O objetivo é investigar o mecanismo pelo qual a Eupatilina (Eup) inibe a proliferação, invasão e metástase do câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC) por meio da via de sinalização EZH2/H3k27me3 (homólogo do gene zeste Enhancer 2 / trimetilação da lisina 27 na histona H3). Métodos: Em experimentos in vivo, um modelo de tumor subcutâneo em camundongos nus H1299 foi estabelecido para avaliar o efeito antitumoral do Eup, e foi utilizada imunohistoquímica (IHC-P) para detectar o efeito do Eup na expressão de proteínas relacionadas à proliferação e invasão: antígeno nuclear da proliferação celular (PCNA), metaloproteinases de matriz (MMP)-2 e MMP-9, e fator de crescimento endotelial vascular A (VEGFA). Em experimentos celulares in vitro, a viabilidade das células H1299 foi avaliada sob diferentes concentrações de Eup (0~200 μmol·L^-1) por meio do teste CCK-8 para selecionar a concentração adequada. O efeito do Eup na proliferação foi avaliado por meio de clonagem e ensaio EdU; a migração e invasão foram avaliadas por ensaios de raspagem e invasão; a angiogênese foi avaliada com células endoteliais da veia umbilical humana (HUVEC). Uma análise transcriptômica foi conduzida para identificar os principais alvos e funções do Eup, complementada por acoplamento molecular e simulação de dinâmica molecular para prever a capacidade e estabilidade de ligação entre o Eup e seus alvos. Os ensaios de Western blot detectaram o efeito do Eup nas proteínas da via EZH2/H3K27me3 e na expressão das proteínas relacionadas à proliferação e invasão PCNA, MMP-2, MMP-9 e VEGFA. Resultados: No modelo de tumor subcutâneo em camundongos nus, o grupo Eup demonstrou uma inibição dependente da dose do crescimento tumoral heterotópico das células H1299, com aumento significativo da taxa de inibição do tumor (p<0,05) em comparação com o grupo controle. Os resultados da IHC-P mostraram que no grupo Eup de alta dose houveram inibições significativas da expressão de PCNA, MMP-2, MMP-9 e VEGFA in vivo (p<0,05). Em experimentos celulares in vitro, o Eup inibiu a proliferação, invasão e migração das células NSCLC de forma dependente da dose em comparação com o grupo controle. A análise transcriptômica revelou uma redução significativa na expressão de EZH2, associada à inibição da metástase tumoral. O acoplamento molecular e a simulação mostraram forte afinidade e estabilidade da ligação entre Eup e EZH2. Western blot confirmou a inibição dependente da dose das proteínas EZH2, H3K27me3, PCNA, MMP-2, MMP-9 e VEGFA tanto in vivo quanto in vitro (p<0,05). A superexpressão de EZH2 por transfecção plasmídica reverteu parcialmente o efeito inibitório do Eup nas proteínas-chave envolvidas na proliferação e invasão das células H1299. Conclusão: O Eup inibe eficazmente a proliferação, migração e invasão das células H1299 tanto in vivo quanto in vitro, provavelmente por meio da inibição da via de sinalização EZH2/H3K27me3 e pela supressão da expressão das proteínas relacionadas à proliferação e invasão PCNA, MMP-2, MMP-9 e VEGFA. A Eupatilina pode ser um agente ativo promissor para inibir a proliferação e invasão do NSCLC.

câncer de pulmão de células não pequenas;Eupatilina;via de sinalização Zeste Enhancer Homolog 2 / trimetilação da lisina 27 na histona H3 (EZH2/H3K27me3);proliferação;invasão