Effet combiné de la décoction Bu Zhong Yi Qi et du cisplatine sur la régulation de la voie PDK1/Akt inhibant la glycolyse et la prolifération des cellules d'adénocarcinome pulmonaire

LI He ,  

BAI Sijia ,  

LIU Wenjun ,  

WANG Jianguang ,  

LYU Jialu ,  

WANG Chun ,  

摘要

L'objectif était d'examiner l'effet de la combinaison de la décoction Bu Zhong Yi Qi avec le cisplatine sur la régulation de la voie de signalisation pyruvate déshydrogénase kinase 1 (PDK1) / protéine kinase B (Akt) et son impact sur la glycolyse dans la prolifération des cellules de l'adénocarcinome pulmonaire humain (A549). Des analyses de séquençage de transcriptome (RNA-seq) ont été utilisées pour comparer l'expression des gènes liés au métabolisme du glucose entre les cellules A549 et les cellules A549/DDP résistantes au cisplatine; le knock-down de PDK1 a été effectué par ARN interférent petit (siRNA), évalué par Western blot et PCR en temps réel; la prolifération et activité cellulaire ont été mesurées par la méthode CCK-8 sous plusieurs conditions de traitement avec siRNA et cisplatine; la concentration inhibitrice à 20% (IC20) a été déterminée; essais de formation de colonies; dosages de lactate et d'ATP; mesure du potentiel membranaire mitochondriale avec la sonde fluorescente JC-1; analyses Western blot des protéines PDK1, p-Akt, Akt, isoforme PKM2, GLUT1, PDH, LDHA; immunofluorescence confocale pour PDK1 et p-Akt. Les résultats ont révélé une surexpression de PDK1 dans les cellules A549 et A549/DDP, une efficacité du knock-down, une réduction de la prolifération et des modifications du métabolisme et du potentiel mitochondrial après traitements. Conclusion : la décoction Bu Zhong Yi Qi combinée avec le cisplatine inhibe la prolifération des cellules de cancers pulmonaires adénocarcinomateux par la régulation de la glycolyse via la voie PDK1/Akt.

关键词

Bu Zhong Yi Qi; cisplatine; glycolyse; pyruvate déshydrogénase kinase 1 (PDK1) / protéine kinase B (Akt); ARN interférent petit (siRNA)

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