心肌梗死（MI），是由于冠状动脉血液供应和需求的失衡而导致的心肌缺血性损伤，是当今社会威胁人类健康的重大难题，其患病率及死亡率不断上升［1］。MI的患者临床表现为剧烈的胸骨后疼痛，心肌酶异常升高，心电图异常并且在超声心动图中表现为异常的心室壁运动，严重者常发生心肌衰竭并危及生命［2-3］。中医药防治心血管疾病疗效显著，如通心络、桃红四物汤等［4-7］。MI患者以胸闷、胸痛为主要症状，故在中医学中常归属于“胸痹”“真心痛”等范畴。真心痛，最早见于《黄帝内经·灵枢·厥病》：“真心痛，手足青至节，心痛甚，旦发夕死，夕发旦死”，为心之本身受邪引起的心胸部剧痛，病位在心。胸痹心痛首次出现在《金匮要略》中：“胸痹久痛，喘息咳唾，胸背痛，短气”。因此“胸痹”“真心痛”对应现代疾病心肌梗死、心绞痛等。《金匮要略》中将胸痹心痛的病因病机概括为“阳微阴弦”，即上焦主阳不足、阴寒痰瘀上乘于胸而成痹，发心痛。枳实薤白桂枝汤（ZXGT）由东汉张仲景所创，载于《金匮要略》，是治疗胸痹心痛的经典名方。该方由枳实、薤白、瓜蒌、桂枝、厚朴组成，具有通阳开结，泄满降逆之效，主治“胸痹心中痞，留气结在胸，胸满，胁下逆抢心”之证。ZXGT在现代广泛用于治疗冠心病心绞痛症见气结于胸者，有显著疗效［8-10］，收载于国家中医药管理局公布的《古代经典名方目录（第一批）》。现代药理研究表明，ZXGT具有抗氧化、抗炎、抗凋亡、抗缺氧等多种特性，在心肌缺血、心肌缺血再灌注等方面发挥了显著作用［11-14］。并且ZXGT中的瓜蒌、薤白联用可改善脂质紊乱和炎症反应，起到抗动脉粥样硬化作用。在国家大力支持经典名方开发的政策指导下，进行枳实薤白桂枝成药制剂的开发是当前研究的热点之一，故科学阐释其治疗“胸痹”的药效机制十分必要。研究发现，炎症因子是MI的重要指标，MI后过量炎症因子的释放可能会增大心肌梗死的面积［15］。ZXGT方中所包含的枳实、桂枝具有抗炎、保护心肌作用，有关ZXGT的网络药理学研究提示，肿瘤坏死因子（TNF）和核转录因子-κB（NF-κB）通路可能是ZXGT调控治疗MI的关键途径［16］。基于此，本研究建立异丙肾上腺素（ISO）诱导的大鼠MI模型，采用经典名方研发要求，遵《金匮要略》记载制备ZXGT标准煎液，通过心功能、心脏形态、心肌酶和炎症因子水平评价ZXGT治疗MI的药效，并从炎症方面探讨其可能的分子机制，以期为该方的临床应用与药物开发提供参考。1 材料1.1　动物SD大鼠48只，雄性，体质量180~220 g，均购于北京斯贝福生物科技有限公司，动物合格证号SCXK（京）2019-0010，本实验由成都中医药大学实验动物福利伦理委员会批准，批准号2021-46。大鼠饲养于湿度为45%~55%、温度为20~24 ℃的环境，自由饮食饮水。1.2　药物与试剂ZXGT标准煎液（枳实9 g、薤白24 g、瓜蒌25 g、厚朴12 g、桂枝3 g，按国家药监局古代经典名方目录管理的3.1类新药相关研究要求进行制备，质量浓度为2 g·L-1，由成都华神科技有限公司提供，批号210301）；培哚普利（施维雅天津制药有限公司，规格4 mg，国药准字H0034053），由纯水配置成质量浓度为0.04 g·L-1的混悬液；R7050（美国Selleck公司，批号S6664302）；盐酸ISO（美国Sigma公司，批号BCBZ5101）；异氟烷（深圳市瑞沃德生命科技有限公司，批号21011401）；大鼠心肌肌钙蛋白T（cTnT）、大鼠白细胞介素-1（IL-1）、大鼠TNF-α酶联免疫吸附测定法（ELISA）试剂盒（武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司，批号分别为FU046DL6036、FU05482B1076、FU06282R2025）；大鼠肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）ELISA试剂盒、乳酸脱氢酶（LDH）测定试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号分别为20220628、20220609）；肿瘤坏死因子受体1（TNFR1，美国Thermo Fisher Scientific公司，批号PA5-80154）；肿瘤坏死因子受体相关因子2（TRAF2）、核转录因子-κB抑制蛋白α（IκBα）、磷酸化（p）-IκBα、NF-κB p65、p-NF-κB p65（澳大利亚Affinity公司，批号分别为DF6146、AF5002、AF2002、AF5006、AF2006）；甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）、苏木素-伊红（HE）染液套装（武汉Servicebio公司，批号分别为GB11002、G1003）。1.3　仪器Power Lab数据采集分析系统（澳大利亚AD Instruments）；Vevo®3100超高分辨小动物超声成像系统（美国VisualSonics公司）；ALLEGRA X-12R型低温高速离心机（美国Beckman公司）；R540IE型小动物麻醉机（深圳瑞沃德生命科技有限公司）；CYT5MFV细胞成像微孔板检测系统（美国伯腾仪器有限公司）；DHG-9030A型电热鼓风干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司）；Eclipse Ci-L型正置白光拍照显微镜（日本Nikon公司）；JXFSTPRP-CL型全自动样品冷冻研磨仪（上海净信实业发展有限公司）；Min Trans-Blot型电泳装置（美国Bio-Rad公司）；Tanon-5200凝胶成像系统（上海天能公司）。2 方法2.1　动物分组及给药48只雄性SD大鼠，适应性喂养后进行心电图检测，筛选心电图正常大鼠纳入实验，按体质量随机分为空白组、模型组、培哚普利组、ZXGT组、ZXGT+抑制剂组和抑制剂组，每组8只。ZXGT临床日用量为71 g，以成人体质量60 kg为标准，人用量为1.22 g·kg-1。前期本课题组开展了ZXGT对MI大鼠模型影响的实验，按人用量的5、10、20倍（即6.1、12.2、24.4 g·kg-1）进行灌胃给药，发现24.4 g·kg-1剂量对于MI大鼠的药效结果最好，故本研究确定给药剂量为24.4 g·kg-1。连续给药7 d，ZXGT组、ZXGT+抑制剂组灌胃给予ZXGT 24.4 g·kg-1，培哚普利组灌胃给予培哚普利4 mg·kg-1，空白组和模型组灌胃相同体积纯水，第6、第7天灌胃30 min后ZXGT+抑制剂组和抑制剂组腹腔注射R7050（5 mg·kg-1）。第6、第7天每次给药1 h后，模型组、培哚普利组、ZXGT组、ZXGT+抑制剂组和抑制剂组大鼠腹腔注射ISO（85 mg·kg-1），空白组注射等体积生理盐水，连续2 d，间隔24 h。2.2　指标检测2.2.1　心脏功能检测在最后一次注射盐酸ISO或生理盐水后30 min，使用异氟烷麻醉大鼠，采用四肢皮下二导联连接Power Lab数据采集分析系统监测ECG并记录10 min。ECG监测完毕后持续使用异氟烷麻醉大鼠，使用小动物超声成像系统采集胸骨旁长轴视图下的B mode图像。采用Vevo Strain软件进行图像分析得出心脏整体轴向应变（GLS）和最大对壁延迟时间。。2.2.2　ELISA检测血清指标水平末次注射ISO 6 h后，各组大鼠用2%戊巴比妥钠腹腔麻醉，腹主动脉取血，于3 000 r·min-1离心15 min（离心半径9.3 cm）收集上清，按试剂盒说明书测定各组大鼠血清中cTnT、CK-MB、LDH、TNF-α、IL-1β的含量或活性。2.2.3　HE染色观察大鼠心肌组织病理变化大鼠处死后，迅速摘取心脏，将心室部分于4%多聚甲醛溶液中固定24 h，进行修剪、脱水、包埋、切片、染色、封片。染色切片在正置白光拍照显微镜下观察心肌组织坏死以及炎性变化情况并拍照。2.2.4　免疫组化法检测大鼠心肌组织中TNF-α、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达采用免疫组化法检测TNF-α、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白的表达。将石蜡切片脱蜡、清洗后，根据说明书进行抗原修复并阻断内源性过氧化物酶，3% BSA室温封闭30 min后，一抗（TNF-α、NF-κB p65、p-NF-κB p65，1∶200），4 ℃孵育过夜。次日相应种属的二抗均匀覆盖组织，室温孵育，DAB显色液显色，将阳性区域染至棕黄色，苏木素复染、分化、返蓝，切片脱水透明，稍晾干，中性树胶封片。显微镜拍照，并采用Image J软件测算平均积分吸光度AA。2.2.5　蛋白免疫印迹法（Western blot）检测心肌组织TNF/NF-κB通路相关蛋白的表达取各组心肌组织提取总蛋白，加入RIPA裂解液充分裂解后，4 ℃、12 000 r·min-1离心15 min（离心半径7.4 cm），采用BCA法检测蛋白浓度。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分离，转PVDF膜，5%脱脂奶粉封闭，一抗（TNFR1、TRAF2、TAK1、IκBα、p-IκBα、NF-κB p65、p-NF-κB p65、GAPDH，1∶1 000），4 ℃孵育过夜，TBST洗涤，膜放入二抗（1∶10 000）中，室温孵育1 h，TBST洗涤，ECL显色，于成像仪暗室中曝光，并采用Image J软件分析膜上目的蛋白相对表达量。2.3　统计学分析采用SPSS 22.0统计学软件分析数据，计量资料符合正态分布，以x¯±s表示，经方差齐性检验后，多组间比较采用单因素方差分析，方差齐时两组间比较采用最小显著性差异法（LSD），方差不齐时采用Dunnett T3检验，以P0.05认为差异具有统计学意义。3 结果3.1　对ISO致MI大鼠心电图ST段的影响与空白组比较，模型组大鼠ST段显著抬高，且0.1 mV（P0.01）；与模型组比较，培哚普利组、ZXGT组、ZXGT+抑制剂组、抑制剂组ST段抬高幅度明显降低（P0.05，P0.01）；与ZXGT组比较，ZXGT+抑制剂组、抑制剂组大鼠心电图ST段抬高幅度差异无统计学意义。由此可见，ZXGT可降低MI大鼠ST段的抬高，改善心功能。见表1。10.13422/j.cnki.syfjx.20230844.T001表1ZXGT对MI大鼠心电图ST段抬高的影响 （x¯±s，n=8）Table 1Effect of ZXGT on ST segment elevation in MI rats （x¯±s，n=8）组别剂量/g·kg-1ST抬高/mV空白组0.024 1±0.018 1模型组0.113 6±0.029 62）培哚普利组4×10-30.052 1±0.014 24）ZXGT组24.40.052 0±0.009 54）ZXGT+抑制剂组24.4+5×10-30.050 3±0.019 04）抑制剂组5×10-30.058 0±0.014 23）注：与空白组比较1）P0.05，2）P0.01；与模型组比较3）P0.05，4）P0.01（表2-表6同）3.2　对ISO致心肌梗死大鼠心脏超声心动的影响与空白组比较，模型组大鼠心脏GLS及最大对壁延迟时间均显著增大（P0.01）；与模型组比较，培哚普利组、ZXGT组、ZXGT+抑制剂组、抑制剂组大鼠GLS和最大对壁延迟时间均降低（P0.05，P0.01）；与ZXGT组比较，ZXGT+抑制剂组、抑制剂组超声心动图指标差异均无统计学意义。由此可见，ZXGT可改善MI大鼠的心脏功能，改善心脏收缩舒张同步性。见表2。10.13422/j.cnki.syfjx.20230844.T002表2ZXGT对MI大鼠GLS及同步性的影响 （x¯±s，n=8）Table 2Effect of ZXGT on GLS and synchrony in MI rats （x¯±s，n=8）组别剂量/g·kg-1GLS/%最大对壁延迟时间/ms空白组-18.86±2.4215.00±9.26模型组-3.46±2.792）96.00±41.502）培哚普利组4×10-3-14.45±6.183）36.38±25.064）ZXGT组24.4-13.33±6.213）40.50±27.714）ZXGT+抑制剂组24.4+5×10-3-13.88±5.184）38.63±27.994）抑制剂组5×10-3-12.11±3.524）36.25±47.794）3.3　对ISO致心肌梗死大鼠心肌组织HE染色的影响空白组心脏组织心内膜、心肌膜及心外膜结构清晰，心壁及心腔未见明显异常；心肌纤维着色均匀，细胞分界清楚，走形一致，心肌细胞横纹清楚，明、暗相间，间质未见异常；未见明显的炎性改变。与空白组相比，模型组心脏组织可见大面积心肌细胞坏死，体积减小，核固缩，伴有淋巴细胞浸润。培哚普利组、ZXGT组、ZXGT+抑制剂组、抑制剂组心脏组织可见小面积心肌细胞坏死体积减小，核固缩，伴少量淋巴细胞浸润，较模型组相比有所减轻。因此，ZXGT可减轻MI大鼠的心肌坏死面积和炎症浸润，保护心肌。见图1。10.13422/j.cnki.syfjx.20230844.F001图1ZXGT对MI大鼠心肌组织形态学的影响 （HE，×200）Fig.1Effect of ZXGT on myocardial histomorphology in MI rats（HE，×200）注：A.空白组；B.模型组；C.培哚普利组；D.ZXGT组；E.ZXGT+抑制剂组；F.抑制剂组（图2和图3同）3.4　对ISO致心肌梗死大鼠血清酶学的影响与空白组比较，模型组大鼠血清中CK-MB、cTnT含量和LDH活性显著升高（P0.01）；与模型组比较，培哚普利组、ZXGT组、ZXGT+抑制剂组、抑制剂组血清中CK-MB、cTnT含量和LDH活性显著下降（P0.01）；与ZXGT组比较，ZXGT+抑制剂组、抑制剂组各指标差异均无统计学意义。结果表明，ZXGT可减轻MI大鼠心肌细胞损伤。见表3。10.13422/j.cnki.syfjx.20230844.T003表3ZXGT对MI大鼠血清中CK-MB、cTnT、LDH含量或活性的影响 （x¯±s，n=8）Table 3Effect of ZXGT on level of CK-MB， cTnT and LDH in serum of MI rats （x¯±s，n=8）组别剂量/g·kg-1CK-MB/μg·L-1cTnT/ng·L-1LDH/U·L-1空白组29.14±5.849.25±5.503 019.17±767.93模型组48.05±8.792）59.13±12.502）6 153.83±842.642）培哚普利组4×10-334.54±6.594）27.44±11.464）4 050.39±561.934）ZXGT组24.433.81±6.214）26.22±9.714）3 959.14±568.674）ZXGT+抑制剂组24.4+5×10-333.71±9.734）27.27±11.894）3 835.60±389.494）抑制剂组5×10-335.07±7.524）28.75±10.764）3 928.60±460.084）3.5　对ISO致MI大鼠血清中炎症因子的影响与空白组比较，模型组大鼠血清中TNF-α、IL-1β的含量显著升高（P0.01）；与模型组比较，培哚普利组、ZXGT组、ZXGT+抑制剂组、抑制剂组大鼠血清中的TNF-α、IL-1β含量均显著降低（P0.01）；与ZXGT组比较，ZXGT+抑制剂组、抑制剂组差异均无统计学意义。结果表明，ZXGT可减轻MI大鼠炎症反应。见表4。10.13422/j.cnki.syfjx.20230844.T004表4ZXGT对MI大鼠血清中TNF-α、IL-1β含量的影响 （x¯±s，n=8）Table 4Effect of ZXGT on serum of TNF-α，IL-1β in MI rats （x¯±s，n=8）组别剂量/g·kg-1TNF-αIL-1β空白组16.15±4.4117.25±1.18模型组58.62±8.512）23.52±2.402）培哚普利组4×10-333.20±9.374）18.26±1.964）ZXGT组24.434.15±5.924）18.13±1.064）ZXGT+抑制剂组24.4+5×10-333.32±15.414）18.62±1.274）抑制剂组5×10-335.37±8.124）19.63±1.274）ng·L-13.6　对ISO致MI大鼠心肌组织TNF/NF-κB通路相关蛋白表达的影响免疫组化结果显示，与空白组比较，模型组大鼠心肌组织中TNF-α、p-NF-κB p65的表达显著升高，差异有统计学意义（P0.01）；与模型组比较，ZXGT组、ZXGT+抑制剂组和抑制剂组心肌组织中TNF-α、p-NF-κB p65的表达显著下降，差异具有统计学意义（P0.01）；与ZXGT组比较，ZXGT+抑制剂组、抑制剂组TNF-α、NF-κB p65、p-NF-κB p65表达差异均无统计学意义。见图2、表5。10.13422/j.cnki.syfjx.20230844.F002图2ZXGT对MI大鼠心肌组织TNF-α、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达水平的影响 （免疫组化，×200）Fig.2Effect of ZXGT on expression levels of TNF-α， NF-κB p65 and p-NF-κB p65 proteins in myocardium of MI rats （IHC，×200）10.13422/j.cnki.syfjx.20230844.T005表5ZXGT对MI大鼠心肌组织TNF-α、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达水平的影响 （x¯±s，n=3）Table 5Effect of ZXGT on expression levels of TNF-α， NF-κB p65 and p-NF-κB p65 proteins in myocardium of MI rats （x¯±s，n=3）组别剂量/g·kg-1TNF-αNF-κB p65p-NF-κB p65空白组0.094 5±0.002 60.188 8±0.011 50.079 3±0.006 0模型组0.217 5±0.003 82）0.191 2±0.019 40.173 5±0.010 52）培哚普利组4×10-30.154 5±0.009 64）0.187 3±0.018 70.110 0±0.007 94）ZXGT组24.40.130 8±0.008 94）0.185 0±0.018 40.089 5±0.008 04）ZXGT+抑制剂组24.4+5×10-30.118 7±0.010 44）0.185 5±0.016 40.085 2±0.005 14）抑制剂组5×10-30.136 2±0.014 54）0.189 5±0.020 70.121 0±0.003 94）Western blot结果显示，与空白组比较，模型组大鼠心肌组织中TNFR1、TRAF2、TAK1、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达显著升高（P0.01），IκBα蛋白表达显著降低（P0.01）；与模型组比较，ZXGT组、ZXGT+抑制剂组和抑制剂组大鼠心肌组织中TNFR1、TRAF2、TAK1、p-IκBα、p-NF-κB p65的蛋白表达明显下降（P0.05，P0.01），IκBα蛋白表达明显升高（P0.05，P0.01）；与ZXGT组比较，ZXGT+抑制剂组、抑制剂组所有蛋白表达水平差异均无统计学意义。ZXGT可能通过抑制TNF/NF-κB通路，减轻心肌炎症反应，保护心肌。见表6、图3。10.13422/j.cnki.syfjx.20230844.T006表6ZXGT对MI大鼠心肌组织TNF/NF-κB通路相关蛋白表达水平的影响 （x¯±s，n=3）Table 6Effect of ZXGT on expression levels of TNF/NF-κB pathway related proteins in myocardium of MI rats （x¯±s，n=3）组别剂量/g·kg-1TNFR1/GAPDHTRAF2/GAPDHTAK1/GAPDHIκBα/GAPDHp-IκBα/GAPDHp-NF-κB p65/NF-κB p65空白组1.14±0.110.24±0.110.23±0.111.22±0.090.45±0.270.44±0.12模型组1.68±0.052）0.97±0.132）0.86±0.032）0.67±0.062）1.30±0.242）1.10±0.232）培哚普利组4×10-31.49±0.270.50±0.034）0.43±0.154）0.84±0.020.69±0.204）0.61±0.054）ZXGT组24.41.15±0.224）0.44±0.024）0.41±0.074）0.93±0.093）0.68±0.194）0.62±0.214）ZXGT+抑制剂组24.4+5×10-30.93±0.084）0.54±0.254）0.38±0.054）0.96±0.164）0.80±0.143）0.55±0.154）抑制剂组5×10-31.10±0.144）0.52±0.064）0.36±0.064）0.95±0.154）0.71±0.164）0.58±0.054）10.13422/j.cnki.syfjx.20230844.F003图3MI大鼠心肌组织TNF/NF-κB通路相关蛋白表达电泳Fig.3Electrophoresis of TNF/NF-κB pathway related proteins in myocardial tissue in MI rats4 讨论MI属于“胸痹心痛”范畴，临床症状中常见胸部闭塞疼痛，喘息咳唾、短气，严重者发展为重度胸痛彻背，背痛彻心，手足青至节，对应现代医学MI的表现。在张仲景所著《金匮要略》中认为，在胸痹主证基础上，又见心下痞塞，胸满胁下逆抢心等症，表明病势已由胸膺部向下蔓延至胃脘两胁之间，并且胁下之气又逆而上冲，痰浊壅塞，气滞不通，并且其治疗核心在于通阳开结，泄满降逆，宜用ZXGT。ZXGT由瓜蒌、薤白、枳实、厚朴、桂枝组成。方中瓜蒌滑利，开胸化痰，除胸中痞塞；薤白辛温通阳下气止痛；枳实除胸中气滞；厚朴泄满导滞；桂枝既通阳又降逆，诸药配伍，具有通阳散结，行气化痰之功效，能有效缓解MI损伤。因此，本研究采用ISO诱导建立MI模型，探究了ZXGT在ISO诱导的大鼠MI模型中的作用及其作用机制。ISO是一种β受体激动剂，作用于心脏β1受体，可收缩冠状动脉血管增加心肌耗氧量，大剂量注射可导致心肌过度收缩、心率加快、冠脉痉挛，最终出现心肌缺血、坏死，并且ISO诱导的MI模型与临床相似［17］。MI主要表现为心电图中ST段特异性改变、超声心动图的异常、血液中心肌酶、炎症因子水平增高，这是临床诊断MI常用检测手段［18］。心电图中ST段的变化幅度可基本反映心肌梗死的严重程度，超声心动图能反映心脏功能的异常，其中GLS对于心肌壁运动异常十分灵敏，可用于诊断MI，而心脏运动同步性是保证正常左室收缩与舒张功能的重要因素之一，同步性用最大对壁延迟来测量［19-22］。最大对壁延迟增大即同步性降低说明心室收缩和舒张效率下降。当心肌发生缺血梗死时，心肌酶因心肌细胞膜遭到破坏而释放到血液中，因此血清中cTnT、CK-MB和LDH水平可以反映缺血损伤的程度，并且能够反映治疗效果。炎症在MI发病过程中发挥着重要作用，血清炎症标志物IL-1β、TNF-α和水平反映机体炎症程度，心肌梗死后会显著升高［23］。本研究结果显示，模型组大鼠ST段显著抬高，超声心动图显示GLS显著增大、心脏同步性降低，心肌大面积坏死，血清心肌酶CK-MB、cTnT和LDH和炎症因子TNF-α、IL-1β水平明显高于空白组，具有急性心肌梗死的表现。与模型组比较，ZXGT组的ST段抬高幅度明显降低，GLS及心脏同步性改善，心肌酶和炎症因子水平下调。观察表明，ZXGT可减少ISO对大鼠心肌的损伤。并且TNF通路抑制剂R7050组对MI大鼠的作用与ZXGT组一致，无明显差异，且ZXGT+抑制剂组同样与ZXGT组无差异，说明ZXGT对大鼠心肌保护作用可能与TNF通路有关。MI发生过程中，心肌TNF通路激活，从而激活下游NF-κB通路，介导炎症反应，显示TNF/NF-κB通路在MI的发生发展中发挥重要作用［24-25］。有关ZXGT的网络药理学研究提示，ZXGT抗冠心病作用可能与TNF通路、NF-κB通路密切相关［16，26］。为了验证这一结果，在本研究中检测了大鼠心肌中相关蛋白TNF-α、TNFR1、TRAF2、TAK1、IκBα、p-IκBα、NF-κB p65、p-NF-κB p65的水平。结果显示，ZXGT可明显降低ISO诱导MI大鼠心肌组织中TNF-α、TNFR1、TRADD、TAK1、p-IκBα和p-NF-κB p65蛋白的表达，增加IκBα的表达，与模型组比较，差异有统计学意义。R7050是TNF通路抑制剂，能特异性与TNFR1结合，从而达到抑制TNF通路的作用。为进一步确认ZXGT对ISO诱导MI大鼠的治疗作用是否有TNF通路的参与，在本研究中设置了抑制剂组及ZXGT+抑制剂组。结果显示，ZXGT与TNF通路抑制剂R7050表现出相似的结果，差异无统计学意义，二者联用组的效果与该两组相当，从而进一步说明ZXGT的心脏保护作用可能与下调TNFR1蛋白表达从而抑制TNF/NF-κB通路有关。有研究表明，腺苷、鸟苷、槲皮素是ZXGT治疗冠心病的有效成分［16］，而ZXGT中的成分厚朴酚、和厚朴酚、肉桂酸、肉桂醛均可通过抑制NF-κB通路发挥抗炎作用［27-31］，推测这些物质可能在ZXGT减轻MI导致的心肌损伤中发挥了重要作用，但这一假设需要进一步的实验验证。并且目前的研究仅关注了ZXGT通过抑制TNF/NF-κB通路从而减轻MI大鼠心肌损伤。ZXGT是否有着其他途径或靶点，并且能否在心肌梗死后心肌纤维化、心室重构甚至心衰中发挥作用，还有待进一步研究。综上所述，ZXGT对于ISO诱导的大鼠心肌梗死有明显预防作用，可保护心脏功能，减轻心肌损伤，减轻心肌炎症，其作用机制可能是下调TNFR1蛋白表达，抑制TNF/NF-κB通路。