Mécanisme d’action de la formule Mimenghua dans la régulation de la voie de signalisation MEK/Ras/Raf/ERK lors de la réponse inflammatoire dans un modèle animal de sécheresse oculaire
L'objectif est d'explorer le rôle et le mécanisme de la formule Mimenghua dans la régulation de la voie de signalisation de la protéine kinase activée par mitogène (MEK)/gène oncogène sarcome du rat (Ras)/kinase rapide accélératrice de fibrosarcome (Raf)/kinase régulatrice du signal extracellulaire (ERK) pour inhiber la réponse inflammatoire dans un modèle animal de sécheresse oculaire. Soixante souris C57BL/6J âgées de 8 semaines, moitié mâles et moitié femelles, ont été sélectionnées. Dix d'entre elles ont été choisies au hasard comme groupe contrôle, et les 50 restantes ont été exposées à un système de dessiccation contrôlé et ont reçu des gouttes oculaires de solution de chlorure de benzalkonium à 0,2% pendant 4 semaines pour établir un modèle de sécheresse oculaire. Après la réussite du modèle, les souris ont été réparties au hasard en groupe modèle, groupe acide hyaluronique, groupe dose faible de la formule Mimenghua (4,83 g/kg), groupe dose moyenne (9,67 g/kg) et groupe dose élevée (19,34 g/kg). Le groupe modèle a reçu un gavage de solution saline physiologique en volume équivalent pendant 4 semaines, le groupe acide hyaluronique a reçu deux instillations par jour pendant 14 jours consécutifs. Tous les deux semaines, la sécrétion lacrymale, le temps de rupture du film lacrymal et la coloration fluorescente cornéenne ont été mesurés. Après 4 semaines de traitement, les souris ont été euthanasiées et les tissus des glandes lacrymales et de la cornée ont été prélevés pour des observations histologiques avec coloration à l’hématoxyline-éosine, pour la détection des protéines MEK, Ras, Raf, ERK par Western blot, la mesure de l’expression de MEK, Ras, Raf, ERK et de l’interleukine-1β (IL-1β) dans les tissus lacrymaux et cornéens par dosage immuno-enzymatique (ELISA), ainsi que la quantification de l’expression de l’ARNm de MEK, Ras, Raf, ERK par PCR en temps réel (Real-time PCR). Les résultats ont montré une augmentation significative de la sécrétion lacrymale dans les groupes formule Mimenghua et acide hyaluronique après traitement (P<0,05) et un allongement significatif du temps de rupture du film lacrymal (P<0,05). Une restauration des lésions de la surface oculaire a été observée. Le Western blot a montré une régulation négative significative des protéines MEK, Ras, Raf, ERK dans les tissus lacrymaux et cornéens dans les groupes acide hyaluronique et dose élevée de la formule Mimenghua (P<0,05). Les résultats ELISA ont montré que le niveau d’IL-1β était le plus élevé dans le groupe modèle, et significativement réduit dans les groupes acide hyaluronique et formule Mimenghua (P<0,05). Les résultats ELISA et PCR en temps réel ont montré une augmentation significative des niveaux de MEK, Ras, Raf, ERK dans les tissus cornéens et lacrymaux dans le groupe modèle (P<0,05) et une diminution significative de l’expression de MEK, Ras, Raf, ERK dans les groupes acide hyaluronique et formule Mimenghua (P<0,05), indiquant que la formule Mimenghua peut réduire l’expression de MEK, Ras, Raf, ERK dans les tissus lacrymaux et cornéens. Conclusion: La formule Mimenghua peut augmenter la sécrétion lacrymale, prolonger le temps de rupture du film lacrymal et promouvoir la réparation cornéenne en inhibant la voie de signalisation MEK/Ras/Raf/ERK dans les tissus cornéens et lacrymaux, soulageant ainsi la réaction inflammatoire.