L'objectif est d'étudier l'effet de la formule de dispersion des stases et de detoxification sur les cellules endothéliales microvasculaires cérébrales (BMECs) après une lésion due à la privation de glucose et d'oxygène (OGD), ainsi que ses mécanismes d'intervention. Méthodes : La méthode CCK-8 a été utilisée pour déterminer le temps d'OGD, et la concentration d'un sérum contenant la formule de dispersion des stases a été choisie ; les cellules ont été réparties de manière aléatoire en groupe contrôle au milieu avec sérum blanc (KBXQ), groupe modèle (OGD), groupe HYXQ (OGD + sérum contenant la formule), groupe 3-méthyladénine (3-MA) (OGD + 3-MA). Morphologie cellulaire observée au microscope inversé ; nombre d'autophagosomes et d'autolysosomes observés au microscope électronique ; viabilité cellulaire détectée par la méthode CCK-8 ; apoptose mesurée par la méthode TUNEL in situ ; expression des protéines LC3 et Occludin détectée par immunofluorescence ; perméabilité des monocouches cellulaires testée. Les cellules ont été réparties aléatoirement en groupes KBXQ, modèle (OGD), HYXQ, inhibiteur de la PI3K LY294002 (OGD + LY294002), HYXQ + LY294002 (OGD + sérum contenant la formule + LY294002). Les niveaux d'expression des molécules clés de l'autophagie Beclin1, LC3Ⅱ/LC3Ⅰ, protéine d'adaptateur sélectif (p62), Occludin, PI3K phosphorylé (p-PI3K), PI3K, protéine kinase B phosphorylée (p-Akt), Akt, protéine mTOR phosphorylée (p-mTOR), et mTOR ont été détectés par Western blot. Résultats : Le modèle OGD de 6 h a été choisi comme condition optimale, avec 5 % de sérum contenant la formule. Par rapport à KBXQ, la morphologie cellulaire étudiée au microscope inversé montrait des dommages évidents dans le groupe modèle, une augmentation significative des autophagosomes et autolysosomes au microscope électronique, une diminution notable de la viabilité cellulaire (P<0,01), une élévation significative de l'apoptose (P<0,01), une intensité fluorescente LC3 accrue (P<0,01), une diminution marquée de l'intensité fluorescente d'Occludin (P<0,01), et une augmentation significative de la perméabilité cellulaire (P<0,01) ; comparé au modèle, les groupes HYXQ et 3-MA présentaient une amélioration évidente des lésions cellulaires, avec une diminution des autophagosomes et autolysosomes, une hausse significative de la viabilité (P<0,01), une réduction de l'apoptose (P<0,01), une baisse de l'intensité LC3 (P<0,01), une augmentation de l'intensité d'Occludin (P<0,01), et une réduction de la perméabilité (P<0,05). Le Western blot montrait qu'en comparaison avec KBXQ, le groupe modèle présentait une augmentation notable de Beclin1 et LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0,01), ainsi qu'une diminution notable de p62, Occludin, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt et p-mTOR/mTOR (P<0,01) ; par rapport au modèle, HYXQ présentait une diminution notable de Beclin1 et LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0,01), une augmentation significative de p62, Occludin, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt, et p-mTOR/mTOR (P<0,01) ; dans le groupe LY294002, Beclin1 et LC3Ⅱ/LC3Ⅰ augmentaient significativement (P<0,05, P<0,01) tandis que p62, Occludin, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt, et p-mTOR/mTOR diminuaient (P<0,01) ; comparé à LY294002, HYXQ+LY294002 montrait une diminution notable de Beclin1 et LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0,01), et une augmentation significative de p62, Occludin, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt, et p-mTOR/mTOR (P<0,01). Conclusion : La formule de dispersion des stases et detoxification protège les BMECs lésées par OGD, probablement en activant la voie autophagique PI3K/Akt/mTOR, en inhibant la surexpression de l'autophagie, protégeant ainsi la protéine Occludin et la fonction de la barrière endothéliale.

cellules endothéliales microvasculaires cérébrales; autophagie; formule de dispersion des stases; phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K); protéine kinase B (Akt)