목적: 당귀(当归)는 널리 사용되는 주요 약식용 원료로서 시장에서 잦은 혼입 문제가 발생하여 제제의 임상 효능에 심각한 영향을 미치고 있다. 현재 혼입물의 정성적 식별 기술은 상당히 성숙했으나, 가공품 내 혼입물의 정량 검출 방법은 아직 미비하다. 본 연구는 당귀 및 주요 근연 혼입품인 ‘토당귀’(조선당귀)를 예로 들어 정량 검출 연구를 수행하고자 하며, 당귀 및 그 가공품의 약초 분자 정량 검출 방법(Herb-Q)을 확립하여 당귀 약재 및 관련 건강 제품의 정량 검출 기술 구축에 모범을 제시하고자 한다. 방법: 엽록체 게놈 전체 서열을 기반으로 당귀 및 조선당귀의 특이 단일염기다형성(SNP) 위치를 선별하였다. 당귀 특이 위치를 선택하여 서로 다른 혼입 비율의 혼합 약재 분말로 정량 방법론(직선성, 정량 한계, 검출 한계 및 재현성)을 평가하였다. 활성 혈행지통산 3가지 혼입 비율(15%, 25%, 35%)을 이용하여 Herb-Q 방법의 당귀 함유 중성약 정량검출 정확도를 검증하였다. 결과: 당귀 속 엽록체 게놈 123개 서열을 비교한 결과, 종내 보존성, 종간 특이성 및 초인산염 고처리량 시퀀싱 요건을 충족하는 원칙에 근거해 엽록체 게놈 서열 NC_042826.1의 9674위치(A/G)와 NC_029393.1의 38592위치(T/C)를 각각 당귀 및 조선당귀 전용 특성 분자 판별 위치로 확정하였다. 당귀 전용 특성 위치 9674위치(A/G)를 선택하여 구축한 Herb-Q 방법선형 관계의 R²값은 0.9974(R²>0.99)로 선형성이 우수하였다. 정량 한계 및 검출 한계는 모두 2.0%이며, 재현성도 우수하였다(상대 표준 편차(RSD)<2.0%). Herb-Q 방법 기반으로 구축된 정량 시스템을 이용해 활성 혈행지통산 내 조선당귀 혼입량을 검출한 결과, 3회 분자 정량 반복 평균 편차는 1.3%였다. 결론: 본 연구는 당귀 엽록체 게놈 서열 NC_042826.1의 9674위치(A/G)를 기반으로 구축된 Herb-Q 정량검출 방법이 당귀 및 ‘토당귀’, 그리고 이들의 가공품에 대해 우수한 적용성, 객관성 및 정확성을 보유하고 있음을 나타내며, 시판되는 당귀 유래 제품(한약 제제, 식이 영양 보충제 및 건강기능식품 등)의 정량 검출 기술 지원에 기여할 수 있다.

약초 분자 정량 검출 방법(Herb-Q); 당귀; 혼입; 초인산염 시퀀싱; 정량 연구