Mécanisme par lequel 养精种玉汤 régule la voie SIRT1/PGC-1α pour améliorer la fonction mitochondriale et les dommages oxydatifs chez les rats atteints d'insuffisance de la réserve ovarienne
L'objectif de cette étude est d'examiner l'effet de la formule养精种玉汤 sur le signal SIRT1/PGC-1α impliqué dans la biogenèse mitochondriale et le stress oxydatif chez des rats souffrant d'une insuffisance de la réserve ovarienne (DOR) induite par le cyclophosphamide, ainsi que d'explorer les mécanismes par lesquels elle améliore la fonction de la réserve ovarienne et le développement des follicules. Quarante-deux rats SD femelles âgés de 8 semaines avec un cycle œstral normal ont été sélectionnés et répartis aléatoirement en groupe témoin (7 rats) et groupe modèle (35 rats). Le modèle a été induit par une injection intrapéritonéale unique de cyclophosphamide (90 mg/kg). L'efficacité du modèle a été évaluée après 7 jours par des critères de désordre du cycle œstral. Après confirmation du modèle, les rats ont reçu soit de l'estradiol valérate (0,09 mg/kg), soit养精种玉汤 à haute, moyenne et basse dose (19,98, 9,99, 5,00 g/kg), tandis que les groupes témoin et modèle ont reçu de l'eau distillée en volume égal. L'administration a été effectuée une fois par jour par gavage pendant 4 semaines. L'état général, le poids corporel et le poids humide des ovaires ont été observés et l'indice organique ovarien calculé. Le dosage immuno-enzymatique (ELISA) a été utilisé pour mesurer les niveaux sériques de FSH, LH, estradiol (E2), hormone anti-müllérienne (AMH), ainsi que les activités de la superoxyde dismutase (SOD) et de la glutathion peroxydase (GSH-Px). La coloration à l'hématoxyline-éosine (HE) a permis d'observer les modifications morphologiques des ovaires et l'état du développement folliculaire ; l'immunofluorescence a détecté le niveau d'expression du stress oxydant (ROS) ; l'analyse colorimétrique a mesuré les niveaux d'ATP et de MDA dans les tissus ovarien ; la PCR en temps réel a quantifié le nombre de copies d'ADN mitochondrial (mtDNA) ainsi que l'expression des gènes clés SIRT1, PGC-1α, NRF1 et TFAM ; et le Western blot a évalué l'expression protéique de ces facteurs. Par rapport au groupe témoin, le groupe modèle montrait des troubles du cycle œstral, une diminution significative du poids corporel et de l'indice ovarien (P<0,05), un amincissement du cortex ovarien, une structure lâche, et une diminution notable du nombre de follicules primordiaux et en croissance (P<0,01), une augmentation significative de FSH et LH (P<0,01), une diminution significative d'E2 et AMH (P<0,05, P<0,01), une baisse substantielle de l'ATP et du nombre de copies de mtDNA (P<0,01), une expression accrue de ROS et MDA, une diminution de l'activité de SOD et GSH-Px (P<0,05, P<0,01), et une réduction de l'expression des ARNm et protéines SIRT1, PGC-1α, NRF1 et TFAM (P<0,05, P<0,01). Après traitement, les groupes ayant reçu养精种玉汤 ont montré une récupération significative du poids corporel et de l'indice ovarien (P<0,05), une augmentation significative des niveaux sériques d'E2 et AMH, une baisse des niveaux de FSH et LH (P<0,05, P<0,01), une augmentation de l'ATP et du nombre de copies de mtDNA dans les ovaires, une diminution de l'expression de ROS et MDA, une augmentation de l'activité des enzymes antioxydantes SOD et GSH-Px (P<0,05, P<0,01), ainsi qu'une augmentation significative de l'expression des gènes et protéines associés aux voies SIRT1/PGC-1α/NRF1/TFAM (P<0,05, P<0,01). La coloration HE a montré une restauration progressive de la structure ovarienne, une augmentation notable du nombre de follicules primordiaux et en croissance (P<0,05, P<0,01), un arrangement régulier des cellules de la granulosa et une amélioration évidente de la fonction ovarienne. Conclusion :养精种玉汤 pourrait améliorer la fonction ovarienne des rats DOR en activant la voie de signalisation SIRT1/PGC-1α, en favorisant la biogenèse mitochondriale, en améliorant la fonction mitochondriale et en atténuant les dommages liés au stress oxydatif.
关键词
养精种玉汤; insuffisance de la réserve ovarienne; SIRT1/PGC-1α voie de signalisation; stress oxydatif; mitochondries