Mécanisme d'action de Yijing Tang dans le traitement du déclin de la fonction de réserve ovarienne induit par le stress oxydatif médié par une surcharge chronique en fer

YU Jing ,  

LIANG Chengcheng ,  

HU Heng ,  

LI Zhe ,  

CHU Haijing ,  

CHU Jijun ,  

摘要

L'objectif est d'examiner le mécanisme par lequel la décoction Yijing Tang inhibe le stress oxydatif induit par une surcharge chronique en fer et améliore la fonction de réserve ovarienne chez la souris. Méthodes : 72 souris C57BL/6J en cycle œstral normal ont été réparties aléatoirement en groupe témoin, groupe modèle, groupes Yijing Tang à faible, moyenne et forte dose, ainsi qu'un groupe déhydroépiandrostérone, 12 souris par groupe. Le groupe témoin a reçu des injections intrapéritonéales de solution saline, les autres groupes ont reçu des injections intrapéritonéales de dextrane-ferrique 0,5 g·kg-1 une fois par semaine pendant 8 semaines, créant un modèle de surcharge chronique en fer. Après la dernière injection, les groupes Yijing Tang à faible, moyenne et forte dose ont reçu respectivement par gavage des solutions aqueuses de Yijing Tang à 18,165, 36,33, 72,66 g·kg-1; le groupe déhydroépiandrostérone a reçu 10,8125 mg·kg-1 par gavage; les groupes témoin et modèle ont reçu de l'eau distillée en quantité équivalente, une fois par jour pendant 4 semaines. Le poids corporel et l'alimentation des souris ont été mesurés chaque semaine; les variations du cycle œstral ont été observées par frottis des cellules épithéliales vaginales; les poids humides bilatéraux des ovaires et de l'utérus ont été mesurés; l'histopathologie ovarienne a été évaluée par coloration Hématoxyline-éosine (HE); la coloration bleu de Prusse a permis d’évaluer l’expression des ions fer dans le tissu ovarien; les hormones sériques [FSH, LH, œstradiol (E2), hormone anti-müllérienne (AMH)] ont été dosées par ELISA; les niveaux de malondialdéhyde (MDA) et de superoxyde dismutase (SOD) dans le tissu ovarien ont été mesurés biochimiquement; la détection du stress oxydatif (ROS) dans le tissu ovarien a été réalisée par coloration sur coupe congelée; l’ultrastructure mitochondriale a été observée en microscopie électronique à transmission; l’expression des ARNm des protéines liées au fer (Fth1, Ftl, Tf, Tfr1, Cat, GPX1) a été quantifiée par PCR en temps réel; l’expression des protéines Ft, Fth1, Ftl, Tf, TfR, GPX4 a été détectée par Western blot. Résultats : comparé au groupe témoin, le poids corporel a significativement diminué dans le groupe modèle, le cycle œstral était gravement perturbé (P<0,01), l’indice utérin était significativement augmenté (P<0,01), l’indice ovarien significativement diminué (P<0,01), le nombre de follicules antraux diminuait significativement, le nombre de follicules atrétiques augmentait significativement, l’intensité du dépôt de fer dans le stroma ovarien augmentait nettement; les niveaux sériques d'AMH et d’E2, l’activité SOD, ainsi que l’expression protéique et ARN de Tf, Tfr1, GPX1 et Cat dans le tissu ovarien diminuaient (P<0,05, P<0,01); les niveaux de FSH, LH, MDA ainsi que l’expression des protéines et ARN de Fth1 et Ftl augmentaient (P<0,05, P<0,01); l’intensité de fluorescence ROS augmentait significativement (P<0,01); l’expression de la protéine GPX4 diminuait nettement (P<0,01); les mitochondries endommagées augmentaient, les crêtes mitochondriales diminuaient ou disparaissaient. Par rapport au groupe modèle, les groupes Yijing Tang à faible, moyenne et forte dose et le groupe déhydroépiandrostérone montraient une augmentation du poids corporel, une amélioration du cycle œstral (P<0,05, P<0,01), une diminution significative de l’indice utérin (P<0,05), une augmentation de l’indice ovarien (P<0,05, P<0,01), une augmentation du nombre de follicules antraux, une diminution du nombre de follicules atrétiques et une réduction nette de l’intensité du dépôt de fer; les niveaux sériques d'AMH, d’E2, l’activité SOD ainsi que l’expression de Tf, Tfr1, GPX1 et Cat augmentaient significativement (P<0,05, P<0,01); les niveaux de FSH, LH, MDA et l’expression de Fth1 et Ftl diminuaient (P<0,05, P<0,01); l’intensité de fluorescence ROS diminuait nettement (P<0,05, P<0,01); l’expression de GPX4 augmentait significativement (P<0,01); les dommages mitochondriaux diminuaient et la morphologie mitochondriale s’améliorait nettement. Conclusion : Yijing Tang améliore la fonction de réserve ovarienne en régulant à la hausse l’expression de Tf, Tfr1, GPX4 et à la baisse celle de Ft, Fth1, Ftl, soulageant le désordre du métabolisme du fer induit par une surcharge chronique en fer, atténuant le stress oxydatif dans le tissu ovarien et restaurant la morphologie mitochondriale.

关键词

Yijing Tang; surcharge chronique en fer; métabolisme du fer; stress oxydatif; déclin fonction de réserve ovarienne

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