Étude des mécanismes par lesquels Er Chen Tang répare la barrière immunitaire iléale et améliore la masse corporelle des souris obèses induites par l'alimentation basée sur la transcriptomique unicellulaire

CHEN Jiawei ,  

LIU Maohui ,  

CHEN Jilan ,  

ZHU Jiushuang ,  

MEI Yingxiu ,  

JIN Yue ,  

XIA Xiuwen ,  

DING Weijun ,  

摘要

L'objectif est d'explorer l'effet de la décoction Er Chen Tang sur l'amélioration de la masse corporelle chez des souris obèses simples induites par une alimentation riche en graisses et le mécanisme d'action. Méthode : d'abord, une analyse transcriptomique unicellulaire (Sc-RNAseq) a été utilisée pour analyser les changements au niveau transcriptionnel dans le tissu iléal des souris du groupe normal et du groupe modèle d'obésité induit par une alimentation riche en graisses. Ensuite, un modèle de souris obèses simples a été établi par alimentation riche en graisses, les souris modélisées avec succès ont été réparties au hasard en groupe modèle, groupes à faible, moyenne et haute dose d'Er Chen Tang (7,5, 15, 30 g·kg-1), avec 8 souris par groupe, et 8 souris d'âge similaire ont été prises comme groupe normal. La masse corporelle a été mesurée à des temps fixes pendant 4 semaines de gavage. Le test de tolérance au glucose, les comportements, la coloration à l'hématoxyline-éosine (HE) et les tests biochimiques ont évalué l'efficacité globale d'amélioration de l'obésité par Er Chen Tang. Le docking protéique a prédit le degré de liaison entre les protéines correspondantes. Le docking moléculaire a prédit la liaison entre les composants clés d'Er Chen Tang et les protéines cibles. La réaction en chaîne par polymérase quantitative en temps réel (PCR en temps réel) a détecté les niveaux d'expression de TNF-α, iNOS, IL-1β, CD68, CD206, ZO-1 et Claudin-5 dans l'iléon. L'immunofluorescence a observé l'expression et la distribution de Claudin-5 et ZO-1. Résultats : les résultats préliminaires du séquençage unicellulaire ont indiqué qu'en comparaison avec le groupe normal, l'analyse GO des gènes différentiels des cellules immunitaires du groupe modèle était principalement enrichie en fonctions biologiques liées au métabolisme des lipides et à l'inflammation, ainsi qu'à la voie inflammatoire JAK/STAT. Par rapport au groupe normal, le groupe modèle a montré une augmentation significative de la masse corporelle (P<0.01), une élévation significative de la glycémie (P<0.01), une diminution significative de la force des membres (P<0.01), une augmentation notable de la masse hépatique (P<0.05), une augmentation notable des ALT et AST sériques (P<0.05, P<0.01), une augmentation des vacuoles graisseuses hépatiques, une augmentation notable de la taille des adipocytes du tissu adipeux blanc épididymaire et inguinal, ainsi qu'une augmentation de l'inflammation ; par rapport au groupe modèle, les groupes traités avec différentes doses d'Er Chen Tang ont montré une diminution significative de la masse corporelle (P<0.01), une réduction significative de la glycémie (P<0.01), une augmentation notable de la force des membres (P<0.05, P<0.01), une diminution notable de la masse hépatique (P<0.05, P<0.01), une réduction significative des ALT et AST sériques (P<0.05, P<0.01), une diminution des vacuoles graisseuses hépatiques, une réduction notable de la taille des adipocytes du tissu adipeux blanc épididymaire et inguinal, et une amélioration de l'inflammation. Une interaction possible existe entre les protéines CD68 et ZO-1, Claudin-5, et entre CD206 et ZO-1, Claudin-5. Les composants clés d'Er Chen Tang, Nobiletin, Diosmetin et Naringenin, présentent une forte affinité de liaison avec les protéines cibles ZO-1 et Claudin-5. Par rapport au groupe normal, l'expression mRNA des gènes pro-inflammatoires TNF-α, iNOS, IL-1β, CD68 était significativement augmentée (P<0.05, P<0.01), l'expression mRNA du gène anti-inflammatoire CD206 était significativement réduite (P<0.01), et l'expression mRNA des gènes des protéines de jonctions serrées Claudin-5 et ZO-1 était significativement diminuée (P<0.05, P<0.01) ; par rapport au groupe modèle, les groupes traités avec différentes doses d'Er Chen Tang ont montré une diminution significative de l'expression mRNA des gènes pro-inflammatoires TNF-α, iNOS, IL-1β, CD68 (P<0.05, P<0.01), une augmentation significative de l'expression mRNA du gène anti-inflammatoire CD206 (P<0.05, P<0.01), et une augmentation significative de l'expression mRNA des gènes Claudin-5 et ZO-1 (P<0.05, P<0.01). Par rapport au groupe normal, l'expression des protéines Claudin-5 et ZO-1 était significativement diminuée dans le groupe modèle (P<0.01) ; par rapport au groupe modèle, l'expression des protéines Claudin-5 et ZO-1 était significativement augmentée dans les groupes traités avec différentes doses d'Er Chen Tang (P<0.05, P<0.01). Conclusion : Er Chen Tang peut améliorer significativement l'augmentation de la masse corporelle induite par une alimentation riche en graisses, probablement liée à l'amélioration de l'environnement inflammatoire de l'iléon, améliorant ainsi la barrière immunitaire iléale altérée.

关键词

obésité; tissu adipeux; inflammation; barrière immunitaire; protéines de jonction serrée

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