목적은 희귀성 뇌졸중 환자에 대한 HXRLF의 효과와 그 작용 메커니즘을 조사하는 것이다. 방법은 수컷 C57BL/6 마우스를 가짜 수술(SHAM), 뇌허혈모형(MCAO), 낮과 밤의 리듬 불규칙 병행 뇌허혈모형(ECD-MCAO), HXRLF 저, 중, 고용량 그룹(HXRLF-L, M, H), 양성약물 NBP 그룹(0.23 mL/day)으로 무작위로 나누고, SHAM 그룹은 혈관을 분리시켜 노출만 하고, 선취의 면도로 걸지 않으며, 나머지 각 그룹은 마우스 뇌 중동맥 폐색모델을 제작하고, ECD-MCAO 그룹과 HXRLF 각용량 그룹, NBP 그룹은 환경생물 리듬 불규칙(ECD)모델을 제작하며, SHAM 그룹과 MCAO 그룹, ECD-MCAO 그룹의 마우스에게는 등량대의 대두유를 피하며, 나머지 각 그룹에게는 대응하는 약물을 피하고, 각 그룹에 일주일간 연속 투약해 채취한다. mNSS 점수평가로 HXRLF가 IS 이후 신경기능 결함을 복원시키는 효과를 평가하고, Hematoxylin-eosin (HE) 염색평가로 HXRLF가 IS 이후 뇌조직병리학적 손상에 미치는 영향을 평가한다. 다음으로 TTC 염색과 뇌혈류주입 상태평가로 HXRLF가 IS 이후 뇌조직 손상을 복원하는 효과를 평가한다. 이비신스카를민 염색과 전사 전자현미경으로 HXRLF가 IS 이후 혈브림장벽 투과성 손상을 개선하는 효과를 평가한다. 면역플로레센트 (IF) 염색을 이용하여 뇌조직 내 혈관성 혈友병인자(vWF), 뇌 및 근육 아로마틴수용체핵전사인자단백질-1유전자(Bmal1) 및 봉막단백질(Occludin) 발현정도를 관측한다. Western blot 검사를 통해 Bmal1, Occludin, 세지연결단백질(Claudin-5) 및 혈관내피성장인자(VEGF), 혈관형성인(trim Ang)의 단백질 발현정도를 검사하고 관련분석을 한다. 결과는 SHAM 그룹과 비교할 때, MCAO 그룹에서 신경기능 결함, 뇌조직병리학적 손상, BBB유출이 현저히 증가하고, 두개 혈류주 입이 현저히 감소하며, 뇌조직 내 Bmal1, vWF, VEGFA, Ang 발현이 현저히 증가하고, Occludin, Claudin-5 발현이 현저히 감소한다. MCAO 그룹과 비교할 때, ECD-MCAO 그룹에서 신경기능 결함, 뇌조직병리학적 손상, BBB유출이 현저히 증가하고, 뇌조직 내 Bmal1, vWF, VEGFA, Ang, Occludin, Claudin-5 발현이 현저히 감소한다. ECD-MCAO 그룹과 비교할 때, HXRLF 각용량 그룹은 신경기능 결함, 뇌조직병리학적 손상, BBB유출이 현저히 개선되고, 두개 혈류주입이 현저히 증가하며, 뇌조직 내 Bmal1, vWF, VEGFA, Ang, Occludin, Claudin-5의 발현수준이 현저히 증가한다. 결론 HXRLF는 생체 시계단백질 Bmal1를 조절하고, VEGFA, Ang, Occludin, Claudin-5 발현을 촉진시켜, 희귀성 뇌졸중 후 혈미장벽 손상을 개선한다.

희귀성 뇌졸중;낮과 밤의 리듬불규칙;혈미장벽;HXRLF