O objetivo é investigar o efeito do extrato aquoso de Zhi Mu (AR) na melhora em ratos modelo da doença de Alzheimer (AD) e estudar seu possível mecanismo de ação. Métodos: ratos machos receberam injeção intraperitoneal de D-galactose (100 mg·kg⁻¹) por 42 dias. No dia 14, foi injetada 1 μL de solução de β-amiloide (Aβ₍25-35₎, 2 g·L⁻¹) na região do hipocampo. Os ratos foram aleatoriamente divididos em grupo modelo, grupos de extrato Zhi Mu em doses baixa (0.6 g·kg⁻¹), média (1.2 g·kg⁻¹) e alta (2.4 g·kg⁻¹), e grupo positivo (donepezila, 5 mg·kg⁻¹). Outro grupo saudável recebeu somente injeção de 1 μL de solução salina estéril no hipocampo como grupo simulado; no 21º dia, os grupos medicados começaram a ser tratados por via oral, os grupos em branco e modelo receberam volume equivalente de solução salina, uma vez ao dia, por 21 dias consecutivos. O teste de labirinto aquático de Morris avaliou a capacidade de aprendizagem e memória; a coloração hematoxilina-eosina (HE) observou danos cerebrais; a coloração TUNEL observou a apoptose dos neurônios cerebrais; o ensaio imunoenzimático (ELISA) mediu os níveis de interleucina-1β (IL-1β), fator de necrose tumoral-α (TNF-α) e interleucina-10 (IL-10) no tecido cerebral. As células microgliais BV2 foram cocultivadas com Aβ₍25-35₎ a 40 μmol·L⁻¹ por 2 horas, depois a proliferação celular e viabilidade foram avaliadas pelo ensaio CCK-8 para escolher a melhor concentração de soro contendo Zhi Mu (S-AR). Os experimentos celulares foram divididos em grupo em branco, grupo Aβ₍25-35₎, grupo S-AR, grupo EX527 [inibidor de silent information regulator 1 (SIRT1)], e grupo S-AR+EX527. A imunofluorescência mediu a expressão de CD16, CD206 e da proteína de alta mobilidade B1 (HMGB1); o Western blot detectou CD16, sintase de óxido nítrico induzível (iNOS), CD206, arginase (Arg) e proteínas relacionadas à via sinalizadora SIRT1/HMGB1/fator nuclear de transcrição-κB (NF-κB). Resultados: in vivo, comparado com o grupo simulado, o grupo modelo apresentou diminuição no número de travessias da plataforma e tempo no quadrante alvo (P<0.01), aumento do tempo latente de fuga e taxa de apoptose neuronal no hipocampo (P<0.01), lesões evidentes no hipocampo, aumento da expressão de IL-6, TNF-α, IL-10, CD16, iNOS (P<0.01), com tendência de aumento em CD206 e Arg sem significância estatística. Comparado ao grupo modelo, todas as doses de Zhi Mu aumentaram significativamente o número de travessias da plataforma e o tempo no quadrante alvo (P<0.05, P<0.01), melhoraram as lesões no hipocampo, reduziram o tempo latente de fuga e a taxa de apoptose neuronal, diminuíram a expressão de TNF-α, IL-6, CD16, iNOS (P<0.05, P<0.01) e aumentaram a expressão de IL-10, CD206, Arg (P<0.05, P<0.01). In vitro, comparado com o grupo em branco, o grupo Aβ₍25-35₎ apresentou aumento da intensidade da fluorescência de CD206, CD16, HMGB1 e expressão das proteínas iNOS, CD16 (P<0.01), com tendência ao aumento de CD206 e Arg sem significância estatística. Após intervenção com S-AR, a intensidade de fluorescência de CD206 e expressão das proteínas Arg, CD206 aumentaram (P<0.01), enquanto a intensidade de fluorescência de CD16, HMGB1 e expressão das proteínas iNOS, CD16 diminuíram (P<0.01); tais efeitos foram revertidos por EX527 (P<0.05, P<0.01). Além disso, comparado ao grupo em branco, o grupo Aβ₍25-35₎ apresentou aumento significativo da expressão citoplasmática de HMGB1 e da razão p-NF-κB p65/NF-κB p65 (P<0.01), enquanto expressões de SIRT1 e HMGB1 nuclear diminuíram significativamente (P<0.01); o grupo S-AR apresentou tendência oposta, com efeitos revertidos por EX527 (P<0.01). Conclusão: Zhi Mu pode regular a polarização das microgliais através da via de sinalização SIRT1/HMGB1/NF-κB, melhorando a neuroinflamação em modelo de AD e exercendo efeito protetor.

Zhi Mu; doença de Alzheimer; polarização microglial; regulador silencioso da informação 1 (SIRT1)/ proteína de alta mobilidade B1 (HMGB1)/ fator nuclear de transcrição-κB (NF-κB)