목적은 신장보통독방의 항염 작용에 대한 약효 물질 기초 및 작용 기전을 탐구하는 것이다. 방법으로는 초고효율 액체 크로마토그래피-선형 이온 함정-정전장 오르비트랩 고분해능 질량 분석법(UPLC-LTQ-Orbitrap-MS)을 이용해 신장보통독방의 화학 성분과 체내 혈중 성분을 체계적으로 식별하였다. 네트워크 약리학을 활용해 혈중 활성 성분과 잠재 표적을 선별하고 핵심 표적 PPI 네트워크를 구축했으며, 교집합 표적 풍부도 분석과 분자 도킹을 통해 주요 성분-표적 결합 능력을 검증했다. Tg(mpx:GFP) 형질전환 제브라피쉬를 이용해 염증 모델을 구축하고 체내 검증을 진행했다. 수정 후 3일(3 dpf) 된 제브라피쉬 유어를 무작위로 대조군, 모델군, 양성약물 아세트산 덱사메타손군(75 μmol·L^-1) 및 신장보통독방 저·중·고 농도군(500, 1000, 2000 mg·L^-1)으로 나누어 형광현미경 하에 난황낭 부위의 호중구 분포와 수를 관찰했다. 실시간 형광 정량 중합효소 연쇄반응(Real-time PCR)을 사용해 톨 유사 수용체 4(TLR4)/골수 분화 인자 88(MyD88)/핵 전사 인자-κB(NF-κB) 신호 경로의 핵심 유전자 및 염증 인자 인터루킨(IL)-1β, IL-6, 종양 괴사 인자-α(TNF-α)의 mRNA 발현 수준을 측정했다. 결과 신장보통독방에서 120가지 화학 성분을 식별했고 혈청 약물 화학법으로 26가지 원형 성분을 확인했다. 네트워크 약리학으로 류마티스 관절염(RA)과 혈중 성분 간 227개 교집합 표적을 선별했으며, 그 작용 기전은 가시아코인, 사프란알칼로이드, 겨자알칼로이드, 지황 쓴배당체, 계피알데하이드 및 메틸 에페드린이 단백질 키나제 B1(Akt1), 신호 전달 및 전사 활성 인자 3(STAT3), 종양 괴사 인자(TNF), TLR4, MAPK14 및 인산이노시톨-4,5-비스포스페이트 3-키나제 촉매 소단위 α(PIK3CA) 핵심 표적에 작용하여 TLR4 및 NF-κB 등 여러 신호 경로를 조절해 항염 작용을 발휘하는 것으로 추정된다. 제브라피쉬 체내 검증 결과 신장보통독방의 최대 내성 농도는 2,000 mg·L^-1였다. 대조군과 비교했을 때 모델군 제브라피쉬의 난황낭 부위 호중구 침윤 수가 유의하게 증가했으며(p<0.01), TLR4, MyD88, NF-κB, TNF-α, IL-6, IL-1β mRNA 발현량이 현저히 증가했다(p<0.05, p<0.01). 모델군과 비교했을 때 신장보통독방 중·고 농도군 및 아세트산 덱사메타손군은 호중구 수를 유의하게 감소시켰으며(p<0.05, p<0.01), 저농도군은 통계학적으로 유의한 차이가 없었고 TLR4, MyD88, NF-κB, TNF-α, IL-6, IL-1β mRNA 발현량이 현저히 하향 조절되었다(p<0.05, p<0.01). 결론 신장보통독방의 약효 물질 기초를 초기 확인했고, 해당 처방이 TLR4/MyD88/NF-κB 신호 경로를 통해 항염 작용을 발휘함을 명확히 했으며 향후 임상 적용에 대한 과학적 실험 근거를 제공했다.

신장보통독방; 제브라피쉬 염증 모델; 톨 유사 수용체 4 (TLR4); 골수 분화 인자 88 (MyD88); 핵 전사 인자-κB (NF-κB)