Analyse du mécanisme d'action des capsules nutritionnelles rein-moelle modifiées sur la régulation de miR-15b/Wnt et la stimulation de la différenciation et de la maturité des OLN-93

LIU Sisi ,  

LI Chunyu ,  

LI Chen ,  

LI Haixin ,  

WANG Lei ,  

摘要

L'objectif de l'étude est d'explorer le rôle des capsules nutritionnelles rein-moelle dans la régulation de la voie miR-15b/Wnt et la stimulation de la différenciation et de la maturité des cellules gliales OLN-93, accompagnés d'une analyse des effets et du mécanisme moléculaire. Méthodes : Les cellules OLN-93 ont été réparties en deux groupes - échantillons et témoin (NC), groupe BMSC-exos et groupe BSYS-BMSC-exos, groupe BSYS-BMSC+LV-inhibiteur miR-15b-5p-exos et groupe BSYS-BMSC+LV-NC-exos. Les exos ont été marqués avec la protéine DiR, puis leur interaction avec les cellules OLN-93 a été évaluée ; en utilisant le test CCK-8, une dose efficace des capsules nutritionnelles rein-moelle sur les cellules OLN-93 a été déterminée. Des cultures de BMSC ont été infectées par des vecteurs viraux pour inhiber de manière stable l'expression de miR-15b-5p, et leurs exos ont été collectés. La PCR en temps réel a été utilisée pour surveiller l'expression de miR-15b-5p et vérifier l'efficacité de l'infection virale. Une analyse immunofluorescente (ICC) et un Western blot ont été utilisés pour évaluer l'expression de CNPase et PLP dans les cellules OLN-93, ainsi qu'un Western blot pour étudier l'expression de Wnt3a dans les cellules OLN-93. La PCR en temps réel et le Western blot ont été utilisés pour déterminer les niveaux d'expression de la voie Wnt/β-caténine et de la glycogène synthase kinase-3 β (GSK-3β), de β-caténine et de TCF4/TCF7L2 dans les cellules OLN-93. Résultats : Les exos marqués DiR ont montré une forte capacité d'absorption par les cellules OLN-93. Les résultats du test CCK-8 ont montré que la concentration de 20 mg/ml des capsules nutritionnelles rein-moelle a eu le meilleur effet sur l'activité des cellules OLN-93 (

关键词

Sclérose en plaques; capsules nutritionnelles rein-moelle; exos de BMSC; cellules gliales OLN-93; microARN (microARN); voie miR-15b/Wnt

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