L'objectif est d'étudier le rôle des capsules Tougu Xiaotong (TGBX) dans la régulation de la panoptose des chondrocytes afin de retarder leur dégénérescence et d'améliorer les symptômes de l'arthrose du genou (KOA). Méthodes : Expérimentation in vivo : 50 souris mâles C57BL/6 ont été réparties en groupes aléatoires : groupe sham, groupe modèle, groupes TGBX à faibles et fortes doses, groupe diclofénac sodique, 10 souris par groupe. Sauf pour le groupe sham, les autres ont subi la création d'un modèle KOA selon la méthode Hulth modifiée. Après succès de la modélisation, les groupes TGBX ont reçu par gavage 7,2 et 14,4 g/kg de solution, le groupe diclofénac 0,05 g/kg, une fois par jour pendant 6 semaines. L'évaluation du modèle a été réalisée selon l'indice de gravité de l'arthrose Lequesne MG, la fonction du genou a été notée ; les articulations ont été scannées par micro-CT ; la morphologie du cartilage observée par coloration hématoxyline-éosine (HE) et safranine-vert rapide ; la microscopie électronique en transmission (TEM) a examiné les ultrastructures de la panoptose ; l'immunofluorescence multicolore a étudié la colocalisation des protéines cleaved Caspase-3, RIPK3 et du domaine N-terminal de GSDMD (GSDMD-N) au sein du cartilage ; le Western blot a détecté leur expression. Expérimentation in vitro : des rats SD de 4 semaines ont été utilisés pour établir un système de culture cellulaire de chondrocytes par digestion mécanique à 0,2% de collagénase type II. Les cellules de deuxième génération ont été réparties en groupe contrôle, modèle [prétraitement LPS 10 mg/L 24 h + traitement Nigericin 1 µmol/L 4 h], groupe TGBX (ajout de TGBX 100 g/L 24 h). La microscopie à fluorescence a observé les niveaux de ROS, apoptose, nécroptose et panoptose après coloration avec des kits AO/EB et YO-PRO-1/PI ; le TEM a examiné les ultrastructures ; le dosage ELISA a mesuré les niveaux d'IL-1β et IL-18 dans le surnageant ; le Western blot a déterminé l'expression des protéines liée à l'apoptose et la panoptose. Résultats : Comparée au groupe sham, la note Lequesne MG a augmenté dans le groupe modèle, avec rétrécissement de l'espace articulaire, ostéophytes multiples, lésions cartilagineuses sévères, apoptose, nécroptose et panoptose évidentes ; augmentation marquée de cleaved Caspase-3, RIPK3, GSDMD-N, des niveaux de ROS, des colorations AO/EB en fluorescence orange et YO-PRO-1/PI en fluorescence verte et rouge ; élévation des IL-1β et IL-18 dans le surnageant ; augmentation significative des protéines de panoptose. Comparé au modèle, le groupe TGBX a amélioré notablement les paramètres : diminution du score Lequesne MG, élargissement de l'espace articulaire, réduction des ostéophytes, atténuation des lésions et panoptose, réduction du stress oxydatif, IL-1β, IL-18 et de l'expression des protéines associées. Conclusion : Les capsules TGBX retardent la dégénérescence des chondrocytes et améliorent les symptômes du KOA en réduisant le stress oxydatif et en régulant à la baisse l'expression des protéines de panoptose GSDMD-N, cleaved Caspase-3 et RIPK3.
关键词
Capsules Tougu Xiaotong; arthrose du genou; chondrocytes; panoptose