중성구-세포외 함정 억제를 통한 Yinqi Sanhuang Jiedu 탄의 항간 섬유화 작용 기전

LI Yanbo ,  

LEI Chao ,  

WU Qingjuan ,  

LYU Wenliang ,  

摘要

목적은 Yinqi Sanhuang Jiedu Tang (YQSH)이 사염화탄소 (CCl₄) 유도 간 섬유증 생쥐 모델에 미치는 치료 효과를 검증하고, 그 효과가 중성구 침윤 및 중성구 세포외 함정 (NETs) 형성 억제와 관련이 있는지 탐구하는 것이다. 방법: 36마리의 C57BL/6J 생쥐를 정상군, 모델군, 양성 약물 실리마린 (SF)군 (55 mg·kg-1·d-1), YQSH 저용량 (YQSH-L)군, 중용량 (YQSH-M)군 및 고용량 (YQSH-H)군 (8.325, 16.65, 33.3 g·kg-1·d-1)으로 무작위 분류하였으며 각 군 당 6마리씩 배정하였다. 정상군을 제외한 나머지 군은 복강 내 CCl₄ 주입으로 간 섬유증을 유도하였다. 모델 성공 후 각 약물 군에 해당 약물을 위관 투여하여 8주간 치료하였다. 조직병리학적 변화를 관찰하기 위해 헤마톡실린-에오신 (HE), 시리우스 레드, 마쏭 (Masson) 염색을 실시하였고, 컬러 도플러 초음파 시스템으로 간 탄성도를 측정하였다. 면역조직화학법 및 실시간 형광 정량 중합효소 연쇄 반응 (Real-time PCR)으로 C-X-C 화학주성인자 리간드 1 (CXCL1), 2 (CXCL2), 5 (CXCL5)의 발현 및 mRNA 수준을 검출하였다. 유세포 분석법으로 중성구 수준을 평가하였으며 면역형광법 (IF)으로 중성구 엘라스타아제 (NE) 및 골수과산화효소 (MPO) 양성 단백질 발현을 비교하였다. 효소면역측정법 (ELISA)으로 MPO, NE, 시트룰린화된 히스톤 H3 (CitH3) 함량을 측정하였다. 결과: 정상군과 비교하여 모델군 생쥐의 간에서는 뚜렷한 염증 세포 침윤 및 콜라겐 침착이 나타났고, 간 탄성 값, CXCL1, CXCL2, CXCL5 발현, 중성구 수준 및 MPO, NE, CitH3 수치가 유의하게 증가하였다 (P<0.05, P<0.01). 모델군과 비교하여 YQSH 치료 후 간 조직의 염증 세포 침윤과 콜라겐 침착이 완화되었고; 간 탄성도는 감소하였다 (P<0.01); CXCL1, CXCL2, CXCL5 단백질 발현과 mRNA 수준은 감소하였다 (P<0.05, P<0.01); 중성구 수준은 하락하였다 (P<0.01); MPO, NE 양성 단백질 발현이 현저히 감소하였다 (P<0.05, P<0.01); MPO, NE, CitH3 수준도 감소하였다 (P<0.05, P<0.01). 결론: YQSH의 항간 섬유화 효과는 화학주성 인자 (CXCL1, CXCL2, CXCL5) 수준 억제, 중성구 침윤 완화 및 NETs 생성을 억제하는 작용과 관련이 있을 수 있다.

关键词

간 섬유화;Yinqi Sanhuang Jiedu 탄;중성구;중성구 세포외 함정;화학주성 인자

阅读全文