O objetivo é explorar o efeito da fórmula para dissipar estase e desintoxicar nas células endoteliais microvasculares cerebrais (BMECs) após dano causado por privação de glicose e oxigênio (OGD) e seu mecanismo de intervenção. Métodos: utilizou-se o método de detecção de proliferação e atividade celular (CCK-8) para determinar o tempo de OGD, selecionando a concentração eficaz do soro contendo a fórmula para dissipar estase; as células foram distribuídas aleatoriamente em grupo com meio de cultura com soro em branco (KBXQ), grupo modelo (OGD), grupo HYXQ (OGD + soro contendo a fórmula), grupo 3-metiladenina (3-MA) (OGD + 3-MA). Observou-se a morfologia celular com microscópio invertido; observou-se o número de autofagossomos e autolisossomos dentro das células com microscópio eletrônico; a taxa de sobrevivência celular foi detectada por CCK-8; a taxa de apoptose por marcação terminal in situ (TUNEL); expressão das proteínas LC3 e occludina por imunofluorescência; permeabilidade da monocamada celular foi medida. As células foram distribuídas aleatoriamente em grupos KBXQ, modelo (OGD), HYXQ, grupo inibidor de PI3K (LY294002) (OGD + LY294002), grupo HYXQ + LY294002 (OGD + soro contendo a fórmula + LY294002). Os níveis de expressão das moléculas-chave da autofagia Atg6 homólogo do fermento 1 (Beclin1), LC3Ⅱ/LC3Ⅰ, proteína adaptadora seletiva (p62), Occludin, PI3K fosforilada (p-PI3K), PI3K, proteína quinase B fosforilada (p-Akt), Akt, proteína alvo da rapamicina em mamíferos fosforilada (p-mTOR) e proteína mTOR foram detectados por Western blot. Resultados: foi selecionado o OGD de 6 h como a condição ótima do modelo, e 5% como a melhor concentração volumétrica de soro contendo a fórmula. Em comparação com o grupo KBXQ, o grupo modelo apresentou danos celulares evidentes sob microscópio invertido, aumento significativo no número de autofagossomos e autolisossomos ao microscópio eletrônico, redução significativa na taxa de sobrevivência celular (P<0,01), aumento significativo na taxa de apoptose (P<0,01), aumento significativo na intensidade de fluorescência da proteína LC3 (P<0,01), diminuição significativa na intensidade de fluorescência da proteína Occludin (P<0,01) e aumento significativo na permeabilidade da monocamada celular (P<0,01); em comparação com o grupo modelo, os grupos HYXQ e 3-MA melhoraram significativamente o dano celular, com redução significativa no número de autofagossomos e autolisossomos, aumento significativo na taxa de sobrevivência (P<0,01), diminuição significativa na taxa de apoptose (P<0,01), diminuição significativa na intensidade de fluorescência de LC3 (P<0,01), aumento significativo na intensidade de fluorescência de Occludin (P<0,01) e diminuição na permeabilidade da monocamada (P<0,05). Os resultados do Western blot mostraram que em comparação com KBXQ, o grupo modelo apresentou aumento significativo na expressão de Beclin1 e LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0,01), diminuição significativa nos níveis de expressão de p62, Occludin, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt e p-mTOR/mTOR (P<0,01); em comparação com o modelo, o grupo HYXQ apresentou diminuição significativa da expressão de Beclin1 e LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0,01) e aumento significativo de p62, Occludin, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt e p-mTOR/mTOR (P<0,01); o grupo LY294002 apresentou aumento óbvio da expressão de Beclin1 e LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0,05, P<0,01) e diminuição significativa de p62, Occludin, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt e p-mTOR/mTOR (P<0,01); em comparação com o grupo LY294002, o grupo HYXQ+LY294002 apresentou diminuição significativa da expressão de Beclin1 e LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0,01) e aumento significativo de p62, Occludin, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt e p-mTOR/mTOR (P<0,01). Conclusão: A fórmula para dissipar estase e desintoxicar exerce efeito protetor nas BMECs lesionadas por OGD, possivelmente ativando a via autofágica PI3K/Akt/mTOR, inibindo a superexpressão da autofagia, protegendo assim a proteína Occludin e a função da barreira endotelial.

células endoteliais microvasculares cerebrais; autofagia; fórmula para dissipar estase; fosfatidilinositol 3-quinase (PI3K); proteína quinase B (Akt)