本研究は、晋陽定痛膏が一過性受容体電位イオンチャネル（TRPs）を阻害することで、膝関節変形性関節症（KOA）ラットの末梢過敏症および滑膜線維症を改善する作用機序を解析することを目的とした。超高性能液体クロマトグラフィーと電気噴霧イオン化源を用いたタンデム質量分析法（UPLC-ESI-QTRAP MS/MS）技術により、晋陽定痛膏の経皮吸収液中の有効成分を同定した。単ヨウ素酢酸の関節腔内注射によりKOAラットモデルを作成し、ラットを無処置対照群、KOA群、複方南星鎮痛膏群および晋陽定痛膏群に無作為に分け、各群8匹ずつとした。複方南星鎮痛膏群および晋陽定痛膏群には外用治療を行い、中断期間終了後に各群ラットの冷刺激痛閾値および機械刺激痛閾値を測定し、膝関節の横径を計測した。酵素免疫測定法（ELISA）により、血清中の炎症因子インターロイキン-1β（IL-1β）、腫瘍壊死因子-α（TNF-α）、神経成長因子（NGF）、およびカルシトニン遺伝子関連ペプチド（CGRP）の含有量を測定した。ウェスタンブロット法により滑膜組織中のTRPA1、TRPM8、TRPV1、TRPV4、トランスフォーミング成長因子-β（TGF-β）、血管内皮増殖因子（VEGF）タンパク質の発現レベルを検出した。ヘマトキシリン・エオジン（HE）、マッソン（Masson）、およびシリウスレッド染色により滑膜組織の病理変化を観察し、多重免疫蛍光法でⅠ型コラーゲンとα-SMAの発現を検出した。結果としてUPLC-MS/MSにより、酚酸類、フラボノイド、キノン類、アルカロイド、テルペン類、リグナン類、クマリンなど35種の活性成分が晋陽定痛膏の経皮吸収液中に同定され、その中にはベルベリン、シャクヤク配糖体、フェルラ酸、カフェ酸などが含まれ、明確な抗炎症、鎮痛および抗線維化作用を有していた。対照群と比較して、KOA群ラットの冷刺激および機械刺激の痛閾値は著明に低下し（P<0.01）、晋陽定痛膏群は14日および28日の介入後に痛閾値がKOA群に比べ有意に上昇した（P<0.01）。複方南星鎮痛膏群との比較では統計学的有意差は認められなかった。さらに晋陽定痛膏はKOAラット血清中のIL-1β、TNF-α、NGF、CGRP含有量を減少させ（P<0.01）、滑膜組織中のTRPA1、TRPM8、TRPV1、TRPV4、TGF-β、VEGFタンパク質発現レベルを低下させ（P<0.01）、滑膜の病理損傷を改善し、Ⅰ型コラーゲンおよびα-SMAの蛍光強度の有意な上昇を抑制した（P<0.01）。結論として、晋陽定痛膏はTRPsイオンチャネルおよび関連する炎症・線維化因子の発現を抑制することで、KOAラットの末梢過敏症と滑膜線維症を改善できると考えられる。

晋陽定痛膏;膝関節変形性関節症;一過性受容体電位（TRPs）イオンチャネル;末梢過敏症;滑膜線維症;滑膜炎