目的は銅死/酸化ストレス経路を切り口に、高脂肪食を与えた自然老化マウスの肝臓脂質沈着に対する両儀膏の影響およびその機序を探ることである。方法は10週齢の雄性C57BL/6マウス80匹を適応飼育した後、30匹を無作為に12ヶ月齢対照群（12MCON群）、15ヶ月齢対照群（15MCON群）、15ヶ月齢高脂肪群（15MHFD群）に各10匹ずつ分けた。各群は普通の飼料を継続して与え、15MHFD群は12ヶ月齢時に高脂肪飼料を開始し、各群は対応する時間点で採材した。残りの50匹は無作為に20ヶ月齢対照群（20MCON群）、モデル群、両儀膏の低・中・高用量群（各2.91、5.82、11.64 g·kg⁻¹·d⁻¹）に分けた。20MCON群は引き続き普通飼料を与え、他群は15ヶ月齢時に高脂肪飼料を与え、18ヶ月齢時にそれぞれ対応する用量の両儀膏を経口投与した。20MCON群およびモデル群には同容量の生理食塩水を経口投与し、連続8週間（マウス20ヶ月齢）後に採材した。試薬キットにより各群マウス肝組織内のトリグリセリド（TG）レベルを測定し、ヘマトキシリン・エオジン（HE）染色および油紅O染色で肝組織構造および脂質沈着の変化を観察した。酵素免疫測定法（ELISA）により肝臓内活性酸素（ROS）を検出し、比色法でCu²⁺、スーパーオキシドジスムターゼ（SOD）、マロンジアルデヒド（MDA）含量を測定した。リアルタイムPCRおよびWes全自動タンパク発現解析システムにより銅死および酸化ストレス経路関連遺伝子のmRNAおよびタンパク発現を解析した。結果は12MCON群と比較し15MCON群では肝臓TG、Cu²⁺、ROS、MDA含量が有意に上昇し（P<0.01）、SOD活性は有意に低下し（P<0.01）、肝細胞は腫脹し配列は乱れていた。鉄酸化還元蛋白1（FDX1）、脱水素脂肪酰転移酵素（DLAT）、熱ショック蛋白（HSP）70、ジヒドロリポアミド脱水素酵素（DLD）、ピルビン酸脱水素酵素E1サブユニット-β（PDHB）、核因子E2関連因子2（Nrf2）、ペルオキシソーム増殖物活性化受容体γ（PPARγ）のmRNAおよびタンパクレベルは有意に上昇した（P<0.05、P<0.01）。15MCON群と比較し、15MHFD群および20MCON群では肝臓TG、Cu²⁺、ROS、MDA含量が有意に上昇し（P<0.01）、SOD活性は有意に低下し（P<0.01）、肝細胞の腫脹および配列乱れは増悪し、15MHFD群では脂肪滴数が増加し軽微な空胞化を伴ったが20MCON群では明らかな脂質沈着は認められなかった。FDX1、DLAT、HSP70、DLD、PDHB、Nrf2、PPARγのmRNAおよびタンパク発現は有意に上昇した（P<0.05、P<0.01）。20MCON群と比較しモデル群では肝臓TG、Cu²⁺、ROS、MDA含量が有意に上昇し（P<0.01）、SOD活性は有意に低下し（P<0.01）、肝臓に重度の脂肪変性が出現し、上述の指標のmRNAおよびタンパク発現は有意に上昇し（P<0.05、P<0.01）、投与後にはこれらの指標はいずれも有意に矯正された。結論：両儀膏は銅死/酸化ストレス経路を介して高脂肪食自然老化マウスの肝臓脂質沈着に介入し得る。

両儀膏; 銅死; 酸化ストレス; 自然老化; 肝臓脂質沈着