본 연구의 목적은 당뇨병으로 인한 난소 기능 장애 쥐의 염증 손상 및 미세혈관 생성 장애 기전과 삼가산 가감방의 중재 효과를 탐구하는 것이다. 고당·고지방 사료와 스트렙토조토신(STZ)을 이용해 당뇨병 모델 쥐를 유도하였고, 질 도말 검사를 통해 발정 주기 이상이 확인된 후 당뇨병성 난소 기능 장애 모델을 확립하였다. 성공적으로 모델을 구축한 40마리 쥐를 모델군, 삼가산 가감방 고용량군(17.94 g·kg^-1), 중용량군(8.97 g·kg^-1), 저용량군(4.49 g·kg^-1), 서약군(메트포르민, 0.2 g·kg^-1)으로 무작위 분류하였다. 동일 배치에서 8마리의 쥐를 정상군으로 선정하였다. 28일간 연속 위관 투여 후 공복 혈당(FBG)을 측정하였으며, 효소면역흡착법(ELISA)을 통해 혈청 억제소 B(INHB), 에스트라디올(E2), 난포자극호르몬(FSH), 항뮐러호르몬(AMH), 황체형성호르몬(LH), 종양괴사인자-α(TNF-α), 인터루킨-6(IL-6), 단핵구 화학주성 인자-1(MCP-1) 농도를 측정하였다. 헤마톡실린-에오신(HE) 및 마송 염색으로 난소 조직의 병리형태 변화와 난포 수를 관찰하였고, 투과전자현미경으로 조직의 초미세구조를 분석하였다. 현장말단표지법(TUNEL)으로 난소 과립세포의 세포자멸사를 검출하였으며, 면역형광법으로 미세혈관 수를 측정하였다. 면역조직화학 및 웨스턴 블롯법으로 혈관내피성장인자(VEGF), 혈소판유래 성장인자(PDGF), 긴밀접합단백질-5(Claudin-5), 폐쇄조임띠 단백질-1(ZO-1), 리보솜단백질 S6 키네이스1(p70S6K1), 수질성분화인자88(MyD88), 핵전사인자-κB(NF-κB) 단백질 발현을 검출하였다. 정상군과 비교 시 모델군은 FBG, FSH, LH, TNF-α, IL-6, MCP-1 수준이 유의하게 상승(P<0.01)하였고, E2, AMH, INHB 수준이 유의하게 감소(P<0.01)하였다. 난소 내 난포 발달 부진 및 콜라겐 섬유 면적이 크게 증가(P<0.01)하였으며, 조직 초미세구조 손상, 미세혈관 수 감소(P<0.01), TUNEL 양성률 증가(P<0.01)를 보였다. VEGF, PDGF, Claudin-5, ZO-1, p70S6K1 단백질 발현이 유의하게 감소(P<0.01)하였고, MyD88 및 NF-κB 발현은 유의하게 증가(P<0.01)하였다. 모델군과 비교 시 삼가산 가감방 고·중용량군 및 메트포르민군은 FBG, FSH, LH, TNF-α, IL-6, MCP-1 수준이 유의하게 감소(P<0.01)하였고, E2, AMH, INHB 수준이 유의하게 증가(P<0.01)하였다. 난소 내 난포 발달 양호, 콜라겐 섬유 면적 유의하게 감소(P<0.01), 조직 초미세구조 개선, 미세혈관 수 유의하게 증가(P<0.01), TUNEL 양성률 유의하게 감소(P<0.01)를 나타내었다. VEGF, PDGF, Claudin-5, ZO-1, p70S6K1 단백질 발현이 유의하게 증가(P<0.01)하였고, MyD88, NF-κB 단백질 발현은 유의하게 감소(P<0.01)하였다. 삼가산 가감방 저용량군은 상기 지표에 대한 개선이 통계학적으로 유의하지 않았다. 결론적으로 삼가산 가감방은 혈당 감소, 호르몬 수치 조절, 미세혈관 재생 촉진 및 MyD88/NF-κB 신호 경로 조절 등 여러 기전을 통해 당뇨병 난소 기능 장애 쥐의 난소 예비능을 개선할 수 있다.

삼가산 가감방; 제2형 당뇨병; 난소 기능 장애; 미세혈관 생성; 염증