Objectif : Le promoteur U6 est un élément clé qui pilote l'expression de l'ARN guide (sgRNA) dans le système d'édition génomique CRISPR/Cas9 chez les plantes dicotylédones. Il se compose de courtes séquences répétées palindromiques (CRISPR). Les promoteurs U6 endogènes spécifiques à chaque espèce présentent généralement une activité transcriptionnelle plus élevée, améliorant ainsi significativement l'efficacité de l'édition génétique. Cette étude vise à identifier les promoteurs U6 endogènes chez l'Artemisia annua afin d'optimiser son système d'édition génomique CRISPR/Cas9, ce qui est d'une importance majeure pour le croisement moléculaire de cette plante. Méthodes : Basées sur la séquence fortement conservée du petit ARN nucléaire U6 (snRNA) d'Arabidopsis, les séquences des promoteurs U6 endogènes ont été extraites du génome complet d'Artemisia annua. Des vecteurs recombinants exprimant le gène luciférase (LUC) sous le contrôle des promoteurs U6 candidats ont été construits, puis introduits temporairement dans le tabac, et l'activité transcriptionnelle de chaque promoteur a été évaluée par imagerie in vivo et par un système de rapport luciférase double. Résultats : Huit promoteurs U6 endogènes ont été clonés avec succès chez Artemisia annua. L'analyse des séquences a montré que ces promoteurs contiennent des éléments cis conservés, USE et boîte TATA, qui influencent leur activité transcriptionnelle. Les essais de luciférase double ont révélé que les promoteurs AaU6-3, AaU6-1 et AaU6-5 présentaient une activité transcriptionnelle significativement plus élevée que AtU6-26 d'Arabidopsis, AaU6-3 montrant la plus grande activité. Conclusion : Cette étude a identifié trois promoteurs U6 endogènes à haute activité transcriptionnelle chez Artemisia annua, fournissant des éléments fonctionnels importants pour la construction d'un système d'édition génétique efficace, ce qui contribuera à promouvoir le croisement moléculaire précis et l'innovation dans les ressources génétiques de qualité d'Artemisia annua.

Artemisia annua;promoteur U6;activité transcriptionnelle