Le liquide de réhabilitation KFX exerce une activité antipsoriasique in vitro en inhibant la prolifération et la migration cellulaires et en bloquant la voie de signalisation JAK3/STAT3
Objectif : explorer l'activité antipsoriasique in vitro et le mécanisme potentiel d'action du liquide KFX (liquide de réhabilitation KFX), afin de fournir des preuves expérimentales de son effet antipsoriasique. Méthodes : les cellules immortalisées humaines de kératinocytes non induits (cellules HaCaT) ont été divisées en 7 groupes : contrôle et différents groupes de liquide KFX à des concentrations de masse différentes (5, 10, 20, 40, 80, 160 g·L-1). Après traitement par différentes concentrations de liquide KFX, l'influence du liquide KFX sur la prolifération cellulaire normale a été évaluée par le kit CCK-8. Ensuite, les cellules HaCaT non induites ont été divisées en 6 groupes : groupe contrôle, et groupes rh-IL-17A à différentes doses (5, 10, 50, 100, 120 g·L-1). Après traitement par différentes concentrations d'interleukine-17A recombinante humaine (rh IL-17A), l'effet sur la prolifération des cellules a été évalué pour sélectionner la meilleure concentration d'induction. Puis, les cellules HaCaT normales ont été divisées en groupes contrôle et groupes liquide KFX (5, 10, 20, 40, 80, 160 g·L-1), hors groupe contrôle, le modèle cellulaire psoriasique a été établi par la meilleure concentration inductrice de rh IL-17A. Après traitement par différentes concentrations de liquide KFX, l'effet sur la prolifération des cellules HaCaT psoriasiques a été étudié. Enfin, les cellules HaCaT non induites ont été divisées en 6 groupes : contrôle, rh IL-17A, MTX, et groupes liquide KFX à différentes concentrations (20, 40, 80 g·L-1). Sauf groupe contrôle, les autres ont utilisé la meilleure concentration inductrice de rh IL-17A pour établir le modèle psoriasique. Après traitement par différents médicaments, la migration cellulaire a été mesurée par test de griffure et l'expression relative des ARNm de Ki-67, S100A7, S100A8 et S100A9 a été détectée par PCR quantitative en temps réel. L'activité antipsoriasique in vitro de liquide KFX a ainsi été évaluée. Par la détection de l'expression relative des facteurs inflammatoires IL-1β, IL-6, CXCL-20 et des protéines JAK3, p-JAK3, STAT3 et p-STAT3 dans les cellules psoriasiques HaCaT, le mécanisme d'action a été exploré. Résultats : comparé au groupe contrôle, à 80 g·L-1 de liquide KFX pendant 72 h (P <0,05) et à 160 g·L-1 à différents temps (P <0,01), une influence significative sur la prolifération des cellules HaCaT a été observée. Les autres concentrations n'ont pas montré d'effet notable sur la morphologie ou la prolifération cellulaire, indiquant la sécurité du liquide KFX. Comparé au contrôle, après 24 h de traitement par rh IL-17A, la prolifération cellulaire a été notablement augmentée, avec un pic à 100 μg·L-1 (P <0,05), densité proche de 100% et morphologie normale, indiquant la meilleure concentration inductrice. Le traitement par liquide KFX des cellules psoriasiques induites par rh IL-17A a montré que le liquide KFX inhibe efficacement la prolifération (P <0,01) et la migration (P <0,01), ainsi que l'expression relative des ARNm Ki67, S100A7, S100A8 et S100A9 (P <0,01). De plus, le liquide KFX réduit significativement l'expression relative des ARNm IL-1β, IL-6, CXCL-20 (P <0,01) et inhibe la phosphorylation des protéines JAK3, STAT3 (P <0,05, P <0,01). Conclusion : le liquide KFX n'a pas de toxicité évidente sur les cellules HaCaT non induites, inhibe la prolifération et la migration des cellules psoriasiques induites par rh IL-17A, démontrant une bonne activité antipsoriasique in vitro, probablement liée à la régulation à la baisse de l'expression des cytokines inflammatoires du signal JAK3/STAT3 et à l'inhibition de la phosphorylation des protéines JAK3 et STAT3.
关键词
psoriasis; liquide de réhabilitation KFX; prolifération cellulaire; capacité de migration; facteurs inflammatoires; tyrosine kinase 3 (JAK3)/voie de signalisation du transducteur de signal et activateur de transcription 3 (STAT3)