Objectif Cette étude vise à explorer les effets régulateurs de la formule Huanglian Jiedu Tang, représentant la méthode de refroidissement et détoxification, sur la migration des cellules immunitaires, la protection de la barrière hémato-encéphalique et la restauration des fonctions cellulaires dans un modèle d'accident vasculaire cérébral ischémique. Méthodes Un modèle de AVC ischémique chez la souris a été établi par occlusion temporaire de l'artère cérébrale moyenne (tMCAO) et le flux sanguin cérébral ainsi que les fonctions neurologiques ont été évalués par imagerie laser à tavelures et notation neurologique. Les lésions pathologiques des tissus cérébraux ont été évaluées par coloration à l'hématoxyline-éosine (HE) et à la Nissl. Les souris ont été divisées en groupe sham, groupe modèle, groupe Huanglian Jiedu Tang et groupe extrait de feuille de Ginkgo biloba, avec une adaptation d'une semaine avant gavage : les groupes sham et modèle ont reçu une solution saline, le groupe Huanglian Jiedu Tang a reçu 1,82 g·kg^-1, et le groupe extrait de Ginkgo 0,432 g·kg^-1, pendant 5 jours consécutifs, suivi d'un tMCAO au 6ème jour après la dernière administration. Le séquençage ARN unicellulaire a été réalisé sur les tissus cérébraux et les cellules immunitaires périphériques, l’analyse de la distribution cellulaire a été effectuée via UMAP et l’indice OR, une analyse différentielle d'expression a été menée pour évaluer l’effet de Huanglian Jiedu Tang sur les cellules endothéliales, les péricytes et les macrophages, combinée avec les outils CellChat et decoupler pour analyser la communication cellulaire et la régulation des facteurs de transcription. Enfin, la validation de l'expression des gènes et des protéines a été réalisée par PCR quantitative en temps réel et ELISA. Résultats Par rapport au groupe sham, le groupe modèle a présenté une augmentation significative du score neurologique (P<0,01) et une diminution significative du flux sanguin (P<0,01), avec des désorganisations corticales, une vacuolisation accrue des corps cellulaires et une augmentation du nombre de corps de Nissl; comparé au groupe modèle, les groupes Huanglian Jiedu Tang et extrait de Ginkgo ont montré une diminution significative des scores neurologiques (P<0,01) et une amélioration notable du flux sanguin (P<0,01), une amélioration de la désorganisation corticale, une réduction de la vacuolisation cellulaire et une diminution du nombre de corps de Nissl. Les données unicellulaires indiquent que Huanglian Jiedu Tang protège les cellules endothéliales et les péricytes de la perte, restaure l'expression des gènes fonctionnels (tels que PECAM1, NOS3) dans ces cellules, et diminue l’expression des chimiokines et des facteurs d’adhésion (CCL2, CXCL2); pour les macrophages, Huanglian Jiedu Tang réduit leur migration chimioattractive vers le système nerveux central et diminue l’expression de leurs récepteurs chimiokines ainsi que des facteurs inflammatoires (IL-6, CCR2, CXCR2). L’analyse de la communication cellulaire a montré que Huanglian Jiedu Tang réduit les dommages aux péricytes et cellules endothéliales, diminue leur attraction envers les macrophages, réduit les interactions ligand-récepteur des voies de signalisation chimiokine CCL, CXCL, CSF3 entre péricytes-macrophages et endothélium-macrophages, évitant ainsi des dommages secondaires. Comparé au groupe sham, le groupe modèle a présenté une augmentation significative de l’expression des ARNm des molécules IL-1β, IL-6, TNF-α, CCL2, CXCL2, CSF3 (P<0,01), et une diminution significative de l’expression des ARNm des gènes fonctionnels endothéliaux et péricytaires RGS5, PECAM1, VEGFB, NOS3 (P<0,01) ; comparé au groupe modèle, les groupes Huanglian Jiedu Tang et extrait de Ginkgo ont montré une diminution significative des ARNm des molécules inflammatoires (P<0,01) et une augmentation significative des ARNm des gènes fonctionnels (P<0,01). Au niveau protéique, le groupe modèle avait une augmentation significative de l’expression des protéines IL-1β, IL-6, TNF-α par rapport au groupe sham (P<0,01), tandis que les groupes Huanglian Jiedu Tang et extrait de Ginkgo présentaient une diminution significative de ces protéines par rapport au groupe modèle (P<0,01). Conclusion Huanglian Jiedu Tang protège les cellules endothéliales et les péricytes dans l’ischémie cérébrale, réduisant les lésions neuronales, inhibant leur interaction avec les macrophages et diminuant les lésions secondaires dans le système nerveux central.

Huanglian Jiedu Tang; AVC ischémique; transcriptome unicellulaire; interaction central-périphérique