痛经是妇女正值经期或经行前后，出现周期性小腹疼痛，或伴腰骶酸痛，甚至剧痛晕厥，影响正常工作及生活的疾病［1］。现代医学将痛经分为原发性痛经和继发性痛经，无器质性病变的功能性痛经为原发性痛经，临床较为常见［2］，可见于45%~90%的经期妇女［3］。现代研究表明，痛经患者子宫内膜和月经血中前列腺素F2α（PGF2α）和前列腺素E2（PGE2）含量均较正常妇女明显升高，PGF2α含量升高是造成痛经的主要原因，PGF2α含量高可引起子宫平滑肌过强收缩，血管痉挛，造成子宫缺血、乏氧状态而出现痛经；原发性痛经还与血管加压素、内源性缩宫素以及β-内啡肽（β-EP）等物质的增加有关，也受精神、神经因素影响［4］；因此，西医学对于原发性痛经多采取激素类药物、解热镇痛药及非甾体抗炎药发挥疗效［5］。中医学将痛经病机概括为“不荣则痛”或“不通则痛”，通过辨其虚实寒热以进一步运用相应中药复方汤剂、中成药、针灸、耳穴及穴位敷贴等手段调和人体阴阳气血发挥疗效［1，6］。动物模型是临床治疗与理论研究的的重要桥梁，建立良好的原发性痛经动物模型对于其诊断及临床防治有着重要意义。国内从1986年开始开展原发性痛经体内动物模型实验［7］，发展至今已有相对完善的造模方法，现相关综述阐述了原发性痛经动物模型诸多复制方法［8-9］，但通过文献阅读发现，其讲述造模内容不全面，重点阐述造模方法，但对于具体实施的相关细节描述不完整，导致相关实验文献的模型成模标准不统一、中医证候模型的建立与评价不够完善，造成原发性痛经动物模型难以规范化，故有必要通过对国内外原发性痛经动物模型实验进行大数据整理及提点总结，从实验动物种类、造模方法、造模周期、药物剂量、药物注射方式、高频检测指标、阳性药种类等方面进行归纳，探索原发性痛经动物模型研究的现状与待完善的缺陷，从而促进对原发性痛经的更深层次的病因病机、新药筛选等方面的研究，为原发性痛经动物模型的规范与应用提供参考。1 材料与方法1.1　数据资料来源与检索策略在中国知网、万方数据库、维普中文期刊服务平台的“高级检索”，以“原发性痛经”并且“动物模型”或“鼠”或“猪”或“兔”或“犬”为主题检索；在PubMed数据库以“ primary dysmenorrhea” and “animal model” or “mouse” or “pig” or “rabbit” or “dog”为主题检索，其中时间不限，检索时间截至至2022年3月18日。1.2　文献筛选标准①纳入标准：研究原发性痛经的全部造模成功的动物实验文献。②排除标准：排除非原发性痛经模型、非动物实验、体外实验、综述、文献研究、资料不全、造模药物说明粗略、检测方法未说明清楚、检测指标描述粗略、检测指标方法描述与结果不一致、会议论文、同一实验或同一批实验的文献。1.3　资料提取与处理使用NoteExpress标准版进行文献管理。初步检索知网293篇、万方222篇、维普104篇、Pubmed 24篇，共643篇文献。查重后排除216篇，余427篇文献。通过题目与摘要阅读，删除主题不符的文献104篇，余323篇。阅读全文删除不符合纳入标准的文献152篇，最终纳入171篇文献，其中6篇文献中有多个体内动物模型实验。参照《常用医药研究动物模型》［10］进行规范动物名称、种类。应用Excel 2019软件，录入文章年份、作者、题目、实验动物种类、造模方法、剂量、阳性对照药、检测指标等信息，建立原发性痛经模型的数据文件，对录入的数据进行整理、统计和分析，定量归纳造模要素［11］。2 结果2.1　原发性痛经动物模型种类应用情况将涉及原发性痛经动物模型的171篇文献中的实验动物进行分类，其中6篇文献中有多个体动物模型实验，总频数为178。总共7类动物，其中SD大鼠频数为89次，占比50.00%；Wistar大鼠频数为41次，占比23.03%；昆明种小鼠频数为30次，占比16.85%；ICR小鼠频数为14次，占比7.87%；NIH小鼠频数为2次，占比1.12%；野生型小鼠与近交系BALB/c小鼠频数均为1次，分别占比0.56%，见表1。10.13422/j.cnki.syfjx.20221616.T001表1原发性痛经体内动物模型实验动物类型Table 1Primary dysmenorrhea in vivo animal model experimental animal type动物类型频数/次占比/%SD大鼠8950.00Wistar大鼠4123.03昆明种小鼠3016.85ICR小鼠147.87NIH小鼠21.12野生型小鼠10.56近交系BALB/c小鼠10.562.2　原发性痛经动物模型造模方法概况对171篇中的178次实验进行造模方法统计分类，发现主要以雌二醇、缩宫素或前列腺素联用的基础上，加其他限制条件（冷冻、劳累、肾上腺素、手术等）制造原发性痛经动物模型。其中无论何种雌二醇的作用均为提高子宫的敏感性，然后再注射催产素或者前列腺素以诱发子宫的痉挛性收缩产生的疼痛以此来模拟痛经症状［8］，具体造模方法见表2。10.13422/j.cnki.syfjx.20221616.T002表2原发性痛经动物模型造模方法概况Table 2Summary of modeling method of primary dysmenorrhea animal model造模因素造模方法模型原理造模周期/d动物种类剂量剂量频数/次方法总频数/次占比/%双因素造模法苯甲酸雌二醇+缩宫素/前列腺素通过注射雌激素类药物提高动物子宫敏感性，然后再注射缩宫素或前列腺素以诱发子宫的痉挛性收缩产生的疼痛以此来模拟痛经症状［8］3~21大鼠苯甲酸雌二醇第1天和第10天0.5 mg，第2~9天0.2 mg；缩宫素均为2 U·d-1427944.38苯甲酸雌二醇第1天和第10天0.8 mg，第2~9天0.4 mg；缩宫素均为2 U·d-15苯甲酸雌二醇第1天和第10天0.8 mg，第2~9天0.4 mg；肾上腺素均为0.3 mg·kg-1·d-12小鼠苯甲酸雌二醇第1天和第10天5 mg·kg-1，第2~9天2.5 mg·kg-1；缩宫素为100 U·kg-1·d-12苯甲酸雌二醇10 mg·kg-1·d-1；缩宫素为100 U·kg-1·d-12苯甲酸雌二醇0.1 mg·d-1；缩宫素为20 U·kg-1·d-12己烯雌酚+缩宫素3~56大鼠己烯雌酚第1天和第10天0.8 mg，第2~9天0.4 mg；缩宫素均为2 U·d-1155732.02己烯雌酚第1天和第10天0.5 mg，第2~9天0.2 mg；缩宫素均为2 U·d-17己烯雌酚第1天和第10天0.8 mg，第2~9天0.4 mg；缩宫素均为0.2 U·d-14己烯雌酚3 mg·kg-1·d-1；缩宫素均为14 U·kg-1·d-12己烯雌酚2 mg·kg-1·d-1；缩宫素均为20 U·kg-1·d-12小鼠己烯雌酚2 mg·kg-1·d-1；缩宫素均为20 U·kg-1·d-18戊酸雌二醇+缩宫/前列腺素7~12大鼠戊酸雌二醇3 mg·kg-1·d-1，缩宫素均为14 U·kg-1·d-12116.18小鼠戊酸雌二醇0.5 mg·kg-1·d-1，缩宫素均为2 U·d-13多因素病证结合造模法冰柜持续冷冻+苯甲酸雌二醇+缩宫素全身冷冻法，符合中医“寒凝”“不通则痛”的病证特点［12-16］10大鼠苯甲酸雌二醇第1天和第10天0.5 mg，第2~9天0.2 mg；缩宫素均为2 U·d-114147.87冰水浴+苯甲酸雌二醇/戊酸雌二醇+缩宫素冰水浴，符合中医“寒”“湿”两种邪气的特点，模拟临床寒湿凝滞型原发性痛经的发病情况［17-20］4~12大鼠戊酸雌二醇3 mg·kg-1·d-1+缩宫素14 U·kg-1·d-1263.37腹部放置于冰块上+苯甲酸雌二醇+缩宫素局部冻伤法，使子宫位置局部受寒，符合中医寒邪所致寒凝血瘀的病证特点［21-24］12大鼠苯甲酸雌二醇第1天和第12天0.8 mg，第2~11天0.4 mg；缩宫素均为2 U·d-1663.37苯甲酸雌二醇+5~8 ℃水浴使鼠劳累+肾上腺素+缩宫素在冰水浴（“寒”“湿”）的基础上加用肾上腺素，肾上腺素能加强大鼠应激反应，造模更易成功［25-27］12大鼠苯甲酸雌二醇第1天和第12天0.8 mg，第2~11天0.4 mg；肾上腺素0.3 mg·kg-1·d-1；缩宫素均为2 U·d-1231.69手术病证结合造模法手术切除背部棕色脂肪+丙硫氧嘧啶+己烯雌酚+缩宫素手术切除肩胛骨间棕色脂肪并给予丙硫氧嘧啶抑制甲状腺机能，将导致机体产热机能下降，出现全身及局部的产热不足［28］；再联合雌激素和缩宫素建立寒凝血瘀证痛经模型49大鼠己烯雌酚1 mg·kg-1·d-1；丙硫氧嘧啶30 mg·kg-1·d-1，9个等比剂量组的催产素110.56手术去除双侧卵巢+β-雌二醇+孕酮+花生油+米非司酮雌二醇+水浸束缚应激经激素处理的去势雌性小鼠，在花生油诱导蜕膜化后，用孕酮诱发行经［29］；冷水水浸束缚的实验方法也符合寒湿凝滞型原发性痛经病机特征［30］26小鼠15 d-1 7d 0.37 nmol雌二醇+21 d 0.16 nmol孕酮、0.02 nmol雌二醇+22~23 d 18.3 nmol雌二醇+23 d子宫角20 μL花生油、子宫腔40 μL花生油+25 d 120mg·kg-1米非司酮110.56将药物剂量统一以mg为单位，缩宫素一般单位为U或IU，统一为U，若有缩宫素注射液，文中用mL单位，寻找相关批次并统一计算以U为单位。在178次实验中，通过筛选发现拥有大鼠39种、小鼠36种不同药物不同用法用量，故将除手术病证结合造模法的两种方法之外的频数为1次的用法排除，得到表2中的剂量与剂量频数。可以发现，在大鼠实验中，以苯甲酸雌二醇第1天和第10天0.5 mg·d-1，第2~9天0.2 mg·d-1，缩宫素为2 U·d-1的用法最为常见；其次为己烯雌酚第1天和第10天0.8 mg·d-1，第2~9天0.4 mg·d-1，缩宫素为2 U·d-1的用法。在小鼠实验中，以己烯雌酚2 mg·kg-1·d-1、缩宫素20 U·kg-1·d-1的用法最为常见。2.3　原发性痛经动物模型造模周期对171篇中的178次实验进行造模周期统计，在130次的大鼠实验中以9 d≤t≤12 d的造模周期为最多，共111次；48次小鼠实验中，9 d≤t≤12 d和0 d≤t≤4 d的造模周期偏多，分别为17次和16次，见表3。10.13422/j.cnki.syfjx.20221616.T003表3原发性痛经动物模型造模周期Table 3Periodic table of animal models of primary dysmenorrhea动物类别频数/次0 d≤t≤4 d5 d≤t≤8 d9 d≤t≤12 d13 d≤t≤16 d17 d≤t大鼠1711165小鼠161017722.4　原发性痛经动物模型造模药物注射方式在注射方式中，缩宫素主要以腹腔注射为主，频数为171次，占比96.07%；雌二醇类药物注射以皮下注射为主，苯甲酸雌二醇和己烯雌酚频数分别为91次和41次，占比分别为51.12%和22.47%。造模药物注射方式总结，见表4。10.13422/j.cnki.syfjx.20221616.T004表4原发性痛经动物模型造模药物注射方式Table 4Form of drug injection in animal model of primary dysmenorrhea注射方式频数/次占比/%注射方式频数/次占比/%腹腔注射缩宫素17196.07肌肉注射缩宫素21.12皮下注射苯甲酸雌二醇9151.12皮下注射戊酸雌二醇21.12皮下注射己烯雌酚4022.47腹腔注射戊酸雌二醇10.56灌胃戊酸雌二醇116.18灌胃丙硫氧嘧啶10.56腹腔注射苯甲酸雌二醇105.62灌胃乙烯雌酚10.56灌胃己烯雌酚95.06肌肉注射苯甲酸雌二醇10.56腹腔注射己烯雌酚84.49肌肉注射己烯雌酚10.56灌胃苯甲酸雌二醇31.69米非司酮灌胃10.56皮下注射肾上腺素31.69皮下注射β-雌二醇10.56腹腔注射前列腺素31.69往子宫角、子宫腔注射花生油10.562.5　原发性痛经动物模型高频检测指标将涉及体内动物模型的171篇文献中的178次实验检测指标进行分类，若同一组织检测手段为不同类型，如子宫组织检测苏木精-伊红染色（HE）病理切片和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测相关蛋白等指标，则分开计算；若同一组织检测指标手段相同，如用酶联免疫吸附检测（ELISA）同时检测子宫组织匀浆上清液中的PGF2α、PGE2及缩宫素（OT）含量，则将其归为一类［31］。通过对检测指标的梳理，选取频数≥5次的指标，其中30 min内扭体反应次数频数最高，为121次，占比67.98%；其次为扭体反应潜伏期和ELISA法检测子宫组织匀浆上清液相关生化指标，频数分别为71和59次，分别占比39.89%和33.15%。见表5。10.13422/j.cnki.syfjx.20221616.T005表5原发性痛经动物模型高频检测指标Table 5High-frequency detection index table of primary dysmenorrhea animal model检测指标频数/次占比/%30 min内扭体反应次数12167.98扭体反应潜伏期7139.89ELISA检测子宫组织匀浆上清液相关生化指标5933.15ELISA检测血清相关生化指标4223.60扭体反应抑制率4123.03扭体发生率3318.5420 min内扭体反应次数2312.92Western blot法检测子宫组织相关蛋白2111.80放射免疫法检测子宫组织匀浆上清液相关激素指标2011.24聚合酶链式反应法（PCR）检测子宫组织相关mRNA表达1910.67扭体评分158.43HE染色检测子宫组织病理学147.87ELISA检测血浆相关生化指标147.87血液流变学检测95.06硝酸还原酶法子宫组织匀浆上清液NO含量95.06免疫组化法测定子宫组织相关蛋白84.49放射免疫法检测血浆相关激素指标84.49噻唑蓝（MTT）比色法检测动物脾脏自然杀伤（NK）细胞活性84.49子宫指数63.37甲基百里香酚蓝比色法（MTB）测定子宫组织匀浆上清液Ca2+含量63.340 min内扭体反应次数63.372.6　原发性痛经动物模型阳性药种类在体内动物实验中，涉及到阳性药对照的文献一共有104篇文献，109次实验；其中有7篇文献提供了两种阳性药，故阳性药总频数为116次，见表6。西药以布洛芬用药频数最高，为35次，占比32.11%；中药以痛经宝用药频数最高，为19次，占比17.43%。10.13422/j.cnki.syfjx.20221616.T006表6原发性痛经动物模型阳性药种类表Table 6List of positive drug types in animal models of primary dysmenorrhea分类药名频数/次频率/%西药布洛芬3532.11阿司匹林2220.18吲哚美辛43.67塞来昔布32.75罗通定片32.75双氯芬酸二乙胺乳胶剂10.92色甘酸钠10.92阿托品10.92中药痛经宝1917.43田七痛经胶囊76.42元胡止痛片65.50加味益母草膏43.67益母草膏32.75桂枝茯苓胶囊21.83复方益母草膏21.83益母冲剂10.92乌鸡白凤丸10.92妇科千金片10.922.7　原发性痛经动物模型成功制备标准在动物实验中，有17篇文献没有提及到模型成功制备标准，绝大部分文献均以扭体反应为原发性痛经动物模型成功制备标准，扭体反应表现为大鼠腹部收缩内凹，躯干与后肢伸展，臀部与一侧肢体内旋［32］，通过子宫的痉挛性收缩产生的疼痛模拟痛经症状。在寒凝血瘀证模型或寒凝证模型类的文献中，有部分文献会添加寒凝血瘀表征或寒凝表征标准来确认制备成寒凝血瘀证模型或寒凝证模型。寒凝血瘀表征，在扭体反应的基础上出现寒战、蜷缩少动、喜扎堆、呼吸弱、弓背竖毛、爪尾部紫暗、耳色暗红、毛色枯槁、舌质紫暗、舌下脉络增粗增长及粪质不成形［33-34］。寒凝表征为寒颤、蜷缩少动、耳色暗红、爪甲及唇部紫暗等［35-37］。其中还有2篇文献会运用寒证表征评分来对大鼠行为进行评分，并进行对照［38-39］。见表7。10.13422/j.cnki.syfjx.20221616.T007表7原发性痛经动物模型成功制备标准Table 7Standard table for successful preparation of animal models of primary dysmenorrhea检测方法频数/次扭体反应148无17扭体反应、寒凝血瘀表征5扭体反应、寒凝表征4阴道脱落细胞学检查见红细胞1扭体反应、甩尾法检测痛阈值1甩尾法检测痛阈值1扭体反应、旋转杆测定法13 结果与分析3.1　常用实验动物分析目前用于制备原发性痛经的动物有SD大鼠、Wistar大鼠、昆明种小鼠、ICR小鼠、NIH小鼠、野生型小鼠与近交系BALB/c小鼠。由于鼠类饲养价格和使用成本均较低，繁殖周期短，这是与其他动物对比所特有的优势，所以原发性痛经动物模型基本以选择鼠类为主。并且以SD大鼠和Wistar大鼠使用居多，可能与其生长发育快有关，并且SD大鼠对性激素敏感，Wistar大鼠性周期稳定［40］。3.2　常用造模方法分析①雌二醇+缩宫素联用制备大（小）鼠痛经模型，通过注射雌激素类药物提高动物子宫敏感性并同步化子宫周期造成人工动情，然后再注射缩宫素或前列腺素以诱发子宫的痉挛性收缩产生的疼痛，表现为扭体反应。基本符合西医对于原发性痛经的诊断，具有痛、无器质性、非盆腔炎及子宫内膜异位症等疾病引起的特点，是原发性痛经动物模型的最基础模型。②雌二醇+冷冻+缩宫素联用制备大（小）鼠痛经模型，通过在①的基础上加入冷冻的方式，制造寒凝（血瘀）的特点，从病因方面造模，模仿寒凝（血瘀）证患者的久居寒冷之地感受寒邪特点，是具有中医特色的动物模型。③雌二醇+水浴使劳累+肾上腺素+缩宫素联用制备大（小）鼠痛经模型，是在②的基础上加入肾上腺素，肾上腺素能加强大鼠应激反应，并且可以促进血瘀形成，形成血液黏、凝之类似“血瘀”改变［41］，使造模成功率上升。④手术+雌二醇+缩宫素联用制备大鼠痛经模型，通过切除肩胛骨间棕色脂肪并给予丙硫氧嘧啶抑制甲状腺机能，将导致机体产热机能下降，出现全身及局部的产热不足［28］，符合中医阳虚则寒的定义特点，再联合雌二醇+缩宫素的方法制造寒凝血瘀证原发性痛经大鼠模型。⑤手术+孕酮+花生油+米非司酮+雌二醇+水浸束缚应激联用制备小鼠痛经模型，通过在受体水平阻断孕酮的作用能够诱导小鼠发生行经样的改变，符合Finn等提出的哺乳动物发生经期样改变的基本要求［42］，并且再②的基础上建造寒凝血瘀证原发性痛经动物模型。3.3　造模周期、药物剂量、药物注射方式苯甲酸雌二醇进入血液循环1 h后血药浓度可达到高峰，迅速在体内各组织间代谢，10 d即可将人体内的苯甲酸雌二醇完全代谢，故大部分注射以首日和最后一日加倍或2.5倍剂量注射，并且苯甲酸雌二醇的再增加成熟卵泡数目、子宫内膜厚度、排卵率均优于戊酸雌二醇［2，43-44］，所以选择苯甲酸雌二醇用于注射的实验数量较多，这可能也是造模周期大部分造模周期大部分均在9 d≤t≤12 d内的原因。在注射方式中，皮下注射因为皮下组织血管少，血流速度低，药物吸收慢，并且需要延长雌二醇类药物的作用，故雌二醇类药（苯甲酸雌二醇、己烯雌酚）均以皮下注射为主；而注射缩宫素后20~40 min均会观察动物行为学反应，故需要药物吸收速度快，故选择以通过血流量丰富的腹膜吸收的腹腔注射为主。3.4　高频检测指标分析在高频检测指标中，扭体反应相关的检测指标较多（30 min内扭体反应次数、扭体反应潜伏期、扭体反应抑制率、扭体发生率）；在检测相关生化指标中，以ELISA检测子宫组织匀浆上清液或血清为主，通常检测PGF2α、PGE2、β-EP的含量［45-46］，其原因是与PGF2α的含量和PGF2α与PGE2的比例被现代医学认为是影响痛经的关键：PGF2α含量高可引起子宫平滑肌收缩过强，血管挛缩，造成子宫缺血、乏氧状态而出现痛经［4］，而PGE2具有松弛子宫平滑肌、抑制子宫收缩的功能，故女性痛经越严重，其体内的PGF2α越高，PGE2越低，且二者的比值PGF2α/PGE2亦越高［47］。β-EP作为内源性镇痛作用的神经多肽，研究发现痛经血清中β-EP含量与患者疼痛程度呈负相关［48］。3.5　阳性药物种类分析在阳性药物中，西药以选用布洛芬为主，布洛芬为临床常用的止痛药物之一，为非甾体类抗炎药，其可通过抑制前列腺素合成，产生镇痛、解热和抗炎等作用［48］；中药选用痛经宝为主，其主要的药物包括红花、当归、丹参、肉桂、三棱、莪术、五灵脂、木香及延胡索，具有温经化瘀、理气止痛之功效，临床常用于治疗寒凝气滞血瘀型痛经，效果十分显著［49］。4 讨论通过对4种数据库原发性痛经动物模型文献的统计分析可以看出，原发性痛经动物模型主要以鼠类为主要来源，大鼠以Sprague Dawley和Wistar为主，小鼠以昆明种为主；造模方法以雌二醇+缩宫素联用制备大（小）鼠痛经模型为主，简便易行；造模周期大部分均在9 d≤t≤12 d内；大鼠实验剂量以苯甲酸雌二醇第1天和第10天0.5 mg·d-1，第2~9天0.2 mg·d-1，缩宫素为2 U·d-1的用法最为常见，小鼠实验以己烯雌酚2 mg·kg-1·d-1、缩宫素20 U·kg-1·d-1的用法最为常见；注射方式中，缩宫素基本以腹腔注射为主，雌二醇（苯甲酸雌二醇、己烯雌酚）以皮下注射为主；在高频检测指标中，以扭体反应相关行为学指标和ELISA检测子宫组织匀浆上清液或血清相关生化指标为主；在阳性药物中，西药以选用布洛芬为主，中药选用痛经宝为主。针对目前原发性痛经动物模型存在的问题提出一下看法：①在检索文献中发现，只有60%左右的文献涉及阳性药对照组，许多文献仅运用相互对照组或只有空白、模型、实验组；无论是从科研涉及角度还是中医药研究角度，实验需要有相应的阳性对照药组进行对比，证实实验具备检测敏感度及相应治疗方法的优势。②纳入171篇文献、178次实验，大部分文献都有对扭体反应的检测或描述，但对于扭体反应严重程度的量化指标-扭体评分［51］使用次数只有15次，相对较少，后续做原发性痛经实验对于扭体评分应重视。③《痛经动物模型制备规范（草案）》中提出原发性痛经动物模型成功与否的观测指标并初步给出相应权重系数，但目前还未有文献应用，后续研究者或可参考并对成模成功标准做出相应判断，使实验更具有说服力。④现大部分文献均以扭体反应作为原发性痛经动物模型成功制备标准，对于行为学体征还可以联合运用其他的方法如甩尾法检测痛阈值［26，52］、旋转杆测定法［53］，均可以不同程度地模拟痛经的严重程度。⑤症与证未结合：建造中医模型表征观察仅有2篇文章有寒证表征评分表进行证型评分，仅有9篇文章在观察扭体反应的同时观察了动物的寒证行为学（寒凝血瘀表征、寒凝表征），对于寒证表征评分表应用低。并且有部分文献寒凝血瘀证与寒凝证模型造模方法一样，但证型却有差别，中医证型以宏观表征进行判断，所以关于证型模型的制备应均有相关证型标准评分表来确认动物是否真正有了相关证型。并且相应动物病性模型评价应值得推广，形成专家共识，包括其他病性如血瘀、气滞等，对中医病证结合动物模型的规范化建设有很大的提升。⑥证的病因未完全参与病的形成：目前对于原发性痛经动物模型仅有寒证相关模型的制造方法，并且造成寒证的病因除了直接给予物理冷冻刺激，还有饮食失节，可以进行冰水灌胃等进行模拟，而痛经患者的证型除了寒凝血瘀证外还有气滞血瘀证、湿热蕴结证、气血虚弱证、肝肾亏损证［1］，相关证型的动物模型是探索中医证型实质的基础，是后续开展中医临床研究的前提［54］。应通过模拟这些证型的病因病机来构建相关模型，丰富原发性痛经动物模型的构建，更好地为临床治疗服务。⑦通过将能导致“证”形成的单重或多重因素施加于实验动物身上，以模拟人类的病理过程时，可以运用方证对应的原理进行相应“以方测证”研究［55］，并基于特定方药疗效进行反证证候模型的成功［56］，比如寒凝证痛经运用附子理中汤进行反证，血瘀证运用桃红四物汤进行反证等。动物模型是临床治疗与理论研究的的重要纽带，制备理想的动物模型是开展实验研究的前提［55］。本文通过对原发性痛经模型的统计、分析、讨论，并针对其个别不足之处提出疑问，促进原发性痛经动物模型制备的规范化，以其为后续中医药的机制研究及原发性痛经的治疗打下稳固基础。