本研究の目的は、失笑散が核因子E₂関連因子2（Nrf2）/溶質キャリアファミリー7A11（SLC7A11）/グルタチオンペルオキシダーゼ4（GPX4）経路を調節することにより、脳虚血再灌流傷害（CIRI）ラットの神経機能を改善し、鉄依存性細胞死を抑制できるかを検討することである。方法として、線栓法（ラットの頸部血管分離、外頸動脈枝の結紮、総頸動脈および内頸動脈の遮断、外頸動脈口にナイロン製線栓を挿入し、中大脳動脈の起始部で血流を遮断し脳虚血を誘発；虚血60〜120分後に線栓を抜去し血流を再開、外頸動脈切開部を結紮）によりCIRIラットモデルを確立した。ラットはCIRI群、失笑散低用量（-L、経胃投与1.26 g/kg）、失笑散高用量（-H、経胃投与2.52 g/kg）、塩酸ドネペジル（DON、経胃投与0.45 mg/kg）、失笑散-H+Nrf2阻害剤（ML385）（経胃投与2.52 g/kg失笑散＋腹腔内注射30 mg/kg ML385）、及び頸動脈分離後に切開部を縫合した対照群（Control）に分けた。神経機能障害は修正版Garcia JHスコアにより評価し、MRIシステムにより脳梗塞体積比を測定、HE染色およびプルシアンブルー染色により虚血性半暗帯の神経損傷および鉄の蓄積を観察、透過電子顕微鏡で虚血半暗帯神経細胞ミトコンドリアの超微細構造を観察した。試薬キットで虚血半暗帯の二価鉄イオン（Fe²⁺）、マロンジアルデヒド（MDA）、還元型グルタチオン（GSH）含量、活性酸素（ROS）活性を測定し、ボリピ（BODIPY）（581/591）C11蛍光プローブで細胞内脂質過酸化物含量を検出した。ウェスタンブロット法で虚血半暗帯におけるNrf2、SLC7A11、GPX4、トランスフェリン受容体1（TFRC）、フェリチン重鎖（FHC）、フェリチン軽鎖（FLC）タンパク質発現レベルを測定した。Control群と比較してCIRI群ラットの虚血半暗帯に神経損傷、神経細胞数減少、核小体萎縮、間質浮腫、明らかな鉄の蓄積、神経細胞ミトコンドリアの萎縮・破裂、ミトコンドリアクリステの萎縮、膜密度増加、脳梗塞体積比、Fe²⁺、MDA含量、ROS活性、脂質過酸化物含量が上昇し、修正版Garcia JHスコア、GSH含量、Nrf2、SLC7A11、GPX4、FHC、FLCタンパク質発現レベルは低下し、TFRCタンパク質発現レベルは上昇した（P<0.05）。CIRI群と比較し、失笑散-L群、失笑散-H群及びDON群は虚血半暗帯の神経細胞損傷が軽減し、鉄の蓄積が減少し、神経細胞ミトコンドリア損傷が改善し、脳梗塞体積比、Fe²⁺、MDA含量、ROS活性、脂質過酸化物含量が低下し、修正版Garcia JHスコア、GSH含量、Nrf2、SLC7A11、GPX4、FHC、FLCタンパク質発現レベルが上昇し、TFRCタンパク質発現レベルが低下した（P<0.05）。失笑散-H群は失笑散-L群より各指標の変化が大きく（P<0.05）、失笑散-H+ML385群は失笑散-H群と指標の変化傾向が逆転した（P<0.05）。結論として、失笑散はNrf2/SLC7A11/GPX4経路を活性化し、鉄依存性細胞死を抑制し、CIRIラットの神経機能を回復する可能性がある。

失笑散; 脳虚血再灌流傷害; 核因子E₂関連因子2（Nrf2）/溶質キャリアファミリー7A11（SLC7A11）/グルタチオンペルオキシダーゼ4（GPX4）経路; 鉄依存性細胞死