L'objectif est d'examiner si la décoction Huanglian Jiedu Tong et ses principaux composants actifs (génipin-β-D-gentiobioside, baicaline, berbérine) peuvent inhiber la réponse inflammatoire des cellules BV2 sous intervention du lipopolysaccharide (LPS) via la voie de signalisation de la protéine à mobilité élevée B1 (HMGB1)/récepteur Toll-like 4 (TLR4)/facteur nucléaire de transcription κB (NF-κB). Parallèlement, analyser en profondeur les différences d'efficacité entre les trois monomères, la combinaison monomérique et la décoction Huanglian Jiedu Tong dans des conditions de proportions égales. Méthode : les cellules microgliales BV2 sont utilisées comme objet d'étude principal. L'effet de différentes concentrations de diméthylsulfoxyde (DMSO) (0,8 %, 0,4 %, 0,2 %, 0,1 % et 0,05 %) sur la viabilité cellulaire est évalué par CCK-8. L'état de croissance des cellules est surveillé par Incucyte pour différentes concentrations de Huanglian Jiedu Tong (200, 100, 50, 25, 12,5 et 6,25 mg·L⁻¹). La production d'oxyde nitrique (NO) est mesurée pour sélectionner la meilleure concentration. Le contenu en génipin-β-D-gentiobioside, baicaline et berbérine est analysé par chromatographie liquide haute performance (HPLC), et les groupes expérimentaux sont établis selon les proportions. L'impact des composés sur la viabilité des cellules est évalué par CCK-8, les cytokines inflammatoires (TNF-α, IL-1β, IL-6 et IL-10) dans le surnageant cellulaire sont mesurées par ELISA. L'effet sur la polarisation M1 des cellules BV2 est mesuré par cytométrie en flux, et les protéines HMGB1, TLR4 ainsi que NF-κB sont analysées par western blot. Résultats : comparé au groupe témoin, le DMSO à 0,2 % ou moins n'affecte pas la viabilité cellulaire en 48 h (P>0,05). Sous intervention de 200 mg·L⁻¹ de Huanglian Jiedu Tong, la croissance cellulaire atteint un plateau à 24 h. Sous stimulation de 2 mg·L⁻¹ de LPS, cette concentration réduit davantage la libération de NO, avec un effet d'inhibition plus marqué lors d'une pré-administration de 6 h par rapport à une administration directe. Les résultats HPLC révèlent qu'un mg de poudre lyophilisée contient environ 24 μg de génipin-β-D-gentiobioside, 15 μg de baicaline et 30 μg de berbérine. Les groupes expérimentaux sont : témoin, LPS 2 mg·L⁻¹, Huanglian Jiedu Tong 200 mg·L⁻¹, combinaison monomérique, génipin 4,8 mg·L⁻¹, baicaline 3 mg·L⁻¹ et berbérine 6 mg·L⁻¹. La combinaison monomérique est une solution composée des trois actifs. Ni LPS, ni la décoction, ni les composants n'affectent la viabilité cellulaire par rapport au témoin. LPS augmente significativement les cytokines TNF-α, IL-1β, IL-6 et IL-10 dans le surnageant (P<0,01). Huanglian Jiedu Tong et ses actifs réduisent les cytokines pro-inflammatoires TNF-α, IL-1β, IL-6 (P<0,05, P<0,01) et augmentent l'anti-inflammatoire IL-10 (P<0,01), avec la meilleure inhibition de l'inflammation observée dans le groupe combinaison monomérique (P<0,05, P<0,01). LPS augmente significativement la proportion des cellules BV2 CD80+CD86+ (type M1) (P<0,01), tandis que la décoction et ses composants inhibent nettement cette polarisation (P<0,05, P<0,01), la meilleure efficacité étant dans le groupe combinaison monomérique (P<0,05, P<0,01). L'expression des protéines HMGB1, TLR4 et NF-κB est augmentée par LPS (P<0,01), mais notablement diminuée après traitement par la décoction et ses composants (P<0,05, P<0,01), avec l'effet le plus marqué dans la combinaison monomérique (P<0,05, P<0,01). Conclusion : Huanglian Jiedu Tong et ses principaux actifs (génipin-β-D-gentiobioside, baicaline et berbérine) inhibent la réponse inflammatoire des cellules BV2 induite par LPS. La combinaison des trois actifs montre la meilleure efficacité anti-inflammatoire, atténuant significativement la polarisation M1 via la voie de signalisation HMGB1/TLR4/NF-κB.

Huanglian Jiedu Tong; Détection HPLC; Microglies BV2; Polarisation M1; Protéine à mobilité élevée B1 (HMGB1) / Récepteur Toll-like 4 (TLR4) / Facteur nucléaire κB (NF-κB)