본 연구의 목적은 Qin Lian Hong Qu Tang이 비알코올성 지방간염(NASH)에 미치는 치료 효과 및 기전을 연구하는 것이다. C57BL6 J 마우스를 정상군과 모델군으로 무작위로 나누고 고지방 사료로 12주간 사육하여 모델을 구축하였다. 모델 구축 후, 모델군 마우스를 모델군, Qin Lian Hong Qu Tang의 저·중·고용량군(0.51, 1.02, 2.04 g/kg), 그리고 양성 대조군(메트포르민군)으로 무작위 분류하여 각 그룹당 6마리씩 8주간 약물을 투여하였다. 치료 전후 마우스의 체중 변화를 관찰하였고, 생화학적 방법으로 혈청 총콜레스테롤(TC), 중성지방(TG), 저밀도지단백 콜레스테롤(LDL-C)과 간 내 TC, TG 및 LDL-C 함량을 측정하였다. 헤마톡실린-에오신(HE) 염색과 오일 레드 O 염색을 통해 간 조직 병리 및 지질 축적 상태를 관찰하였다. 유세포분석법, 효소면역측정법(ELISA), 실시간 형광 정량 중합효소 연쇄반응(real-time PCR)을 사용하여 간 마크로파지의 발현 및 표지자 변화를 분석하였으며, 웨스턴 블롯 및 면역형광법을 통해 Qin Lian Hong Qu Tang이 마우스 마크로파지의 편극화에 미치는 잠재적 기전을 조사하였다. 정상군과 비교할 때 모델군은 체중이 증가하였고 혈청 및 간 내 TC, TG, LDL-C 함량이 유의하게 상승하였다(P<0.01). 간 조직학적 관찰에서는 모델군 마우스 간 세포질 내 불균일하게 분포된 원형 지방 방울과 염증 세포의 집합이 확인되었다. 유세포분석 결과 CD86 양성 세포의 비율이 유의하게 증가하고 CD206 양성 세포의 비율은 유의하게 감소하였다(P<0.05). 간 유도성 일산화질소 합성효소(iNOS) 함량과 종양괴사인자-α(TNF-α) mRNA 발현이 유의하게 증가하였으며, 간 내 IL-10 함량과 IL-4 mRNA 발현 수준은 유의하게 감소하였다(P<0.01). 간 내 Toll-like 수용체 4(TLR4), 종양괴사인자 수용체 결합인자 6(TRAF6), 골수 분화 인자 88(MyD88) 단백질 발현이 유의하게 상승하였다(P<0.01). 모델군과 비교 시, Qin Lian Hong Qu Tang의 고·중·저용량군과 메트포르민군은 체중이 감소하고 혈청 및 간 내 TC, TG, LDL-C 함량이 유의하게 감소하였다(P<0.01). 간 조직학적 관찰은 지방 축적이 완화되고 지방 방울과 염증이 현저히 감소했음을 보여주었다. 면역형광 및 유세포분석 결과 Qin Lian Hong Qu Tang의 고·중·저용량군에서 CD86 양성 세포 비율이 유의하게 감소하고 CD206 양성 세포 비율이 유의하게 증가하였다(P<0.05). 간 내 iNOS 함량과 TNF-α mRNA 발현은 유의하게 감소하였으며(P<0.01), IL-10 함량과 IL-4 mRNA 발현 수준은 유의하게 상승하였다(P<0.01). 간 내 TLR4, TRAF6 및 MyD88 단백질 발현은 유의하게 감소하였으며, STAT6 인산화 표현은 현저히 증가하였다(P<0.05, P<0.01). 신호 전달 및 전사 활성화 단백질 6(STAT6) 전체 단백질 발현은 통계적으로 유의한 차이가 없었다. 결론 Qin Lian Hong Qu Tang은 STAT6 및 TLR4 신호 경로를 통해 M1형 대식세포를 M2형으로 편극화함으로써 NASH 마우스의 간 염증을 효과적으로 개선할 수 있다.

Qin Lian Hong Qu Tang; 비알코올성 지방간염 (NASH); 대식세포 편극화; Toll-like 수용체 4 (TLR4); 신호 전달 및 전사 활성화 단백질 6 (STAT6)