Objectif : Le promoteur U6 est un élément clé dans le système d'édition génétique CRISPR/Cas9 des plantes dicotylédones, conduisant l'expression de l'ARN guide (sgRNA), composé de courtes séquences répétées palindromiques regroupées. Les promoteurs endogènes U6 présentent généralement une activité transcriptionnelle plus élevée, améliorant significativement l'efficacité de l'édition génétique. Cette étude vise à identifier les promoteurs U6 endogènes chez l'artemisia afin d'optimiser son système d'édition génétique CRISPR/Cas9, ce qui est crucial pour le breeding moléculaire de l'artemisia. Méthodes : En se basant sur la séquence très conservée de l'ARNsn U6 chez Arabidopsis, les promoteurs U6 endogènes ont été extraits du génome complet d'artemisia, puis des vecteurs recombinants exprimant le gène luciférase (LUC) sous le contrôle des promoteurs U6 candidats ont été construits, transformés de manière transitoire dans le tabac et l'activité transcriptionnelle des promoteurs a été évaluée par imagerie in vivo et système rapporteur à double luciférase. Résultats : 8 promoteurs endogènes U6 d'artemisia ont été clonés avec succès. L'analyse des séquences a révélé que ces promoteurs contiennent des éléments cis conservés influençant leur activité transcriptionnelle, tels que le USE et la boîte TATA. Le test d'activité à la double luciférase a montré que l'activité transcriptionnelle de AaU6-3, AaU6-1 et AaU6-5 était significativement supérieure à AtU6-26 d'Arabidopsis, avec AaU6-3 comme le plus actif. Conclusion : Cette étude a identifié 3 promoteurs endogènes U6 à haute activité transcriptionnelle chez artemisia, fournissant des éléments fonctionnels importants pour le développement d'un système d'édition génétique efficace, contribuant ainsi à l'amélioration moléculaire précise et à l'innovation des ressources génétiques de haute qualité de l'artemisia.

Artemisia; promoteur U6; activité transcriptionnelle