L'objectif est de construire un réseau de régulation compétitif d'ARN endogène (ceRNA) lié au microARN-342-3p (miR-342-3p) et d'explorer le mécanisme moléculaire par lequel le Danlou Tablet (DLT) améliore le dépôt lipidique hépatique via l'ARN circulaire riche en cystéine transmembranaire BMP régulateur 1 (circCRIM1)/miR-342-3p/facteur de transcription boîte SRY 6 (SOX6) médiant la synthèse d'acides gras. Les bases de données ont été utilisées pour construire le réseau de régulation ceRNA lié à miR-342-3p, et des essais rapporteurs à double luciférase ont été réalisés pour valider les relations cibles circCRIM1/miR-342-3p et miR-342-3p/SOX6. Dans les expérimentations in vivo, les souris C57BL/6 ont été utilisées comme groupe témoin nourri avec une alimentation ordinaire, tandis que les souris knock-out de l'apolipoprotéine E (ApoE^-/-) ont été réparties aléatoirement en groupe modèle, groupes DLT à faible, moyen et haut dosage (DLT-L, DLT-M, DLT-H, respectivement 340, 680, 1360 mg·kg^-1·j^-1) et groupe simvastatine (2,275 mg·kg^-1·j^-1). Le modèle a été établi par alimentation riche en graisses pendant 12 semaines, suivi d'une administration orale simultanée pendant 4 semaines. Un analyseur biochimique automatique a été utilisé pour mesurer les lipides sériques et la fonction hépatique des souris, et des kits ont été utilisés pour détecter les niveaux lipidiques hépatiques. Les altérations pathologiques des tissus hépatiques ont été observées par coloration hématoxyline-éosine (HE) et Oil Red O. L'expression de circCRIM1 et miR-342-3p dans le foie a été détectée par PCR quantitative en temps réel, ainsi que l'expression de SOX6, PPARγ, LXRα, SREBP1c au niveau ARNm et protéique par PCR en temps réel et système de western blot automatisé Wes. L'immunohistochimie a été utilisée pour détecter l'expression de SOX6 dans les tissus hépatiques. In vitro, un modèle de dépôt lipidique a été établi dans les cellules HepG2 induites par l'acide oléique (OA). Les cellules ont été divisées en groupe témoin (CON), groupe OA (400 μmol·L^-1 OA), groupe sérum blanc (BS) (400 μmol·L^-1 OA + 10% sérum blanc) et groupe DLT (400 μmol·L^-1 OA + 10% sérum médicamenteux DLT). Des kits biochimiques ont été utilisés pour détecter les niveaux lipidiques dans les cellules HepG2, et la coloration Oil Red O a permis d’observer les modifications morphologiques. Une surexpression de circCRIM1 (OE-cricCRIM1), inhibition de miR-342-3p (inhibiteur miR-342-3p) et l'intervention par sérum médicamenteux DLT ont été réalisées, suivies par la détection de l'expression circCRIM1, miR-342-3p et des ARNm correspondants par PCR quantitative en temps réel. In vivo, comparé au groupe témoin, le groupe modèle présentait des anomalies significatives dans les lipides sériques, la fonction hépatique et les niveaux lipidiques hépatiques (P<0,01), avec des altérations de la structure du tissu hépatique, une augmentation des vacuoles et des gouttelettes lipidiques, une élévation significative de circCRIM1, une réduction significative de miR-342-3p, ainsi qu’une augmentation significative de l'expression de SOX6, PPARγ, LXRα et SREBP1c au niveau ARNm et protéique (P<0,01). Comparé au groupe modèle, les groupes DLT à diverses doses ont montré une amélioration significative des lipides sériques, de la fonction hépatique et des niveaux lipidiques hépatiques (P<0,05, P<0,01), avec une réduction des lésions hépatiques et de l’accumulation des gouttelettes lipidiques, une diminution de l’expression de circCRIM1, une augmentation significative de l’expression de miR-342-3p et une diminution significative de l'expression de SOX6, PPARγ, LXRα et SREBP1c au niveau ARNm et protéique (P<0,05, P<0,01). In vitro, comparé au groupe CON, le groupe OA montrait une augmentation significative des lipides dans les cellules HepG2 (P<0,01), une augmentation du nombre et de la taille des gouttelettes lipidiques, avec une amélioration après administration de sérum médicamenteux DLT; après surexpression de cricCRIM1, les niveaux d’ARN circCRIM1 et SOX6 ARNm augmentaient significativement, tandis que miR-342-3p diminuait nettement (P<0,05, P<0,01); après inhibition de miR-342-3p, SOX6 ARNm augmentait significativement tandis que miR-342-3p diminuait nettement (P<0,01); après administration de sérum médicamenteux DLT, miR-342-3p augmentait significativement, et SOX6, PPARγ, LXRα, SREBP1c ARNm diminuaient significativement (P<0,01). Conclusion: DLT peut améliorer le dépôt lipidique hépatique en régulant la synthèse des acides gras via la voie circCRIM1/miR-342-3p/SOX6, contribuant ainsi à la prévention et au traitement de l’athérosclérose.

Danlou Tablet; athérosclérose; ARN circulaire transmembranaire riche en cystéine régulateur BMP1 (circCRIM1) / microRNA-342-3p (miR-342-3p) / facteur de transcription boîte SRY 6 (SOX6); synthèse des acides gras; dépôt lipidique hépatique