陈皮是中医临床常用的理气药之一，分为陈皮和广陈皮2种，具有理气健脾、燥湿化痰的功效［1］。目前，关于陈皮的代谢研究集中在阐述其指标成分橙皮苷、川陈皮素的体内代谢途径和代谢产物［2-3］，忽略了陈皮在代谢时的多成分共存环境；同时，此前研究仅获得了陈皮在血浆、尿液及粪便中的代谢产物［4-6］，未阐明其在每个部位的代谢情况。序贯代谢是本课题组基于药物口服后的消化吸收过程，为全面、连续表征多成分药物在空间和时间上的生物转化而提出的，可系统描绘中药多成分动态吸收和代谢的变化轮廓，是多成分药物代谢研究的重要内容［7-8］。该方法可以追踪、阐明中药化学成分在体内的代谢转化过程，已成功用于白芍、痛风定胶囊的药效成分和作用机制研究，以及川芎、枸杞子、秦艽等的质量控制研究［9-13］。本研究在序贯代谢研究思路指导下，应用大鼠在体精细实验技术和超高效液相色谱-高分辨质谱法（UPLC-HRMS）分析陈皮及其不同代谢部位的化学成分，解析其化学成分进入血液循环后的动态变化，为完善陈皮的质量标准提供科学依据，并为揭示其药效物质基础提供参考。1 材料Vanquish型超高效液相色谱仪、Q-Exactive型四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪、Sorvall ST8R型高速冷冻离心机（美国Thermo Fisher公司），BSA124S型万分之一电子分析天平、BT25S型十万分之一电子分析天平（德国Sartorius公司），1-15PK型高速冷冻离心机（德国Sigma公司），BT-100-1F型蠕动泵、LSP02-1B型注射泵（保定兰格恒流泵有限公司），CM-12型水浴氮吹仪（北京成萌伟业科技有限公司）。陈皮饮片购于北京同仁堂长阳药店有限公司新悦都店，产地四川，经北京中医药大学王晶娟教授鉴定为芸香科植物橘Citrus reticulata的干燥成熟果皮。橙皮素、橙皮苷、芸香柚皮苷、柚皮素和新橙皮苷对照品（上海源叶生物科技有限公司，批号分别为C03F6Y1、K02M3C1、P29M6R4、YJ0603HA13、Z31J6L2067，纯度均≥98%），川陈皮素、野漆树苷、橘皮素和甜橙黄酮对照品（上海诗丹德标准技术服务有限公司，批号分别为8005、6099、10027、4085，纯度均≥98%），芦丁对照品（中国食品药品检定研究院，批号100080-201811，纯度91.7%），医用胶（北京康派特医疗器械有限公司，批号211015），水为屈臣氏饮用水，乙腈和甲酸为质谱纯，其他试剂均为分析纯。SPF级SD雄性大鼠，体质量280~300 g，购于斯贝福（北京）生物技术有限公司，生产许可证号SCXK（京）2019-0010。实验前，大鼠适应性饲养于温度25~27 ℃、相对湿度50%~70%、12 h/12 h明暗交替的环境下7 d，保证其自由饮水摄食，实验开始前的12 h禁食不禁水。本研究所涉及的实验动物方案已获得北京中医药大学实验动物伦理委员会的批准，批准号BUCM-4-2022061502-2062。2 方法2.1　溶液的制备取陈皮饮片，粉碎过三号筛，精密称定，加入20倍量60%乙醇超声30 min（40 kHz，200 W），纱布滤过，滤渣按上述条件再次提取。合并2次提取液，减压浓缩后于60 ℃水浴蒸至稠膏状。取稠膏适量，用50%甲醇稀释，0.22 μm微孔滤膜滤过，弃去初滤液，得陈皮醇提物，4 ℃储存，待测。另取稠膏适量，用0.5%羧甲基纤维素钠溶液复溶混悬制成生药质量浓度为1 g·mL-1的陈皮醇取物混悬液，4 ℃储存，作为灌流液及灌胃液备用。2.2　混合对照品溶液的制备称取橙皮素、橙皮苷、新橙皮苷、芸香柚皮苷、柚皮素、川陈皮素、野漆树苷、芦丁、橘皮素和甜橙黄酮对照品适量，分别置于10 mL量瓶中，加甲醇使溶解并定容，得质量浓度分别为0.632、0.546、0.587、0.562、0.573、0.592、0.615、0.702、0.683、0.558 g·L-1的对照品溶液。分别取橙皮素、橙皮苷、芸香柚皮苷、柚皮素、川陈皮素、野漆树苷、芦丁和橘皮素对照品溶液200 μL，置于同一10 mL量瓶中，加50%甲醇定容，0.22 μm滤膜过滤后弃去初滤液，得混合对照品A溶液；另分别取橙皮素、新橙皮苷、芸香柚皮苷、柚皮素、川陈皮素、野漆树苷、芦丁和甜橙黄酮对照品溶液200 μL，按上述方法制备，得混合对照品B溶液。2.3　肠代谢研究将大鼠随机分为实验组和供血组，每只实验组大鼠平均需要4只供血组大鼠为其补充实验过程中流失血液。供血组大鼠经10%水合氯醛麻醉后在其腹主动脉处采集血液，血液经纱布过滤，置于盛有适量肝素钠、在水浴锅上控温37 ℃的离心管中。实验组大鼠麻醉后，固定使其处于仰位平躺姿势，暴露颈静脉后插入静脉留置针，滴加医用胶粘合。沿腹中线打开腹腔，选取10 cm的空肠作为供试肠段，在供试肠段首尾处各剪一小口并插入玻璃管引流液体。用生理盐水冲洗供试肠段至流出液澄清，利用去掉针头的注射器打入空气至供试肠段，使供试肠段内无液体流出。结扎肝门静脉及肠系膜旁支血管，肠系膜静脉插入静脉留置针后，借助注射泵使药液以0.3 mL·min-1的流速流过供试肠段。如增强出版附加材料所示，通过蠕动泵连接储血离心管、颈静脉和肠系膜静脉处的静脉留置针及收集血液的离心管，于0.2 mL·min-1持续2 h供血、采血。实验过程中用保温灯照射以维持大鼠体温稳定。实验平行3组，灌流时给予生理盐水作为空白组。采集的血液于4 ℃保存备用。2.4　肝代谢研究肝代谢研究中除不结扎肝门静脉并于股静脉处采血外，其他操作同2.3项下。2.5　综合代谢随机选取3只大鼠，每只灌胃给药4 mL，每天2次，持续3 d，第4天上午给药2 h后腹腔注射10%水合氯醛麻醉，腹主动脉采血并于4 ℃保存备用。空白组给予生理盐水。2.6　血液处理取2.3、2.4、2.5项下的血浆样品，于3 500 r·min-1离心15 min（4 ℃，离心半径10 cm，下同），取上清液，加入等体积乙腈沉淀蛋白，涡旋混匀2 min，于10 000 r·min-1离心10 min，吸取上清液用氮吹仪吹干溶剂，加50 %甲醇200 μL复溶，于转速10 000 r·min-1离心10 min，取上清液，待测。2.7　检测条件色谱条件为Waters ACQUITY UPLC BEH Shield RP18色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm），柱温35 ℃，流速0.35 mL·min-1，进样量3 μL，流动相乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）梯度洗脱（0~10 min，10%~30%A；10~30 min，30%~95%A；30~31 min，95%~10%A；31~35 min，10%A）。质谱条件为采用加热电喷雾离子源（HESI），正、负离子模式同时采集，扫描范围m/z 100~1 500，喷雾电压分别为3.5 kV（HESI+）和3.0 kV（HESI-），HESI温度400 ℃，毛细管加热温度320 ℃，鞘气和辅助气均为纯度99%的氮气，碰撞气为纯度99.99%的高纯氮气，鞘气压力35 arb，辅助气压力10 arb，碰撞能量为20、40、60 eV，MS分辨率70 000。3 结果与分析3.1　陈皮化学成分的鉴定按2.7项下条件对陈皮醇提物中的化学成分进行分析，总离子流图见增强出版附加材料。结果共鉴定出44个化合物，将供试品与对照品的保留时间（tR）、准分子离子峰、二级碎片和裂解规律进行比对，确定了其中的7个成分；基于文献信息并综合对照品信息，建立含名称、分子式及相对出峰顺序等信息的陈皮化学成分数据库，并借助Xcalibur 4.0软件对总离子流图上的色谱峰进行精确质量数识别，综合推断出37个化合物，主要为黄酮类、香豆素类、氨基酸类化合物，见表1，多为黄酮氧苷类、黄酮碳苷类和多甲氧基黄酮类。10.13422/j.cnki.syfjx.20221047.T001表1陈皮醇提物中化学成分的UPLC-HRMS分析Table 1Identification of chemical components in ethanol extract of Citri Reticulatae Pericarpium by UPLC-HRMS化合物tR/min准分子离子峰主要碎片离子分子式δ/ppm名称10.70116.070 8 ［M+H］+70.065 8C5H9NO21.6脯氨酸［14］20.73268.103 5 ［M+H］+250.091 7、232.081 4、136.061 7C10H13N5O4-1.9腺苷［14］31.01166.086 2 ［M+H］+120.080 9、103.054 5C9H11NO2-0.3苯丙氨酸［14］41.36205.097 1 ［M+H］+188.070 5、118.065 3C11H12N2O2-0.2色氨酸［14］53.43609.146 9 ［M-H］-519.112 9、489.105 2、399.072 6、369.061 9、313.072 2C27H30O163.1lucenin-2［14］64.13593.152 3 ［M-H］-503.120 9、473.108 9、383.077 7、353.067 2、297.077 1C27H30O153.8维采宁-2［14-16］74.17741.226 0 ［M-H］-579.171 9、433.114 5、271.061 6C33H42O193.1narirutin-4ʹ-glucoside［17］84.25743.238 5 ［M+H］+417.117 4、273.075 2C33H42O19-1.1naringin-4ʹ-β-D-glucoside［17］94.35625.175 8 ［M+H］+607.164 7、589.154 2、571.144 8、487.123 3、367.080 5C28H32O16-0.9diosmetin-6，8-di-C-glucoside［16-18］104.55625.175 5 ［M+H］+607.164 8、589.153 8、571.143 6、487.123 2、367.080 3C28H32O16-1.2stellarin-2［16-18］115.72447.094 0 ［M-H］-357.062 0、327.051 2C21H20O114.0荭草苷［19］126.00597.180 8 ［M+H］+399.107 2、289.070 2、153.018 2C27H32O15-0.9圣草次苷［19］136.78463.122 9 ［M+H］+445.112 4、427.101 9、409.090 5、367.080 6、343.080 7、313.070 0C22H22O11-1.2diosmetin-8-C-glucoside或金雀花素［18］147.12463.123 0 ［M+H］+445.112 4、427.102 0、409.091 4、367.080 6、343.080 8、313.070 1C22H22O11-1.1diosmetin-8-C-glucoside或金雀花素［18］157.39581.186 2 ［M+H］+419.137 6、273.075 2、153.018 1C27H32O14-0.6芸香柚皮苷1）167.48609.147 3 ［M-H］-301.035 8、255.030 0、151.003 9C27H30O163.7芦丁1）177.69303.085 8 ［M+H］+177.054 5、153.018 2C16H14O6-1.5高圣草酚［19-20］187.69611.196 7 ［M+H］+449.142 6、303.085 7、153.018 1C28H34O15-0.5橙皮苷1）197.99261.111 9 ［M+H］+243.101 2、189.054 5、131.049 1C15H16O4-0.9橙皮内酯［14，17］208.31577.157 0 ［M-H］-269.046 0C27H30O142.2异野漆树苷［17］218.56625.175 7 ［M+H］+317.065 2、153.018 1C29H36O15-1.0甲基橙皮苷［21］229.10515.227 2 ［M+H］+469.220 3、411.215 7C28H34O9-0.6诺米林［22］239.85859.249 3 ［M+H］+391.101 7、361.054 7C37H46O23-1.27，4ʹ-dihydroxy-5，6，8，3ʹ-tetramethoxy-flavonol-3-O-（5-glucosyl-3-hydroxy-3-methylglutarate）-glucoside或其异构体［23］249.98859.249 3 ［M+H］+391.101 8、361.054 9C37H46O23-1.17，4ʹ-dihydroxy-5，6，8，3ʹ-tetramethoxy-flavonol-3-O-（5-glucosyl-3-hydroxy-3-methylglutarate）-glucoside或其异构体［23］2510.15595.201 7 ［M+H］+433.148 3、287.091 0、153.018 1C28H34O14-0.7枸橘苷［14，20］2610.59887.280 8 ［M+H］+419.133 0、389.086 1C39H50O23-0.8natsudaidain-3-O-（5-glucosyl-3-hydroxy-3-methylglutarate）-glucoside［23］2711.30728.397 2 ［M+H］+700.401 9C36H53N7O9-1.6citrusin Ⅲ［18-19］2811.97725.228 5 ［M+H］+419.133 1、404.109 6、389.086 2C33H40O18-1.2melitidin［17，19］2912.37375.143 3 ［M+H］+211.060 0、196.036 6、168.041 7、150.031 1C20H22O7-3.05，6，7，3ʹ，4ʹ-pentamethoxyflavanone［24］3013.11704.397 0 ［M+H］+686.386 1C34H53N7O9-1.8citrusin Ⅰ［18-19］3113.18373.127 8 ［M+H］+358.103 5、343.080 8、315.085 8C20H20O7-2.5异甜橙黄酮［19］3213.48261.111 9 ［M+H］+243.101 3、189.054 5、131.049 2C15H16O4-0.9异橙皮内酯［21］3313.80271.061 4 ［M-H］-177.019 3、151.003 8、119.050 2、107.013 9C15H12O52.8柚皮素1）3413.82403.138 3 ［M+H］+388.114 0、373.091 2、327.085 3C21H22O8-2.45，7，8，3ʹ，4ʹ，5ʹ-hexamethoxy-flavone［24］3514.29373.127 7 ［M+H］+358.103 1、343.080 7、312.098 4C20H20O7-2.8甜橙黄酮1）3614.43375.143 3 ［M+H］+211.059 9、196.036 5C20H22O7-2.85，7，8，3ʹ，4ʹ-pentametho-xyflavanone［24］3714.93403.138 4 ［M+H］+388.114 4、373.091 2、327.085 8C21H22O8-2.15，6，7，3ʹ，4ʹ，5ʹ-hexamethoxy-flavone［24］3815.20403.138 3 ［M+H］+388.114 2、373.091 5、355.080 3、327.086 4C21H22O8-2.5川陈皮素1）3915.81433.148 9 ［M+H］+418.125 9、403.101 9、385.091 6、345.060 2C22H24O9-2.33，5，6，7，8，3ʹ，4ʹ-七甲氧基黄酮［24-25］4016.41373.127 8 ［M+H］+358.104 2、343.080 9、297.074 6C20H20O7-2.5橘皮素1）4116.48419.133 1 ［M+H］+404.109 7、389.086 2、371.075 9C21H22O9-2.5栀子（黄）素A［24］4217.16403.138 4 ［M+H］+388.114 5、373.091 3、355.080 7C21H22O8-2.2hexamethoxy-flavone［24］4317.66405.117 6 ［M+H］+405.117 3、390.093 2、375.070 3、357.060 0C20H20O9-2.5dihydroxy-pentamethoxyflavone［18］4418.07419.133 1 ［M+H］+404.110 3、389.086 1、371.074 8C21H22O9-2.2monohydroxy-hexamethoxyflavone［18］注：1）与对照品比对后确认3.1.1　黄酮碳苷类化合物的MS解析从陈皮醇提物中鉴定出7种黄酮碳苷类化合物，根据糖基数目可分为单糖碳苷黄酮（化合物11）和双糖碳苷黄酮（化合物5、6、9、10、13、14）2种类型，其黄酮苷元多在6-C位和8-C位以C-C键连接糖基单元。在正离子模式下，会形成连续脱水的［M+H-nH2O］+特征二级碎片离子，如化合物9、10、13、14。负离子模式下的［M-H-C3H6O3］-、［M-H-C4H8O4］-、［M-H-C4H8O4-C3H6O3］-和［M-H-2C4H8O4］-的碎片离子更具特征性。以lucenin-2为例，化合物5的准分子离子峰为m/z 609.146 9 ［M-H］-，推测其在糖环不同位置裂解生成不同碎片：在糖环上0，3键位置发生X裂解（糖基开环裂解），丢失中性C3H6O3碎片产生m/z 519.112 9的碎片；在糖环上的0，2键位置发生X裂解，丢失C4H8O4碎片形成m/z 489.105 2的碎片；糖环在0，2和0，3键位置开环裂解，丢失C4H8O4、C3H6O3碎片得m/z 399.072 6的碎片；m/z 369.061 9系同时丢失2个C4H8O4碎片，表示连续糖环的断裂，推测有2个糖基存在。同时，还出现丢失羰基碎片的离子峰m/z 313.072 2 ［M-H-2C4H8O4-2CO］-及丰度较低脱掉糖基的离子峰。结合文献数据［14］，推测化合物5为lucenin-2，其可能的裂解规律见增强出版附加材料。3.1.2　黄酮氧苷类化合物的MS解析共鉴定出了13个黄酮氧苷类化合物，分别为化合物7、8、12、15、16、18、20、21、23、24、25、26、28，其中化合物15和化合物18经对照品比对，确定分别为芸香柚皮苷、橙皮苷，芸香柚皮苷的可能裂解途径见增强出版附加材料。在正离子模式下，化合物15的准分子离子峰m/z 581.186 2 ［M+H］+，脱去一单糖基团生成二级碎片离子m/z 419.137 6，进一步发生糖羟基脱水形成m/z 401.121 9的碎片；发生Y裂解（整个糖基的丢失）中性丢失鼠李糖基生成m/z 435.129 5的碎片；丢失芸香糖形成碎片m/z 273.075 2；脱去糖基后形成的黄酮苷元C环发生逆狄尔斯-阿尔德反应（RDA）裂解生成m/z 153.018 1 ［M+H-Glc-Rha-C8H8O］+的碎片，与对照品进一步比对，确定其为芸香柚皮苷。C-C键能较C-O键能更高，故黄酮碳苷发生X裂解，而黄酮氧苷多发生Y裂解，归纳黄酮氧苷裂解规律有4个方面：①脱去糖基保留羟基；②发生Z裂解（同时丢失糖基和羟基）；③糖羟基脱水，形成丰度较小的峰；④苷元为黄酮或黄酮醇类时易发生RDA裂解。此外，在负离子模式下，化合物20的准分子离子峰为m/z 577.157 0 ［M-H］-，在MS2中给出了m/z 269.046 0、225.026 2、151.004 6、117.034 7的碎片，其中m/z 151.004 6和m/z 117.034 7分别为芹菜素C环C1-C2和C3-C4键断裂形成的特征二级碎片离子峰，结合文献［17］推测化合物为野漆树苷或异野漆树苷，综合野漆树苷对照品的tR，排除化合物20为野漆树苷的可能，故最终推测其为异野漆树苷。3.1.3　多甲氧基黄酮类化合物的MS解析从陈皮醇提物中鉴定了多个多甲氧基黄酮类化合物，其质谱裂解特征明显，多具有［M+H-nCH3］+、［M+H-nCH3-H2O］+、［M+H-nCH3-CO］+特征碎片离子，以橘皮素（化合物40）为例阐述此类化合物在正离子模式下可能的裂解途径，见增强出版附加材料。取代位置的多样性致使多甲氧基黄酮的同分异构体较多，加上液质联用技术的局限性，使得部分化合物未能区分出同分异构体，后续可通过核磁共振技术进一步鉴别。3.2　陈皮代谢成分的UPLC-HRMS分析在鉴定了陈皮化学成分的基础上，进一步分析空白血浆和不同处理组含药血浆，总离子流图见图1。结果从各血浆样品中共鉴定了22种原型入血成分，monohydroxy-hexamethoxyflavone同分异构体较多，结构不确定，故共获得21个结构明确的原型入血成分。见表2。其中，维采宁-2、diosmetin-6，8-di-C-glucoside、stellarin-2、异野漆树苷、枸橘苷、citrusin Ⅲ、melitidin、异橙皮内酯、monohydroxy-hexamethoxyflavone这9种成分在肠代谢、肝代谢样品中均可以检测到，但综合代谢样品中未检测到，推测原因有3个方面：①胃内代谢的影响。综合代谢采用灌胃给药，模拟人体口服给药，经过胃内酸性环境可使得部分化合物发生水解；另外，有研究表明因胃黏膜的吸收面积较小，使得部分化合物吸收较差［26］。②肠道菌群的影响。肠代谢研究中选取空肠段进行研究，主要考察了肠壁酶对化学成分吸收代谢的影响，但未将含有丰富肠道菌群的结肠段纳入研究，推测一些化合物可能受肠道菌群影响而代谢转化。③采血时间的影响。陈皮中化学成分复杂，不同成分血药浓度达峰时间不同，理想的采血时间应控制在血药浓度高峰期。一般认为多数化合物在2 h内达峰，故选择灌胃给药后2 h采血，但可能存在因采血时间过早或过晚造成“假阴性”结果。芸香柚皮苷、橙皮苷、橙皮内酯、异甜橙黄酮、5，7，8，3ʹ，4ʹ，5ʹ-hexamethoxy-flavone、甜橙黄酮、川陈皮素、3，5，6，7，8，3ʹ，4ʹ-七甲氧基黄酮、橘皮素这9种成分在3种血浆样品均可以检测到，说明以上成分经过大鼠体内胃肠道、肝脏等吸收代谢，仍然以原型形式在血液中移行。10.13422/j.cnki.syfjx.20221047.F001图1陈皮不同处理组样品的UPLC-HRMS总离子流Fig. 1Total ion current chromatograms of samples from different treatment groups of Citri Reticulatae Pericarpium注：A.肠代谢正离子模式；B.肠代谢负离子模式；C.肝代谢正离子模式；D.肝代谢负离子模式；E.综合代谢正离子模式；F.综合代谢负离子模式10.13422/j.cnki.syfjx.20221047.T002表2陈皮原型入血成分及代谢位点Table 2Prototypical blood components and metabolic sites of Citri Reticulatae Pericarpium化合物肠代谢肝代谢综合代谢5YNDND6YYND9YYND10YYND15YYY17YNDND18YYY19YYY20YYND25YYND27YYND28YYND30YNDND31YYY32YYND34YYY35YYY38YYY39YYY40YYY41YNDND44YYND注：化合物编号同表1；Y.原型入血成分；ND.未检测到的成分4 讨论以“质量传递与溯源、成分特有性、成分有效性、成分可测性、复方配伍环境”为基本原则的中药质量标志物的提出推动了中药质量标准化进程［27］，其中，中药固有成分的有效性至关重要。此外，现代药理学认为，除肠道起作用的药物和外用药外，大多数药物通过血液运输到器官组织或靶点，并维持一定血液浓度才能发挥药效［28］。因此，研究中药的代谢情况，鉴定其入血成分对药效物质基础的阐明和中药质量标准的提升具有重要意义。本研究基于序贯代谢方法和UPLC-HRMS技术，制备并分析了陈皮肠代谢、肝代谢及综合代谢3种不同处理组的含药血浆，结合文献与对照品信息，对比分析陈皮醇提物、含药血浆及空白血浆，共鉴定出21个结构明确且以原型入血的成分。序贯代谢方法中的在体肠灌流持续给药可解决灌胃给药时由于成分含量低而检测不到的问题，从而较全面地获得入血成分，并在多成分代谢环境下明确陈皮中化合物在大鼠体内的代谢位点和代谢过程，在一定程度上缩小作用靶点范围。通过序贯代谢研究可以系统阐释中药多成分在体内的代谢转化过程，进一步分析中药临床口服给药途径的合理性。例如，有研究报道石榴中安石榴苷可在肠道中代谢转化为较易被人体吸收的尿石素A［29］，临床试验证明尿石素A是石榴发挥抗衰老的活性成分［30］，即石榴口服给药后，其中的成分可经肠道转化并吸收入血，进而发挥药效，这也证明了石榴口服给药是其发挥抗衰老作用的合理用药方式。在本研究中，陈皮肠代谢和肝代谢的代谢成分组成有所区别，后续研究若进一步证明肠道代谢成分是活性成分，则可为陈皮建立合理的临床用药方式提供依据。本研究鉴定的21个结构明确且以原型入血的成分，可认为是陈皮的潜在活性成分。据报道，上述入血成分中多甲氧基黄酮川陈皮素、甜橙黄酮、橘皮素、异甜橙黄酮具有抗炎、抗氧化、抗癌等活性［31-33］，可通过抑制核苷酸结合寡聚化结构域（NOD）样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）调控脂多糖（LPS）诱导的生物节律紊乱［34］；3，5，6，7，8，3ʹ，4ʹ-七甲氧基黄酮可通过激活3T3-L1前脂肪细胞中的蛋白激酶A（PKA）信号通路来抑制脂肪形成的早期阶段［35］；黄酮碳苷类化合物lucenin-2、维采宁-2、stellarin-2能显著抑制LPS刺激的小鼠巨噬细胞RAW264.7一氧化氮（NO）的产生，降低诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和环氧合酶-2（COX-2）的表达，发挥抗炎活性［36］；黄酮氧苷类化合物橙皮苷、芸香柚皮苷和多甲氧基黄酮川陈皮素、甜橙黄酮、橘皮素均可通过腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）信号通路增强葡萄糖摄取和糖生成，从而调节肝脏代谢［37］；枸橘苷可能通过激活骨骼肌胰岛素抵抗及调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路发挥抗糖尿病作用［38］；橙皮苷具有保护心肌细胞［39］、抗肿瘤［39］及改善记忆［40］等作用，芸香柚皮苷具有抗癌、保护神经、抑制脂肪生成和免疫调节等作用［41］，栀子（黄）素A具有神经保护［42］、降血脂和保肝的作用［43］，橙皮内酯、异橙皮内酯具有抗炎作用［44］。从入血成分中筛选质量控制成分，除考虑有效性外，还需兼顾成分在药材中的含量水平、适用性、专属性等因素。本研究中所选陈皮产地为四川，陈化年限约2年，而陈皮化学成分的含量和种类受不同年份、产地的影响［45-47］，会引起生物活性的差异［48］，今后需重点关注。综上所述，本研究解析了陈皮化学成分在大鼠体内的代谢情况及其在不同代谢部位的成分差异，锁定了大部分潜在活性成分，可为陈皮质量标准提升和品质评价提供科学依据，并可指导该药材的临床给药方式制定与进一步资源开发。