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生物情報学と実験検証に基づいて香玄解毒方により鉄死亡の調節により乾癬を緩和する作用機序を探る
YANG Haoruo
,
XIAO Xue
,
LI Jiaqi
,
ZHANG Ningxin
,
YANG Bin
,
SONG Ping
,
DOI:
10.13422/j.cnki.syfjx.20250642
摘要
目的は、生物情報学技術を使用して、乾癬と密接に関連する鉄死亡分子パターンと診断バイオマーカーをスクリーニングし、動物実験を通じて香玄解毒方が乾癬の治療に及ぼす作用及び潜在的なメカニズムを探索すること。方法は、GEOデータベースを検索し、乾癬のマイクロアレイデータを取得し、異なる遺伝子(DEG)をスクリーニングし、鉄死亡遺伝子セットとの交集を取り、乾癬と鉄死亡関連遺伝子(FRGs)を得て、相関分析、一貫性クラスタリング分析、エンリッチメント分析、免疫浸潤分析を行い、ランダムフォレストモデル(RF)、サポートベクターマシンモデル(SVM)、最小絶対収縮選択演算子(LASSO)回帰、列線図(Nomogram)および受容者操作特性曲線(ROC)解析を行い、診断特性を有する核FRGsを選択する。動物実験では、正常な群以外の各群には5%のミクアモルト乳軟膏を投与し、乾癬マウスモデルを構築した。モデルを構築した同時に、対応する薬物を投与し、正常な群、モデル群には等体積の生理食塩水を経口投与し、その他1回、合計7日間。マウスの背部の皮膚の変化を観察し、重症度指数(PASI)を評価し、HE染色法により皮膚組織の病理学的変化を観察し、皮膚組織の亜鉄イオン(Fe2+)、マラニルジアルデヒド(MDA)、4-ヒドロペリオンアルデヒド(4-HNE)、フリーファティアシッド(FFA)レベルを測定し、免疫蛍光法(IF)により皮膚組織の活性酸素(ROS)レベルを測定し、免疫組織化学法(IHC)によりChaCグルタチオン特異的γ-グルタミルセルトランスフェラーゼ1(CHAC1)、アロキサーゼ12B、TRIM21、增殖標識物(Ki-67)、核転写因子-κB(NF-κB)タンパク質の発現を測定した。結果として、GSE30999データセットに基づいて、2,100のDEGと24のFRGsが選択された。遺伝子オントロジー(GO)および京都遺伝子および遺伝子ゲノム百科事典(KEGG)エンリッチメント分析により、1,000件の生物機能と75件のパスウェイが得られた。クラスター分析に基づいて、3つの機械学習アルゴリズム、NomogramおよびROC曲線分析を組み合わせて、核Hub-FRGs(CHAC1、ALOX12B、TRIM21)を得た。免疫浸潤分析により、非活性記憶CD4+T細胞、活性樹状細胞の豊富さとHub-FRGsの間に有意な相関があることが示された。動物実験では、モデル群のマウスの表皮細胞が角化異常、炎細胞の浸潤などの病理学的変化が著しく、皮膚のPASIスコアとBakerスコアが著しく上昇した(P<0.05)。皮膚組織のFe2+、MDA、4-HNE、FFA、ROSレベル、およびCHAC1、ALOX12B、TRIM21、Ki-67、NF-κBタンパク質の発現量がすべて著しく上昇した(P<0.05)。モデルグループと比較して、各投薬グループのマウスのPASIスコアとBakerスコアは著しく低下した(P<0.05)、皮膚の病理学的変化は異なる程度で緩和された。各グループのマウスの皮膚組織のFe2+、MDA、4-HNE、FFA、ROSレベルおよびHub-FRGs、Ki-67、NF-κBの発現量はすべて著しく低下した(P<0.05)。結論として、開玄解毒核心薬は乾癬モデルマウスの皮膚病理学的損傷を有意に改善し、良好な治療と修復作用を示し、そのメカニズムは乾癬の発症に密接に関連した鉄死亡遺伝子CHAC1、ALOX12B、TRIM21の発現を調節することに関連している。
关键词
乾癬;香玄解毒核心薬;鉄死亡;生物情報学;機械学習;マウス
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