目的は補腎通督方の抗炎症作用における薬効物質基盤及び作用機序を探求することである。方法として超高性能液体クロマトグラフィー-リニアイオントラップ-静電場オービトラップ高分解能質量分析（UPLC-LTQ-Orbitrap-MS）技術を用いて、補腎通督方の化学成分及び体内吸収成分を系統的に同定した。ネットワーク薬理学を活用して血中の活性成分と潜在的標的をスクリーニングし、コア標的のPPIネットワークを構築、共通標的の富化解析を行い、分子ドッキングで重要成分と標的の結合能を検証した。Tg（mpx：GFP）トランスジェニックゼブラフィッシュを用いて炎症モデルを構築し、受精後3日（3 dpf）の幼若魚を無作為にコントロール群、モデル群、陽性薬物酢酸デキサメタゾン群（75 μmol·L^-1）、及び補腎通督方の低・中・高濃度群（500、1000、2000 mg·L^-1）に分け、蛍光顕微鏡で卵黄嚢部位の好中球分布及び数を観察した。リアルタイムPCRを用いてトール様受容体4（TLR4）/骨髄分化因子88（MyD88）/核転写因子-κB（NF-κB）シグナル経路の重要遺伝子及び炎症因子インターロイキン（IL）-1β、IL-6、腫瘍壊死因子-α（TNF-α）のmRNA発現レベルを測定した。結果として補腎通督方から120の化学成分を同定し、血清薬物化学法により26の原型成分を確認した。ネットワーク薬理学により関節リウマチ（RA）と血中成分に共通の227の標的を絞り込み、その作用機序は擬馬錢子アルカロイド、サフランアルカロイド、マスタードアルカロイド、地黄配糖体、シナモンアルデヒド及びメチルエフェドリンがタンパク質キナーゼB1（Akt1）、シグナル伝達及び転写活性化因子3（STAT3）、腫瘍壊死因子（TNF）、TLR4、MAPK14及びホスファチジルイノシトール-4,5-ビスリン酸3キナーゼ触媒サブユニットα（PIK3CA）などのコア標的に作用し、TLR4及びNF-κBなど複数のシグナル経路を調節して抗炎症作用を発揮すると推測された。ゼブラフィッシュによる体内検証の結果、補腎通督方の最大耐受濃度は2000 mg·L^-1であった。コントロール群と比較してモデル群は卵黄嚢部位の好中球浸潤数が有意に増加（p<0.01）、TLR4、MyD88、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1βのmRNA発現量が有意に増加（p<0.05、p<0.01）した。モデル群と比較して補腎通督方の中・高濃度群及び酢酸デキサメタゾン群は好中球数を有意に減少させ（p<0.05、p<0.01）、低濃度群は統計学的に有意な差はなかった。TLR4、MyD88、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1βのmRNA発現量は有意にダウンレギュレーションされた（p<0.05、p<0.01）。結論として補腎通督方の薬効物質基盤を初めて同定し、本処方がTLR4/MyD88/NF-κBシグナル経路を介して抗炎症作用を発揮することを明確にし、今後の臨床応用のための科学的実験的根拠を提供した。

補腎通督方; ゼブラフィッシュ炎症モデル; トール様受容体4（TLR4）; 骨髄分化因子88（MyD88）; 核転写因子-κB（NF-κB）