Objetivo: Investigar o efeito do polissacarídeo de Astrágalo (APS) na regulação da via de sinalização do receptor do tipo Toll 4 (TLR4)/fator nuclear de transcrição-κB (NF-κB) na polarização das células microgliais BV2 no modelo de privação de oxigênio/glicose/reoxigenação (OGD/R). Método: Foi estabelecido um modelo de lesão celular BV2 por OGD/R, dividido em grupo controle, grupo OGD/R e grupo APS (0,4 g·L^-1 APS); a lesão neuroinflamatória induzida por lipopolissacarídeo (LPS) recebeu intervenção com APS, dividida em grupo controle, grupo LPS (1 mg·L^-1 LPS) e grupo APS (0,4 g·L^-1 APS + 1 mg·L^-1 LPS). A viabilidade celular foi avaliada pelo teste CCK-8; a morfologia celular foi observada por microscópio invertido; o conteúdo de óxido nítrico (NO) no sobrenadante foi medido pelo método de Griess; os níveis de secreção de fator de necrose tumoral-α (TNF-α), interleucinas (IL)-6, IL-10 e IL-4 foram determinados por ELISA; a imunofluorescência (IF) detectou a taxa de duplo-positivo de moléculas proteicas ligadoras de cálcio Iba-1/sintase de óxido nítrico induzível (Iba-1⁺/iNOS⁺) e Iba-1/arginase 1 (Iba-1⁺/Arg1⁺) e a taxa de translocação nuclear do fator NF-κB p65; a expressão proteica de Iba-1, iNOS, Arg1, TLR4 e NF-κB p65 foi avaliada por Western blot. Resultados: No modelo de lesão OGD/R, em comparação com o grupo controle, as células BV2 foram ativadas e apresentaram alterações ameboides, com aumentos significativos nos níveis de NO, TNF-α e IL-6 (P<0,01), aumentos significativos na taxa de dupla positividade Iba-1⁺/iNOS⁺ e na expressão proteica de Iba-1 e iNOS (P<0,01), assim como um aumento significativo na translocação nuclear de NF-κB p65 e na expressão proteica de TLR4 e NF-κB p65 (P<0,01). Os níveis de IL-10 e IL-4 diminuíram significativamente (P<0,01), assim como a taxa duplo-positiva Iba-1⁺/Arg1⁺ e a expressão proteica de Arg1 (P<0,01). Em comparação com o grupo OGD/R, o grupo APS (0,4 g·L^-1) apresentou diminuição da ativação celular, redução significativa nos níveis de NO, TNF-α e IL-6 (P<0,01), redução significativa na taxa duplo-positiva Iba-1⁺/iNOS⁺ e na expressão proteica de Iba-1 e iNOS (P<0,01), redução significativa na translocação nuclear de NF-κB p65 e na expressão de TLR4 e NF-κB p65 (P<0,01), aumento significativo dos níveis de IL-10 e IL-4 (P<0,01), bem como aumento da taxa duplo-positiva Iba-1⁺/Arg1⁺ e expressão proteica de Arg1 (P<0,01). No modelo neuroinflamatório induzido por LPS, em comparação com o grupo controle, o grupo LPS apresentou maior ativação celular, níveis elevados de NO, TNF-α e IL-6, taxa duplo-positiva Iba-1⁺/iNOS⁺, translocação nuclear de NF-κB p65 e expressão proteica de Iba-1, iNOS, TLR4 e NF-κB p65 (P<0,01), níveis reduzidos de IL-10 e IL-4, taxa duplo-positiva Iba-1⁺/Arg1⁺ e expressão proteica de Arg1 (P<0,01). Em comparação com o grupo LPS, o grupo APS apresentou redução da ativação celular, diminuição dos níveis de NO, TNF-α e IL-6, taxa duplo-positiva Iba-1⁺/iNOS⁺, translocação nuclear de NF-κB p65 e expressão proteica de Iba-1, iNOS, TLR4 e NF-κB p65 (P<0,01), aumento dos níveis de IL-10 e IL-4, taxa duplo-positiva Iba-1⁺/Arg1⁺ e expressão proteica de Arg1 (P<0,01). Conclusão: APS pode atenuar a ativação das células microgliais e promover sua polarização para o fenótipo M2 através da inibição da ativação da via de sinalização TLR4/NF-κB, aliviando assim a resposta neuroinflamatória pós-OGD/R.

Polissacarídeo de Astrágalo (APS); modelo de privação de oxigênio/glicose/reoxigenação; células microgliais BV2; lipopolissacarídeo (LPS); via de sinalização do receptor do tipo Toll 4 (TLR4)/fator nuclear NF-κB