目的は、ホスファチジルイノシトール3キナーゼ（PI3K）/プロテインキナーゼB（Akt）/ラパマイシン標的タンパク質（mTOR）シグナル経路を基盤として、助卵湯がヒト卵巣顆粒細胞（KGN）の過剰なオートファジーを抑制し、早発性卵巣機能不全（POI）を改善する作用メカニズムを探求することである。方法：細胞増殖および活性検査（CCK-8法）により、シクロホスファミドがKGNに作用する最適濃度を決定し、これに基づきさまざまな含量の助卵湯含薬血清がKGN細胞モデルの活性に与える影響を検討した。最適投与濃度を確定後、KGNを対照群（20%空白血清）、モデル群（20%空白血清＋5 μmol·L^-1シクロホスファミド）、助卵湯含薬血清群（20%助卵湯含薬血清＋5 μmol·L^-1シクロホスファミド）、オートファジー抑制剤群（20%空白血清＋5 μmol·L^-1シクロホスファミド＋20 μmol·L^-1塩酸ヒドロキシクロロキン）、オートファジー抑制剤＋助卵湯含薬血清群（20%助卵湯含薬血清＋5 μmol·L^-1シクロホスファミド＋20 μmol·L^-1塩酸ヒドロキシクロロキン）、補佳楽群（20%補佳楽含薬血清＋5 μmol·L^-1シクロホスファミド）に分け、48時間培養後にフローサイトメトリーで各群KGNの細胞アポトーシス率を検出し、ウェスタンブロット法でPI3K、p-AktおよびAkt、リン酸化（p）-mTORおよびmTORシグナル経路蛋白の発現状況、Beclin1、ATG5、および微小管関連タンパク質1軽鎖3（LC3）などのオートファジー関連蛋白の発現状況を調べた。単一ダンサルサルファミン（MDC）染色により各群のオートファジー程度を検出した。結果：5 μmol·L^-1シクロホスファミドを用いた48時間のKGN細胞処理によりKGNのPOI細胞モデルが構築され、KGN細胞増殖が明らかに抑制され、シクロホスファミドによる細胞増殖抑制効果は濃度依存性であった。20%および30%の助卵湯含薬血清は細胞増殖を促進し、シクロホスファミドの抑制効果を緩和し、両濃度に有意差はなかった。対照群と比較してモデル群の細胞アポトーシス率は有意に上昇（P<0.01）、PI3K、p-Aktおよびp-mTOR蛋白発現レベルは有意に低下（P<0.01）、オートファジー関連蛋白のBeclin1、LC3およびATG5蛋白発現レベルは有意に上昇（P<0.01）した。一方、AKTおよびmTOR蛋白発現レベルは有意な変化を示さず、MDCオートファジー蛍光強度は有意に上昇（P<0.01）した。モデル群と比較して、空白群、モデル群、助卵湯含薬血清群、オートファジー抑制剤群、オートファジー抑制剤＋助卵湯含薬血清群および補佳楽群の細胞アポトーシス率は全て有意に低下（P<0.05、P<0.01）、オートファジー抑制剤＋助卵湯含薬血清群の効果が最も顕著であった。PI3K、p-Aktおよびp-mTOR蛋白発現レベルは有意に上昇（P<0.05、P<0.01）、オートファジー抑制剤＋助卵湯含薬血清群の上昇が最も顕著（P<0.01）であった。オートファジー関連蛋白Beclin1およびATG5の発現レベルは有意に低下（P<0.05、P<0.01）し、助卵湯含薬血清群および補佳楽群ではLC3蛋白発現が有意に低下（P<0.05、P<0.01）した。オートファジー抑制剤群およびオートファジー抑制剤＋助卵湯含薬血清群ではLC3蛋白発現は低下したが、統計的有意差は認められなかった。結論：助卵湯はPI3K/Akt/mTOR経路を活性化することにより細胞の過剰なオートファジーを抑制し、シクロホスファミドがKGN細胞モデルにもたらす損傷を逆転させ、POIを改善すると考えられる。

助卵湯;早発性卵巣機能不全;シクロホスファミド;オートファジー