目的は、糖尿病性卵巣機能障害マウスにおける炎症損傷および微小血管新生障害のメカニズムと三甲散加減方の介入効果を探求することである。高糖高脂飼料とストレプトゾトシン（STZ）を用いて糖尿病モデルマウスを作製し、膣スメア検査で発情周期異常を確認後、糖尿病性卵巣機能障害モデルマウスを確立した。モデル成功40匹のマウスをモデル群、三甲散加減方高用量群（17.94 g·kg^-1）、中用量群（8.97 g·kg^-1）、低用量群（4.49 g·kg^-1）、西薬群（メトホルミン，0.2 g·kg^-1）に無作為に分けた。同一バッチから選抜した8匹を正常群とした。28日間連続経口投与後、空腹時血糖（FBG）を測定し、酵素免疫測定法（ELISA）で血清抑制素B（INHB）、エストラジオール（E2）、卵胞刺激ホルモン（FSH）、抗ミュラー管ホルモン（AMH）、黄体形成ホルモン（LH）、腫瘍壊死因子-α（TNF-α）、インターロイキン-6（IL-6）、単球走化性タンパク質-1（MCP-1）を測定した。ヘマトキシリン・エオジン（HE）およびマッソン染色で卵巣組織の病理形態変化と卵胞数を観察し、透過型電子顕微鏡で卵巣組織の超微細構造を観察した。局所末端標識法（TUNEL）で卵巣顆粒細胞のアポトーシスを検出し、免疫蛍光法で卵巣微小血管数を評価した。免疫組織化学およびウェスタンブロット法で血管内皮増殖因子（VEGF）、血小板由来成長因子（PDGF）、クローディン-5（Claudin-5）、閉鎖結合タンパク質-1（ZO-1）、リボソームタンパク質S6キナーゼ1（p70S6K1）、骨髄分化因子88（MyD88）、核転写因子-κB（NF-κB）のタンパク質発現を検出した。正常群と比較し、モデル群はFBG、FSH、LH、TNF-α、IL-6、MCP-1レベルが有意に上昇（P<0.01）、E2、AMH、INHBレベルが有意に低下（P<0.01）した。卵巣内の卵胞発育不良やコラーゲン線維面積の著明な増加（P<0.01）、組織の超微細構造損傷、微小血管数の著明な減少（P<0.01）、TUNEL陽性率の有意な増加（P<0.01）が認められた。VEGF、PDGF、Claudin-5、ZO-1、p70S6K1のタンパク質発現は有意に低下（P<0.01）し、MyD88およびNF-κB発現は有意に上昇（P<0.01）した。モデル群と比較して、三甲散加減方の高・中用量群およびメトホルミン群はFBG、FSH、LH、TNF-α、IL-6、MCP-1レベルの有意な低下（P<0.01）、E2、AMH、INHBレベルの有意な上昇（P<0.01）が認められた。卵胞は良好に発育し、コラーゲン線維面積の顕著な減少（P<0.01）、組織の超微細構造の改善、微小血管数の顕著な増加（P<0.01）、TUNEL陽性率の有意な低下（P<0.01）が見られた。VEGF、PDGF、Claudin-5、ZO-1、p70S6K1のタンパク質発現は有意に増加（P<0.01）、MyD88およびNF-κBのタンパク質発現は有意に低下（P<0.01）した。三甲散加減方低用量群はこれら指標の改善に統計学的有意差がなかった。結論として、三甲散加減方は血糖低下、ホルモン調節、微小血管再生促進、MyD88/NF-κBシグナル経路調節などの多重機構により糖尿病性卵巣機能障害マウスの卵巣予備能を改善できる。

三甲散加減方; 2型糖尿病; 卵巣機能障害; 微小血管新生; 炎症