L'objectif de cette étude est d'explorer l'effet immunomodulateur des polysaccharides Qigui sur les cellules macrophages RAW264.7 induites par les lipopolysaccharides (LPS) et d'évaluer l'effet protecteur de l'AAPS-4a, composant actif des polysaccharides Qigui, dans l'UC. Méthodes. Les polysaccharides Qigui (0,01~100 mg·L-1) ont été évalués pour leur effet sur la prolifération cellulaire et l'activité de RAW264.7 en utilisant la méthode CCK-8. L'effet de 6 types de polysaccharides Qigui (3, 10 mg·L-1) sur la sécrétion de TNF-α, d'IFN-β et de NO par les cellules RAW264.7 induites par LPS a été étudié par ELISA. Le polysaccharide actif a été caractérisé et sa masse moléculaire a été déterminée par chromatographie par exclusion stérique à haute performance (HPSEC). Ses groupes fonctionnels ont été identifiés par spectroscopie infrarouge à transformation de Fourier (FT-IR), sa composition monosaccharidique a été analysée par chromatographie liquide haute performance (HPLC) et ses résidus de sucre et leur mode de liaison ont été analysés par chromatographie en phase gazeuse-spectrométrie de masse (GC-MS) et spectroscopie de résonance magnétique nucléaire uni- et bidimensionnelle (NMR). Les animaux d'expérience ont été répartis en groupes normaux, modèles, groupe à faible dose d'AAPS-4a (50 mg·kg-1), groupe à forte dose d'AAPS-4a (100 mg·kg-1>) et groupe de sulfasalazine (SASP) (75 mg·kg-1). À l'exception du groupe normal, les modèles ont été induits chez les souris par une colite ulcéreuse aiguë à 3,5 % de sulfate de sodium glucuronate. Chaque groupe a été gavé à la dose correspondante pendant 7 jours et les changements de poids des souris ont été enregistrés. À la fin du traitement, l'index de la rate et le score d'activité de la maladie ont été calculés, le TNF-α et l'IL-6 dans le sérum ont été mesurés par ELISA, et les changements pathologiques dans le côlon ont été observés par coloration à l'hématoxyline-éosine (HE). Résultats. Au niveau cellulaire, l'AAPS-4a a inhibé de manière dépendante de la dose les niveaux de TNF-α, d'IFN-β et de NO induits par le LPS (p<0,01). La caractérisation structurale de l'AAPS-4a a montré qu'il s'agit d'un polysaccharide homogène d'une masse moléculaire de 7,6×103 Da, constitué de mannose (Man), de glucose (Glc) et de galactose (Gal), avec un rapport molaire de 1,3∶23,9∶1,0, et contenant les groupes monosaccharidiques 1,6-α-D-Glcp, T-α-D-Glcp, 1,3-β-D-Galp, 1,4-α-D-Manp et 1,2-α-D-Galp. Les animaux de l'expérience ont été comparés aux groupes normaux, les groupes modèles ont amélioré l'index de la rate et le score d'activité de la maladie et les niveaux de TNF-α et d'IL-6, et ont amélioré l'atrophie du côlon (p<0,05, p<0,01). En outre, l'observation pathologique a montré que l'AAPS-4a pouvait inhiber de manière significative l'infiltration des cellules inflammatoires dans le tissu du côlon et atténuer ses dommages pathologiques. Conclusion. L'AAPS-4a est un polysaccharide homogène neutre constitué de mannose, de glucose et de galactose, et est un composant actif clé de l'effet anti-UC de la médecine Qigui, ayant une valeur potentielle dans la pratique clinique.
关键词
médicaments Qigui-danggui; polysaccharide; chromatographie liquide haute performance (HPLC); chromatographie gazeuse couplée à la spectrométrie de masse (GC-MS); spectroscopie de résonance magnétique nucléaire (NMR); immunomodulation; colite ulcéreuse (UC)