Objectif : Étudier l'effet du polysaccharide d'astragale (APS) sur la régulation de la voie de signalisation du récepteur de type Toll 4 (TLR4)/facteur nucléaire de transcription-κB (NF-κB) sur la polarisation des cellules microgliales BV2 dans un modèle de privation d'oxygène et de glucose/réoxygénation (OGD/R). Méthode : Modèle de lésions cellulaires BV2 induit par OGD/R établi, divisé en groupe témoin, groupe OGD/R, et groupe APS (0,4 g·L^-1 APS) ; inflammation neuronale induite par lipopolysaccharide (LPS) avec intervention APS, répartie en groupe témoin, groupe LPS (1 mg·L^-1 LPS) et groupe APS (0,4 g·L^-1 APS + 1 mg·L^-1 LPS). La viabilité cellulaire a été évaluée par le test CCK-8 ; la morphologie cellulaire observée au microscope inversé ; le contenu en oxyde nitrique (NO) dans le surnageant mesuré par la méthode de Griess ; les niveaux de sécrétion du facteur de nécrose tumorale-α (TNF-α), de l'interleukine (IL)-6, IL-10 et IL-4 déterminés par ELISA ; l'immunofluorescence (IF) a été utilisée pour détecter le taux de double positivité des molécules protéiques liées au calcium Iba-1/oxyde nitrique synthase inductible (Iba-1⁺/iNOS⁺) et Iba-1/arginase 1 (Iba-1⁺/Arg1⁺) et le taux de translocation nucléaire du facteur NF-κB p65 ; l'immunoblotting (Western blot) a mesuré le niveau d'expression des protéines Iba-1, iNOS, Arg1, TLR4 et NF-κB p65. Résultats : Dans le modèle de lésion OGD/R, comparé au groupe témoin, les cellules BV2 ont été activées et ont présenté des modifications amiboïdes, avec une augmentation significative des niveaux de NO, TNF-α et IL-6 (P<0,01), une augmentation significative des taux d'expression double positive Iba-1⁺/iNOS⁺ et des protéines Iba-1 et iNOS (P<0,01), ainsi qu'une augmentation significative du taux de translocation nucléaire de NF-κB p65, et de l'expression des protéines TLR4 et NF-κB p65 (P<0,01). Les niveaux d'IL-10 et IL-4 ont diminué significativement (P<0,01), de même que les taux d'expression double positive Iba-1⁺/Arg1⁺ et de la protéine Arg1 (P<0,01). Par rapport au groupe OGD/R, le groupe APS (0,4 g·L^-1) a montré une réduction de l'activation cellulaire, une diminution significative des niveaux de NO, TNF-α et IL-6 (P<0,01), une diminution significative des taux d'expression double positive Iba-1⁺/iNOS⁺ et des protéines Iba-1 et iNOS (P<0,01), une diminution significative du taux de translocation nucléaire de NF-κB p65, ainsi que de l'expression des protéines TLR4 et NF-κB p65 (P<0,01). Les niveaux d'IL-10 et IL-4 ont augmenté significativement (P<0,01), de même que les taux d'expression double positive Iba-1⁺/Arg1⁺ et la protéine Arg1 (P<0,01). Dans le modèle d'inflammation neuronale induite par LPS, comparé au groupe témoin, le groupe LPS a montré une augmentation de l'activation cellulaire, des niveaux de NO, TNF-α, IL-6, des taux d'expression double positive Iba-1⁺/iNOS⁺, du taux de translocation nucléaire de NF-κB p65, et de l'expression des protéines Iba-1, iNOS, TLR4 et NF-κB p65 (P<0,01). Les niveaux d'IL-10, IL-4, les taux d'expression double positive Iba-1⁺/Arg1⁺ et l'expression de la protéine Arg1 ont diminué significativement (P<0,01). Par rapport au groupe LPS, le groupe APS a montré une réduction de l'activation cellulaire, des niveaux de NO, TNF-α, IL-6, des taux d'expression double positive Iba-1⁺/iNOS⁺, du taux de translocation nucléaire de NF-κB p65, et de l'expression des protéines Iba-1, iNOS, TLR4 et NF-κB p65 (P<0,01). Les niveaux d'IL-10, IL-4, les taux d'expression double positive Iba-1⁺/Arg1⁺ et l'expression de la protéine Arg1 ont augmenté significativement (P<0,01). Conclusion : L'APS pourrait atténuer l'activation des cellules microgliales et favoriser leur polarisation vers le type M2 en inhibant l'activation de la voie de signalisation TLR4/NF-κB, réduisant ainsi la réponse neuroinflammatoire induite par OGD/R.

Polysaccharide d'astragale (APS); modèle de privation d'oxygène/glucose et de réoxygénation; cellules microgliales BV2; lipopolysaccharide (LPS); voie de signalisation du récepteur de type Toll 4 (TLR4)/facteur nucléaire NF-κB