modèle a reçu une injection intrapéritonéale de STZ (55 mg/kg-1) une fois par jour pendant 5 jours consécutifs. Après la fin de l'induction de STZ, 14 jours plus tard, 10 souris du groupe normal ont été sélectionnées au hasard pour former le groupe photochimique, et 10 souris du groupe modèle ont été sélectionnées au hasard pour former le groupe STZ + photochimique. Une solution de rose bengale a été injectée (125 mg/kg-1) en combinaison avec une irradiation laser à 520 nm pour induire des thromboses chez les souris et provoquer un AVC. L'état général, la masse corporelle, la force de préhension, la température rectale, les tests de comportement, le métabolisme énergétique, les valeurs R, G et B de la langue, la teneur en ATP, le facteur de libération corticotrope, le taux de triiodothyronine, etc. ont été évalués pour suivre les modifications des indicateurs de qi et de yin chez les souris ; la modification pathologique de l'AVC chez les souris a été évaluée en mesurant les niveaux de SOD, d'IL-1β, d'IL-6, de TNF-α dans le sérum sanguin et en utilisant l'échelle de Bederson. Enfin, la méthode de chromatographie liquide-ionisation électrospray à haute performance-spectrométrie de masse à temps de vol (UPLC-Q-TOF-MS) a été utilisée pour détecter les métabolites endogènes des souris. Une analyse statistique multivariée a été effectuée en utilisant la méthode d'analyse factorielle discriminante par moindres carrés partiels (PLS-DA) et la méthode d'analyse factorielle discriminante orthogonale par moindres carrés partiels (OPLS-DA) pour identifier les métabolites différenciés avec des critères de sélection de données : valeur VIP > 1, facteur de différence (FC) < 0,8 ou> 1,2, P < 0,05, obtenir des métabolites différentiels, et utiliser le site Web Metabo Analyst 3.0 pour enrichir les voies métaboliques des métabolites différentiels pour explorer le profil métabolique et la base biologique des souris ischémo-vasculaires d'épuisement de qi et de yin. Résultats En ce qui concerne les indicateurs de qi et de yin, comparés au groupe normal, les souris du groupe modèle ont montré une réduction de la masse corporelle, une augmentation de la température rectale, une diminution de la capacité motrice des membres et de l'efficacité du métabolisme énergétique, une diminution de la teneur en ATP, une diminution des valeurs R, G, B de la langue, une diminution de la vitesse de régulation de la glycémie (P < 0,05, P < 0,01). En ce qui concerne les indicateurs de maladie, comparés au groupe normal, les scores de Bederson, une diminution de la force de préhension, une diminution des niveaux de SOD et une augmentation des niveaux de facteurs inflammatoires ont été observés dans les groupes photochimique et STZ + photochimique (P < 0,05). Les résultats de la détection métabolomique ont montré un bon modèle de séparation des composants entre les groupes de souris, avec des différences significatives entre les composants. Après identification des données de spectrométrie de masse, 44 métabolites différentiels chez les souris ischémo-vasculaires d'épuisement de qi et de yin ont été identifiés, dont 32 métabolites en hausse, principalement des lipides triacyles, des diacylglycérols, des phospholipides et des amides lipidiques neuronaux ; 12 métabolites en baisse, principalement des acides aminés et des phosphates. Enrichissement des voies métaboliques des métabolites différentiels a révélé que ces voies étaient principalement associées à la biosynthèse de l'acide folique, à la biosynthèse du squelette terpénique, au métabolisme des phospholipides de glycérol, au métabolisme de la vitamine B6 et au métabolisme des lipides de glycérol et de sphingolipides, et ces voies étaient principalement impliquées dans le transport lipidique, la résistance à l'insuline et le métabolisme énergétique, entre autres processus internes. Conclusions La méthode d'induction STZ combinée à la photochimie peut établir avec succès un modèle de souris ischémo-vasculaire d'épuisement de qi et de yin, et intervenir dans la biosynthèse de l'acide folique, la biosynthèse du squelette terpénique, le métabolisme des phospholipides de glycérol, le métabolisme de la vitamine B6 et les voies de métabolisme des lipides de glycérol et de sphingolipides, et d'autres processus internes.

关键词

méthode photochimique ; AVC ; épuisement de qi et de yin ; combinaison de maladies ; métabolomique ; uricane (STZ)

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