목적은 긴 사슬 아실-CoA 합성효소 4(ACSL4)가 매개하는 미토콘드리아 지방산 β-산화를 기반으로 간기울결 쥐의 정자 활력을 향상시키는 서간보신욱린탕의 작용과 기전을 연구하는 것이다. 방법: 40마리의 SD 수컷 쥐를 무작위 숫자표법으로 정상군, 모델군, 서간보신욱린탕 고용량 및 저용량군(26, 13 g·kg^-1), 플루옥세틴군(1.8 mg·kg^-1)으로 나누었다. 투여는 모두 위관 내 투여법을 사용하였다. 정상군을 제외한 각 군은 만성 구속법과 꼬리 집게 자극법을 복합하여 간기울결 쥐 모델을 복제하였다. 모델 완료 후 각 군별로 해당 약물을 21일 연속 투여하였다. 효소면역측정법(ELISA)으로 간울 쥐 혈청에서 코르티코스테론(CORT), 테스토스테론(T), 에스트라디올(E₂)을 측정하였다. 전자 분석 저울을 사용하여 쥐의 체중, 고환 및 부고환 무게를 측정하고 이를 바탕으로 고환 지수와 부고환 지수를 계산하였다. 전자동 정자 분석 시스템으로 정자 농도와 활력을 측정하였다. 헤마톡실린-에오신(HE) 염색으로 고환 조직의 조직학적 변화를 관찰하여 병리 형태 변화를 평가하였다. 유세포 분석기 및 미토콘드리아 막 전위 검출 시약 키트(JC-1)와 같은 형광 탐침을 이용하여 정자의 미토콘드리아 막 전위 수준을 분석하였다. 액체 크로마토그래피-질량 분석기(LC-MS)를 이용하여 정자의 지질 대사 변화를 검출하고 대사 차이 물질을 선별하였다. ELISA로 아세틸-CoA(Acetyl-CoA), 아실-CoA(Acyl-CoA) 활성 및 ATP(아데노신 삼인산) 수준을 측정하였다. 면역형광법(IF)으로 고환 조직 ACSL4의 발현을 검출하였다. 웨스턴 블롯(Western blot)으로 고환 조직의 ACSL4, 카니틴 팔미토일트랜스퍼라제 1(CPT1) 단백질 발현 수준을 측정하였다. 정상군과 비교했을 때, LC-MS는 24개의 차등 지방산 대사물을 선별했으며 서간보신욱린탕 개입 후 11개의 차등 지방산 대사물이 상향 조절되었다. 경로 풍부도 분석 결과 지방산 생합성 및 지방산 대사와 관련된 것으로 나타났다. 정상군과 비교하여 모델군 쥐의 정자 밀도 및 활동도, 부고환 지수, 미토콘드리아 막 전위가 유의하게 감소했으며 Acetyl-CoA, Acyl-CoA 활성, ATP 함량이 유의하게 감소했고 ACSL4, CPT1 단백질 발현도 유의하게 감소했다(P<0.01). 모델군과 비교하여 서간보신욱린탕 각 용량군 쥐의 정자 밀도 및 활동도, 부고환 지수, 미토콘드리아 막 전위가 유의하게 증가했고 Acetyl-CoA, Acyl-CoA 활성, ATP 함량도 유의하게 증가했으며(P<0.01), ACSL4, CPT1 단백질 발현도 뚜렷이 증가했다(P<0.05, P<0.01). 결론 서간보신욱린탕은 ACSL4 매개 미토콘드리아 지방산 β-산화를 활성화하여 ATP 생성을 증가시키고, 이를 통해 간기울결 쥐의 정자 활력을 개선할 수 있다.

서간보신욱린탕;정서;간기울결;정자 활력;미토콘드리아;지방산 β-산화