目的：細胞周期依存性キナーゼ16（CDK16）/MYC多機能転写因子経路に基づき、葛根芩連湯含薬血清が解糖系を抑制し、5-フルオロウラシル（5-FU）耐性大腸癌（CRC）細胞の化学療法感受性を促進する分子メカニズムを探究した。方法：5％、10％、20％、30％の葛根芩連湯含薬血清介入下で、細胞増殖活性検査（CCK-8法）によりヒト結腸癌細胞HCT-116/5-FUに対する5-FU感受性への影響を評価し、後続実験の5-FUおよび葛根芩連湯の濃度を決定した。5-エチニル-2′-デオキシウリジン（EDU）染色およびAnnexin V-FITC/ヨウ化プロピジウム（PI）二重染色により、単独5-FU、単独葛根芩連湯、および両者併用時のHCT-116/5-FU細胞の増殖およびアポトーシスレベル変化を検出し、比色法でグルコース消費量、ATPおよび乳酸産生の変化を測定した。タンパク質ウエスタンブロット法で解糖関連タンパク質、CDK16、MYCおよびリン酸化発現を解析した。免疫共沈降（Co-IP）法でCDK16とMYCのタンパク質間相互作用を検討し、シクロヘキシミド（CHX）処理によりCDK16過剰発現がMYCタンパク質の安定性に及ぼす影響を検証した。結果：対照群と比較し、HCT-116細胞は2.5 mg·L^-1 5-FU添加により細胞活性が有意に抑制され、5-FU濃度の上昇に伴い抑制効果が増強した。一方、HCT-116/5-FU細胞は5 mg·L^-1 5-FU添加で有意な抑制を示し（P<0.05）、該当濃度をモデル濃度とした。単独5-FU群と比較し、葛根芩連湯含薬血清5％添加によりHCT-116/5-FU細胞活性が有意に抑制され（P<0.05）、血清濃度上昇に伴い抑制効果が増加し、5％を採用した。対照群と比較し、5-FU群、葛根芩連湯群および5-FU＋葛根芩連湯群で細胞増殖能が著明に低下し（P<0.05）、アポトーシス率も有意に上昇した（P<0.01）。さらに5-FU群および葛根芩連湯群に対し、5-FU＋葛根芩連湯群で細胞増殖抑制がより顕著であり（P<0.01）、グルコース消費、ATP産生および乳酸産生の低下も大きかった（P<0.01）。また、対照群、5-FU群および葛根芩連湯群と比較して、5-FU＋葛根芩連湯群でMYCおよびそのリン酸化レベルの抑制効果が強く（P<0.01）、解糖関連酵素であるヘキソキナーゼ2（HK2）、3-ホスホイノシチド依存性キナーゼ1（PDK1）、乳酸脱水素酵素A（LDHA）、M2型ピルビン酸キナーゼ（PKM2）の抑制も有意に増加した（P<0.01）。5-FU群と比較し、5-FU＋葛根芩連湯群はCDK16の発現が抑制され（P<0.01）、MYCおよびそのリン酸化タンパクの発現が著しく減少した（P<0.01）。さらに、5-FU群と比較し、5-FU＋葛根芩連湯群でMYCタンパク質の安定性は時間経過とともに有意に低下したが（P<0.05）、CDK16の過剰発現により回復した（P<0.05）。結論：葛根芩連湯はHCT-116/5-FU細胞の5-FU感受性を著しく増強し、そのメカニズムはCDK16を抑制し、MYCを介した解糖を低減することと考えられる。

結腸直腸癌;5-フルオロウラシル（5-FU）耐性;MYC;解糖;細胞周期依存性キナーゼ16（CDK16）