목적: 황기 다당체(APS)가 Toll 유사 수용체 4(TLR4)/핵 전사 인자-κB(NF-κB) 신호 경로 조절을 통해 산소-포도당 결핍/재산소화(OGD/R) 모델에서 BV2 미세아교세포의 편극화에 미치는 영향을 탐구한다. 방법: BV2 미세아교세포 OGD/R 손상 모델을 구축하여 공변량군, OGD/R 군, APS 군(0.4 g·L^-1 APS)으로 나누고, 지질다당류(LPS) 유도 신경염증 손상에 APS 개입을 하여 공변량군, LPS 군(1 mg·L^-1 LPS), APS 군(0.4 g·L^-1 APS+1 mg·L^-1 LPS)으로 나누었다. 세포 증식 및 활성도 검출(CCK-8)법으로 세포 활력을 측정했고, 역상 현미경으로 세포 형태를 관찰했으며, 그리스 질산염 검출법(Griess)으로 세포 상층액 내 일산화질소(NO) 함량을 측정했다. 효소결합면역흡착검사법(ELISA)으로 종양괴사인자-α(TNF-α), 백혈구 중간엽(IL)-6, IL-10, IL-4 분비 수준을 측정했으며, 면역형광법(IF)으로 칼슘 결합 접합 단백질 분자-1/유도형 일산화질소 합성효소(Iba-1⁺/iNOS⁺) 및 칼슘 결합 접합 단백질 분자-1/아르기나제 1(Iba-1⁺/Arg1⁺)의 이중 양성률과 핵 전사 인자-κB p65(NF-κB p65)의 핵 내 이동률을 검출했다. 웨스턴블롯법(Western blot)으로 Iba-1, iNOS, Arg1, TLR4, NF-κB p65 단백질 발현 수준을 측정했다. 결과: OGD/R 손상 모델에서 대조군과 비교했을 때, OGD/R 군의 BV2 미세아교세포가 활성화되고 아메바 형태 변화를 보였으며, NO, TNF-α, IL-6 분비 수준이 유의하게 증가하였다(P<0.01). Iba-1⁺/iNOS⁺ 이중 양성 발현율과 Iba-1, iNOS 단백질 발현이 유의하게 증가했으며(P<0.01), NF-κB p65 핵 내 이동률, TLR4, NF-κB p65 단백질 발현도 유의하게 상승하였다(P<0.01). 반면 IL-10과 IL-4 함량은 유의하게 감소했으며(P<0.01), Iba-1⁺/Arg1⁺ 이중 양성 발현율과 Arg1 단백질 발현은 유의하게 감소했다(P<0.01). OGD/R과 비교해 APS 군(0.4 g·L^-1)은 세포 활성화가 감소하였고, NO, TNF-α, IL-6 분비 수준이 유의하게 낮아졌으며(P<0.01), Iba-1⁺/iNOS⁺ 이중 양성 발현율과 Iba-1, iNOS 상대 단백질 발현이 유의하게 감소하였다(P<0.01). NF-κB p65 핵 내 이동률과 TLR4, NF-κB p65 단백질 발현이 유의하게 감소했고(P<0.01), IL-10과 IL-4 함량이 유의하게 증가했으며(P<0.01), Iba-1⁺/Arg1⁺ 이중 양성 발현율과 Arg1 단백질 발현이 유의하게 증가했다(P<0.01). LPS 유도 신경염증 모델에서 대조군과 비교했을 때, LPS 군은 세포 활성화 증가, NO, TNF-α, IL-6 함량, Iba-1⁺/iNOS⁺ 이중 양성 발현율, NF-κB p65 핵 내 이동률 및 Iba-1, iNOS, TLR4, NF-κB p65 단백질 발현이 유의하게 증가했다(P<0.01). IL-10과 IL-4 수준, Iba-1⁺/Arg1⁺ 이중 양성 발현율, Arg1 단백질 발현은 유의하게 감소했다(P<0.01). LPS 군과 비교했을 때, APS 군은 세포 활성화가 감소했고, NO, TNF-α, IL-6 함량, Iba-1⁺/iNOS⁺ 이중 양성 발현율, NF-κB p65 핵 내 이동률, Iba-1, iNOS, TLR4, NF-κB p65 단백질 발현이 유의하게 감소했으며(P<0.01), IL-10과 IL-4 수준, Iba-1⁺/Arg1⁺ 이중 양성 발현율, Arg1 단백질 발현이 유의하게 증가했다(P<0.01). 결론: APS는 TLR4/NF-κB 신호 경로 활성화를 억제하여 미세아교세포 활성을 감소시키고 M2형 편극화를 촉진하여 OGD/R 후 발생하는 신경염증 반응을 완화할 수 있다.

황기 다당체(APS); 산소-포도당 결핍/재산소화 모델; BV2 미세아교세포; 지질다당류(LPS); Toll 유사 수용체 4(TLR4)/핵 전사 인자-κB(NF-κB) 신호 경로