Étude de l’effet de la formule Sanjie Quban sur la prolifération, l’apoptose, la migration et l’invasion des fibroblastes du chéloïde humain basé sur la voie de signalisation AhR/CYP1A1

HE Zhihong ,  

ZHANG Fengchuan ,  

YANG Dingquan ,  

HUANG Chuhan ,  

WANG Zhihan ,  

WU Yatong ,  

LIU Qingwu ,  

摘要

L’objectif est d’étudier l’effet du sérum contenant la formule Sanjie Quban (SJQB) sur la prolifération, l’apoptose, la migration et l’invasion des fibroblastes du chéloïde humain (KFs) en régulant la voie de signalisation du récepteur d’hydrocarbures aromatiques (AhR) / cytochrome P450 famille 1 sous-famille A membre 1 (CYP1A1), ainsi que le mécanisme d’action. Méthode : Les KFs humaines primaires ont été cultivées in vitro et réparties en groupes : groupe contrôle (KFs + sérum sans médicament), groupe gispéridine (KFs + sérum contenant la gispéridine), groupe formule Sanjie Quban (KFs + sérum contenant la formule), groupe activateur AhR [KFs + β-naftaflavone (β-NF)], groupe inhibiteur AhR (KFs + CH223191) et groupe inhibiteur AhR + formule Sanjie Quban (KFs + CH223191 + sérum contenant la formule). La concentration d’intervention optimale a été déterminée par la méthode CCK-8 pour évaluer la prolifération et la viabilité cellulaire ; la prolifération cellulaire a été évaluée par la méthode EdU ; l’apoptose a été détectée par cytométrie en flux ; la migration et l’invasion cellulaires ont été évaluées par le test de rayure et l’expérience Transwell ; l’expression des protéines TGF-β1 et α-SMA a été détectée par immunofluorescence ; l’expression des ARNm d’AhR, CYP1A1, TGF-β1 et α-SMA a été mesurée par PCR quantitative en temps réel ; les niveaux protéiques d’AhR, CYP1A1, TGF-β1 et α-SMA ont été détectés par Western blot. Résultats : Par rapport au groupe contrôle, les groupes formule Sanjie Quban, gispéridine et activateur AhR ont montré une diminution significative du taux de prolifération cellulaire, de la migration et de l’invasion (P < 0,01) et une augmentation significative du taux d’apoptose (P < 0,01) ; par rapport au groupe activateur AhR, le groupe inhibiteur AhR a montré une augmentation de la prolifération cellulaire, de la migration et de l’invasion, ainsi qu’une diminution significative de l’apoptose (P < 0,01) ; par rapport au groupe formule Sanjie Quban, le groupe inhibiteur AhR + formule Sanjie Quban a montré une augmentation de la prolifération, de la migration et de l’invasion cellulaires et une diminution significative de l’apoptose (P < 0,05, P < 0,01). Les résultats moléculaires ont montré qu’en comparaison avec le groupe contrôle, les groupes formule Sanjie Quban, gispéridine et activateur AhR présentaient une expression significativement augmentée des protéines et ARNm d’AhR et CYP1A1 (P < 0,05, P < 0,01) ; les groupes formule Sanjie Quban et activateur AhR présentaient une expression significativement réduite des protéines et ARNm de TGF-β1 et α-SMA (P < 0,05, P < 0,01) ; le groupe gispéridine affichait une expression significativement réduite de la protéine TGF-β1 et de l’ARNm α-SMA (P < 0,05, P < 0,01) ; par rapport aux groupes activateur AhR et contrôle, le groupe inhibiteur AhR présentait une expression significativement réduite des protéines et ARNm d’AhR et CYP1A1 (P < 0,01) et une expression significativement augmentée des protéines et ARNm de TGF-β1 et α-SMA (P < 0,01) ; par rapport au groupe formule Sanjie Quban, le groupe inhibiteur AhR + formule Sanjie Quban présentait une expression significativement réduite des protéines et ARNm d’AhR et CYP1A1 (P < 0,01) et une expression significativement augmentée des protéines et ARNm de TGF-β1 et α-SMA (P < 0,05, P < 0,01). Conclusion : La formule Sanjie Quban peut inhiber la prolifération, la migration et l’invasion des cellules KFs tout en favorisant leur apoptose. Ce mécanisme d’action pourrait être lié à l’activation de la voie de signalisation AhR/CYP1A1, entraînant une réduction de l’expression de TGF-β1 et α-SMA.

关键词

formule Sanjie Quban; récepteur d’hydrocarbures aromatiques (AhR) / cytochrome P450 famille 1 sous-famille A membre 1 (CYP1A1) voie de signalisation; chéloïde; fibroblaste

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