L'objectif est d'examiner l'effet de la formule de dissipation des stases et de détoxification sur les cellules endothéliales microvasculaires cérébrales (BMECs) après une lésion due à la privation de glucose et d'oxygène (OGD) ainsi que le mécanisme d'intervention. Méthode : utilisation du kit de détection de la prolifération cellulaire (CCK-8) pour déterminer la durée d'OGD, choix de la concentration efficace du sérum médicamenteux de la formule; les cellules ont été réparties aléatoirement en groupe témoin avec milieu de culture sérum vide (KBXQ), groupe modèle (OGD), groupe HYXQ (OGD + sérum médicamenteux de la formule), groupe 3-méthyladénine (3-MA) (OGD + 3-MA). Observation de la morphologie cellulaire au microscope inversé; observation du nombre d'autophagosomes et d'autolysosomes au microscope électronique; détection de la viabilité cellulaire par la méthode CCK-8; détection du taux d'apoptose par marquage terminal in situ (TUNEL); détection de l'expression des protéines LC3 et Occludin par immunofluorescence; mesure de la perméabilité de la monocouche cellulaire. Les cellules ont été réparties aléatoirement en groupes KBXQ, modèle (OGD), HYXQ, inhibiteur de la phosphoinositide 3-kinase (PI3K) (LY294002) (OGD + LY294002), HYXQ + LY294002 (OGD + sérum médicamenteux + LY294002). La méthode Western blot a été utilisée pour détecter les niveaux d'expression des molécules clés de l'autophagie Beclin1, LC3Ⅱ/LC3Ⅰ, p62, Occludin, p-PI3K, PI3K, p-Akt, Akt, p-mTOR et mTOR. Les conditions optimales choisies étaient 6 h d'OGD et 5 % de sérum médicamenteux. Par rapport au groupe KBXQ, le groupe modèle présentait des lésions cellulaires évidentes au microscope inversé, un nombre accru d'autophagosomes et d'autolysosomes au microscope électronique, une viabilité cellulaire significativement réduite (P<0.01), un taux d'apoptose significativement élevé (P<0.01), une intensité de fluorescence LC3 significativement augmentée (P<0.01), une intensité de fluorescence Occludin significativement diminuée (P<0.01) et une perméabilité de la monocouche cellulaire significativement augmentée (P<0.01) ; par rapport au groupe modèle, les groupes HYXQ et 3-MA ont montré une amélioration significative des lésions cellulaires, une réduction marquée du nombre d'autophagosomes et d'autolysosomes, une augmentation significative de la viabilité cellulaire (P<0.01), une diminution significative du taux d'apoptose (P<0.01), une diminution significative de l'intensité de fluorescence LC3 (P<0.01), une augmentation significative de l'intensité de fluorescence Occludin (P<0.01) et une diminution de la perméabilité de la monocouche (P<0.05). Les résultats Western blot ont montré qu'en comparaison avec le groupe KBXQ, l'expression de Beclin1 et LC3Ⅱ/LC3Ⅰ était significativement augmentée (P<0.01) dans le groupe modèle, tandis que les niveaux de p62, Occludin, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt et p-mTOR/mTOR étaient significativement diminués (P<0.01) ; par rapport au groupe modèle, l'expression de Beclin1 et LC3Ⅱ/LC3Ⅰ était significativement réduite (P<0.01) et les niveaux de p62, Occludin, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt et p-mTOR/mTOR étaient significativement augmentés (P<0.01) dans le groupe HYXQ. Dans le groupe LY294002, l'expression de Beclin1 et LC3Ⅱ/LC3Ⅰ était significativement augmentée (P<0.05, P<0.01), tandis que les niveaux de p62, Occludin, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt et p-mTOR/mTOR étaient significativement diminués (P<0.01) ; par rapport au groupe LY294002, l'expression de Beclin1 et LC3Ⅱ/LC3Ⅰ était significativement réduite (P<0.01) et les niveaux de p62, Occludin, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt et p-mTOR/mTOR étaient significativement augmentés (P<0.01) dans le groupe HYXQ + LY294002. Conclusion : La formule de dissipation des stases et de détoxification protège les BMECs contre les lésions induites par OGD, probablement via l'activation de la voie autophagique PI3K/Akt/mTOR, en inhibant la surexpression de l'autophagie pour protéger la protéine Occludin et la fonction barrière endothéliale.

cellules endothéliales microvasculaires cérébrales; autophagie; formule de dissipation des stases et de détoxification; phosphoinositide 3-kinase (PI3K); protéine kinase B (Akt)