目的は、ネットワーク薬理学と動物実験に基づき、「肺腸同治」法を用いて桑皮止咳方が呼吸器合胞体ウイルス（RSV）感染後の咳嗽に及ぼす作用機序を検証することである。方法として、中薬システム薬理データベース（TCMSP）から桑皮止咳方の活性成分とその標的を取得し、GeneCardsとヒトメンデル遺伝オンラインデータベース（OMIM）から疾病標的を収集した。薬物と疾病標的の交差部分を抽出し、タンパク質相互作用ネットワークおよび薬物-成分-標的ネットワークを構築してコア標的を取得した。交差標的に対して遺伝子オントロジー（GO）および京都大学ゲノム百科事典（KEGG）経路の富化解析を行った。60匹のマウスモデルを用い、10匹を正常群として無作為に選び、残りは両側鼻腔にRSVウイルス懸濁液を徐々に滴下し、カプサイシン溶液を用いて咳嗽を誘発し感染後の咳嗽モデルを作製した。モデルマウスをモデル群、モンテルカストナトリウム群（1 mg·kg⁻¹·d⁻¹）、および桑皮止咳方の低・中・高用量群（4.875、9.75、19.5 g·kg⁻¹·d⁻¹）に各10匹ずつ分けた。RSV滴鼻感染後14日目から、正常群とモデル群は生理食塩水を胃内投与し、他群はそれぞれの薬物を1日1回、連続5日間投与した。ヘマトキシリン・エオジン染色（HE）でマウスの肺および結腸組織の病理形態変化を観察し、ウェスタンブロットで肺と結腸組織の細胞外シグナル調節キナーゼ1/2（ERK1/2）およびリン酸化（p）-ERK1/2蛋白含量を測定した。リアルタイムPCRで肺と腸組織のERK1/2 mRNA発現を検出し、免疫組織化学法で各群の肺および結腸組織中のp-MEK1/2、p-ERK1/2、p-c-Fos蛋白レベルおよび炎症因子白血球介素（IL）-4、腫瘍壊死因子（TNF）-αレベルを検出した。結果、ネットワーク薬理学の結果は194個の活性成分と684個の対応標的を示し、呼吸器合胞ウイルス関連標的は1344個、薬物と疾病の交差標的は209個で、コア標的はTNF、Fos、Junなどであった。KEGG経路富化解析で179の経路が得られ、主にMAPKシグナル経路、癌経路、TNF経路、IL-17経路が含まれた。動物実験では、正常群と比較しモデル群で肺組織に典型的な炎症性損傷、炎症細胞浸潤、肺胞隔壁破壊、大規模肺胞融合が認められ、腸組織では単層の円柱上皮間結合破壊が観察された。肺および結腸組織のp-ERK1/2およびERK1/2値は有意に上昇し（p<0.01）、ERK1/2 mRNA発現も有意に増加した（p<0.01）。ERK経路におけるERK1/2、p-MEK1/2、p-ERK1/2、p-c-Fos、IL-4、TNF-αレベルは有意に上昇した（p<0.05、p<0.01）。モデル群と比較して桑皮止咳方は肺および腸組織の炎症性損傷を著明に改善し、p-ERK1/2およびERK1/2値は著しく低下し（p<0.05、p<0.01）、ERK1/2 mRNA発現も著しく低下し、ERK経路の蛋白質発現レベルも有意に減少した（p<0.05、p<0.01）。結論として、桑皮止咳方は「肺腸同治」法によりERKシグナル経路上のERK1/2、p-MEK1/2、p-ERK1/2、p-c-Fos、IL-4、TNF-αの発現を抑制し、肺腸組織の病理的損傷を軽減し、RSV感染後の咳嗽および腸関連症状の治療に寄与することが示された。

桑皮止咳方;肺腸同治;呼吸器合胞ウイルス（RSV）;感染後咳嗽;シグナル経路