Mecanismo do emplastro Jin Yang Ding Tong bloqueando canais iônicos TRPs para melhorar a hipersensibilidade periférica e fibrose sinovial na osteoartrite do joelho
Este estudo visa investigar o mecanismo pelo qual o emplastro Jin Yang Ding Tong melhora a hipersensibilidade periférica e a fibrose sinovial em ratos com osteoartrite do joelho (KOA) através do bloqueio dos canais iônicos de potenciais transitórios (TRPs). Os componentes ativos no líquido recebido por via transdérmica do emplastro foram identificados por cromatografia líquida ultrarrápida acoplada a espectrometria de massa por ionização por electrospray em tandem (UPLC-ESI-QTRAP MS/MS). O modelo de KOA em ratos foi estabelecido por injeção intra-articular de ácido mono-iodoacético, e os ratos foram divididos aleatoriamente em grupo controle, grupo KOA, grupo do emplastro composto Nanxing e grupo do emplastro Jin Yang, com 8 ratos em cada grupo. Os grupos de emplastros composto Nanxing e Jin Yang receberam tratamento tópico. Ao final do período de intervenção, foram avaliados os limiares de dor aos estímulos frios e mecânicos, e medido o diâmetro transversal da articulação do joelho. Os níveis séricos de fatores inflamatórios como interleucina-1β (IL-1β), fator de necrose tumoral-α (TNF-α), fator de crescimento nervoso (NGF) e peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP) foram medidos por ELISA. A expressão das proteínas TRPA1, TRPM8, TRPV1, TRPV4, fator de crescimento transformador-β (TGF-β) e fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) no tecido sinovial foi avaliada por Western blot. As alterações patológicas do tecido sinovial foram observadas por colorações de hematoxilina-eosina (HE), Masson e Sirius Red, e a expressão do colágeno tipo I e α-SMA foi detectada por imunofluorescência múltipla. Os resultados do UPLC-MS/MS identificaram 35 compostos ativos no líquido transdérmico do emplastro Jin Yang, incluindo ácidos fenólicos, flavonoides, quinonas, alcaloides, terpenos, lignanas e cumarinas, como berberina, paeoniflorina, ácido ferúlico e ácido cafeico, com efeitos claros anti-inflamatórios, analgésicos e antifibróticos. Em comparação com o grupo controle, os ratos KOA apresentaram uma redução significativa nos limiares de dor a estímulos frios e mecânicos (P<0,01); após 14 e 28 dias de intervenção com o emplastro Jin Yang, os limiares de dor aumentaram significativamente em comparação ao grupo KOA (P<0,01), sem diferenças estatísticas em relação ao grupo composto Nanxing. Além disso, o emplastro Jin Yang reduziu os níveis séricos de IL-1β, TNF-α, NGF e CGRP (P<0,01); diminuiu a expressão das proteínas TRPA1, TRPM8, TRPV1, TRPV4, TGF-β e VEGF no tecido sinovial (P<0,01); melhorou os danos patológicos sinoviais e reduziu a intensidade de fluorescência do colágeno tipo I e α-SMA, que estavam significativamente aumentadas (P<0,01). Conclusão: O emplastro Jin Yang Ding Tong pode melhorar a hipersensibilidade periférica e a fibrose sinovial em ratos KOA, regulando negativamente os canais iônicos TRPs e os fatores inflamatórios e fibróticos relacionados.
关键词
Emplastro Jin Yang;Osteoartrite do joelho;Canais iônicos de potenciais transitórios (TRPs);Hipersensibilidade periférica;Fibrose sinovial;Sinovite